本发明属于生物,具体涉及一种能够促进xvii型胶原蛋白表达的胶原蛋白肽及其制备方法和应用。
背景技术:
1、xvii型胶原蛋白是一种跨膜型非成纤维胶原蛋白,其为三条相同α1(xvii)链构成的均相三聚体,分为胞内、跨膜、胞外三大类结构域。xvii型胶原蛋白形成的半桥粒将表皮干细胞连接到基底膜,同时调节肌动蛋白和角丝蛋白网络,协调表皮干细胞迁移、更新自净表皮细胞。因此,xvii型胶原蛋白在调节皮肤更新、自净中起到十分重要的调节作用,xvii型胶原蛋白含量不足会呈现皮肤萎缩和脆弱、色素沉着和脱发。研究表明,xvii型胶原蛋白(col17a1)除了随着年龄的增大而变少外,日益增加的生活与工作压力,环境污染、电子辐射、熬夜及高热量食品的摄入等也加速了xvii型胶原蛋白的流失。xvii型胶原蛋白在各种动物体内的含量都极为稀少,提取难度也很大。
2、因此,本领域亟需有新的有效延缓xvii型胶原蛋白流失速度的方法。
技术实现思路
1、为解决上述问题,本发明提供了一种能够诱导体内xvii型胶原蛋白表达的胶原蛋白肽,以提高体内xvii型胶原蛋白含量。
2、一方面,本发明提供了一种能够促进xvii型胶原蛋白表达的胶原蛋白肽,其特征在于,该胶原蛋白肽采用包含以下步骤的方法制备:
3、1)向胶原粗提物中加水,调节胶原粗提物溶液的ph值为7-9,加入胶原粗提物重量0.5-3%的复合蛋白酶;在温度为40-80℃的条件下,酶解2-8小时,灭酶后,得到酶解液;其中,所述复合蛋白酶由碱性蛋白酶、氨基肽酶和生姜蛋白酶组成;
4、2)调整酶解液的ph值为6-7.5,加入胶原粗提物重量1-10%的发酵剂,在30-50℃的温度下发酵40-100小时,灭菌后得到发酵液;所述发酵剂由枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌组成;
5、3)将发酵液固液分离后,收集滤液。
6、另一方面,本发明还提供了所述胶原蛋白肽在制备化妆品以及功能性食品中的应用。
7、另一方面,本发明还提供了一种胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,该制备方法包括以下步骤:
8、1)向胶原粗提物中加水,调节胶原粗提物溶液的ph值为7-9,加入胶原粗提物重量0.5-3%的复合蛋白酶;在温度为40-80℃的条件下,酶解2-8小时,得到酶解液;其中,所述复合蛋白酶由碱性蛋白酶、氨基肽酶和生姜蛋白酶组成;
9、2)调整酶解液的ph值为6-7.5,加入胶原粗提物重量1-10%的发酵剂,在30-50℃的温度下发酵40-100小时,灭菌后得到发酵液;所述发酵剂由枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌组成;
10、3)将发酵液固液分离后,收集滤液。
11、胶原蛋白肽是以胶原蛋白为原料来源的肽类物质,是一类具有多种生物学功能的小分子氨基酸序列。不同原料来源、不同预处理工艺和不同的制备方法会得到不同平均分子量、不同特征肽段的胶原蛋白肽。
12、本发明提供了一种能够促进xvii型胶原蛋白表达的胶原蛋白肽,具有较低的平均分子量,能够容易通过消化吸收或者通过皮肤吸收,并能够显著促进xvii型胶原蛋白的表达。与对照相比,采用本申请提供的胶原蛋白肽能够使xvii型胶原蛋白表达增加一倍以上。
13、此外,微生物在生长过程中合成和分泌多种酶系,利用微生物发酵来降解胶原,从而产生特定小分子活性肽。
14、本发明提供了一种胶原蛋白肽的制备方法,通过采用特定的酶解步骤和特定的菌发酵步骤,获得了能够促进xvii型胶原蛋白表达的胶原蛋白肽。
1.一种能够促进xvii型胶原蛋白表达的胶原蛋白肽,其特征在于,该胶原蛋白肽采用包含以下步骤的方法制备:
2.根据权利要求1所述的胶原蛋白肽,其特征在于,在所述步骤1)中,所述碱性蛋白酶、所述氨基肽酶和所述生姜蛋白酶的质量比为2.5-4:0.5-1.5:1;优选地,所述复合蛋白酶的加入量为所述胶原粗提物的0.5-2%,酶解的温度为55-75℃,酶解的时间为3-6小时。
3.根据权利要求1所述的胶原蛋白肽,其特征在于,在所述步骤2)中,所述枯草芽孢杆菌、所述凝结芽孢杆菌和所述蜡样芽孢杆菌的质量比为1-3:1-3:1;优选地,所述枯草芽孢杆菌、所述凝结芽孢杆菌和所述蜡样芽孢杆菌的质量比为1-2:1-2:1,在温度为35-42℃下发酵50-80小时。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的胶原蛋白肽在制备化妆品以及功能性食品中的应用。
5.一种胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,该制备方法包括以下步骤:
6.根据权利要求5所述的胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,在所述步骤1)中,所述碱性蛋白酶、所述氨基肽酶和所述生姜蛋白酶的质量比为2.5-4:0.5-1.5:1;优选地,所述复合蛋白酶的加入量为胶原粗提物的0.5-2%,酶解的温度为55-75℃,酶解的时间为3-6小时。
7.根据权利要求5所述的胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,在所述步骤2)中,所述枯草芽孢杆菌、所述凝结芽孢杆菌和所述蜡样芽孢杆菌的质量比为1-3:1-3:1,在温度为35-42℃下发酵50-80小时。
8.根据权利要求5所述的胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述胶原粗提物按照以下步骤获得:将含有胶原的原料依次进行脱脂、水提和酸提。
9.根据权利要求5所述的胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述水提的步骤包括在沸水中提取3-6小时;优选地,所述酸提包括在80-95℃下在ph 2-5的酸性溶液中提取1-3小时。
10.根据权利要求8所述的胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,该方法还包括在所述步骤3)后将所述滤液进行纯化的步骤;优选地,所述纯化包括超滤和纳滤。