一种榆黄菇子实体多糖及其制备方法和应用

本发明涉及一种榆黄菇子实体多糖及其制备方法和应用，属于食用菌加工及生物医药领域。

背景技术：

1、榆黄菇(pleurotus citrinopileatus)又名金顶侧耳，因其诱人的口感和对健康的益处，在包括中国、日本在内的东亚地区广受欢迎，成为一种美食。榆黄菇富含生物活性化合物，包括多糖、蛋白质、糖蛋白、酚类物质、氨基酸和类固醇。在这些成分中，榆黄菇多糖作为主要成分，具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎、免疫调节、抗肿瘤和降糖等作用。因此榆黄菇多糖被应用于医学和保健等多个领域，受到了研究人员的广泛关注。

2、目前国内外关于榆黄菇多糖的提取方法主要集中于热水浸提、中温碱提、超声辅助提取、酶法提取等常规的提取方法。常规提取方法具有耗时长、成本高、效率低、不环保且多糖纯度不高等缺点。深共晶溶剂(deep eutectic solvent，des)是近年来新发展起来的一种绿色、新型介质。des是由一定摩尔比的氢键受体bha(如季铵盐)和bhd(如酰胺、有机酸、糖类和多元醇等)组合而成的两组分或多组分混合物，熔点显著低于单个组分的熔点。des因其较低的成本、优良的提取效果和可降解性被广泛关注，但尚未见运用des提取分离榆黄菇子实体多糖的研究。

技术实现思路

1、本发明提供了一种榆黄菇子实体多糖及其制备方法和应用。本发明提供的榆黄菇多糖是通过深共晶溶剂提取获得的，且榆黄菇多糖具有良好的免疫增强作用，无毒副作用，可广泛应用于食用菌加工及生物医药领域。

2、本发明榆黄菇多糖dpcp，是从榆黄菇子实体提取分离后获得，经过hplc测定分析，分子量为3.02×105da；总糖含量为96.22％，由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖组成，摩尔比为1.88:2.56:3.98:28.36:25.36:1。

3、本发明榆黄菇多糖dpcp的制备方法，包括如下步骤：

4、步骤1：取干燥榆黄菇超微粉碎后过80目网筛，获得榆黄菇粉末；将干燥的榆黄菇粉末与80-90％的无水乙醇按1g：10ml的料液比混合，于60-80℃水浴锅中热水回流2-4h，离心收集沉淀，烘干后得到预处理的榆黄菇脱脂物；

5、步骤2：以氯化胆碱为氢键受体，乙二醇为氢键供体，按照摩尔比1：2制备深共晶溶剂des，des含水量为50wt％；

6、步骤3：将步骤1获得的榆黄菇脱脂物按照1g:15-25ml的料液比加入深共晶溶剂des中，水浴2-4h，重复三次；收集三次上清液，分离上清液并浓缩，加入4倍体积的乙醇，4℃静置12h，7000×g离心15min离心收集沉淀物；

7、步骤4：将步骤3获得的沉淀物用去离子水溶解，采用sevag法除蛋白，除尽蛋白后，于3500da透析袋中透析，流水透析48h，静水透析48h，冷冻干燥后得榆黄菇粗多糖；

8、步骤5：将步骤4获得的榆黄菇粗多糖用去离子水溶解，经过deae-sephorase ff凝胶柱分离，水洗部分经高效液相检测收集合并相同组分的多糖，真空冷冻干燥得到榆黄菇均一组分多糖dpcp。

9、本发明采用氯化胆碱-乙二醇制备的深共晶溶剂作为萃取剂，提取榆黄菇多糖组分，较传统的热水浸提法，提取效率显著增加，糖含量提高了25.12％，蛋白含量减少了76.10％，得率提高了16.84％。

10、本发明榆黄菇多糖dpcp在制备免疫调节制剂中的应用。

11、本发明制备的榆黄菇多糖dpcp对raw264.7巨噬细胞无明显的毒性作用，且在一定浓度下对巨噬细胞释放一氧化氮(no)以及细胞因子具有一定促进作用，即具有良好的免疫调节活性。

12、与现有技术相比，本发明的有益效果体现在：

13、1、本发明的氯化胆碱-乙二醇深共晶溶剂使本发明方法具有绿色、高效、操作简单、能耗低、成本低、且多糖提取率与春都高等优点，本发明方法的应用对榆黄菇多糖及其他天然产物活性成分开发与高值化利用具有重要的推动作用；

14、2、本发明采用深共晶溶剂法提取所得榆黄菇多糖，能够显著增强巨噬细胞的一氧化氮释放能力和促进细胞因子的释放，具有良好的免疫调节活性，可为榆黄菇多糖作为功能性食品或免疫增强剂的研发提供理论基础和技术支撑。

技术特征：

1.一种榆黄菇子实体多糖，其特征在于：

2.权利要求1所述榆黄菇多糖的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：

6.权利要求1所述榆黄菇子实体多糖在制备免疫调节制剂中的应用。

技术总结
本发明公开了一种榆黄菇子实体多糖及其制备方法和应用。所述榆黄菇子实体多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖组成，摩尔比为1.88:2.56:3.98:28.36:25.36:1，分子量为3.02×10<supgt;5</supgt;Da，总糖含量为96.22％。所述多糖可通过深共晶溶剂氯化胆碱‑乙二醇提取，经醇沉、除蛋白、阴离子交换柱分离纯化得到。本发明提供的多糖无明显毒副作用，具有良好的免疫增强能力，可作为天然高效免疫增强剂，在医药保健等领域具有巨大的应用前景。

技术研发人员：陆永明,李燕霞,时乐,吴雨濛,沈慧娴,陈娟
受保护的技术使用者：安徽大学
技术研发日：
技术公布日：2024/5/9