一种长链非编码RNA及其编码多肽在肝癌风险/进展评估和治疗中的应用

文档序号:39307510发布日期:2024-09-06 01:23阅读:103来源:国知局

本发明属于生物医药,具体涉及一种长链非编码rna及其编码多肽在肝癌风险/进展评估和治疗中的应用。


背景技术:

1、肝癌的进展与肝脏组织硬度密切相关,伴随肝癌进展过程,肝脏组织硬度逐渐升高,而细胞外基质(ecm)硬度的变化是肝脏组织硬度变化的主要原因。ecm硬度变化造成肝癌细胞力学微环境的变化,导致肝癌细胞的增殖、迁移和耐药性等特性,从而促进肝癌的进展。

2、长链非编码rna(longnon-codingrna,lncrna)在包括肝癌在内的多种类型肿瘤中发挥重要作用,调节肿瘤的发生发展过程。而近些年的研究表明lncrna发挥作用的方式除了参与转录调控、染色质结构与表观遗传调控以及rna间接作用调控等经典方式以外,还可以翻译一段多肽在多种肿瘤中起着促进或抑制肿瘤进展的作用。尽管lncrna编码肽在各种类型肿瘤中具有重要功能,但是,关于lncrna编码肽在肝癌细胞对基质硬度的响应中所发挥的具体作用及其分子机制,仍需要进一步的研究。


技术实现思路

1、本发明以肝癌为研究背景,在不同硬度基底上差异表达的lncrna中筛选出具有编码潜力的lncrna,研究其编码的小肽对肝癌细胞生物学行为的影响,确定出lncrnaac016727.1编码的多肽sap及其对肝癌的影响,基于此,本发明提供了如下技术方案:

2、本发明的第一方面提供了一种检测生物标志物的试剂在制备用于肝癌风险或进展评估的产品中的用途,所述生物标志物为lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽。

3、上述的用途技术方案中,所述lncrnaac016727.1的转录本核苷酸序列如seq idno.15所示,其编码的多肽的氨基酸序列如seq id no.16所示。

4、上述的用途技术方案中,lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽高表达预示着患者的肝癌高风险或肝癌进展。

5、本发明的第二方面提供一种产品,所述产品含有lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽的检测试剂。

6、上述的产品,检测lncrnaac016727.1的试剂包括特异性扩增lncrnaac016727.1的引物,所述引物的序列为:

7、正向引物:5’-gcctcctcggtccaagccattct-3’;

8、反向引物:5’-atgtcgcagatacgggtaaataa-3’;

9、所述产品包括芯片、试剂盒或试纸,用于患者肝癌风险或进展评估。

10、本发明的第三方面提供抑制lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽表达的物质在制备肝癌治疗药物中的应用。

11、上述的应用技术方案中,所述物质包括化合物、蛋白、核苷酸分子。

12、上述的应用技术方案中,所述核苷酸分子包括sirna和shrna,所述shrna选自shrna#1、shrna#2,核苷酸序列如下:

13、

14、上述的应用技术方案中,所述物质抑制肝癌细胞的增殖、迁移和/或侵袭,或者抑制肝癌的进展。

15、本发明的第四方面提供一种治疗肝癌的药物,所述药物包含抑制lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽表达的物质;优选所述药物还包含药学上可接受的载体。

16、本发明的有益效果是:

17、利用rnaseq和qrt-pcr筛选hepg2细胞在不同基底硬度上有差异表达的lncrna,并通过orf-gfp融合蛋白载体构建和免疫荧光实验确定出lncrnaac016727.1编码的多肽sap。接着为了探究多肽sap对肝癌细胞增殖的影响,分别构建了过表达多肽sap和敲低多肽sap所在转录本usp34-dt-201表达的mhcc97h与hepg2肝癌稳定细胞株,再以之为研究对象,在细胞水平通过cck-8实验和克隆形成实验检测多肽sap对肝癌细胞增殖能力的影响,在分子水平通过westernblot检测肿瘤细胞增殖相关标志蛋白的表达来验证多肽sap对肝癌细胞增殖的影响。最后为了探究多肽sap对肝癌细胞迁移和侵袭的影响,以上述两类细胞株为研究对象,在细胞水平通过transwell实验检测多肽sap对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响,在分子水平通过westernblot检测肿瘤细胞迁移和侵袭相关标志蛋白的表达来验证多肽sap对肝癌细胞迁移和侵袭的影响。本发明为肝癌肝癌风险或进展评估提供了一种新的生物标志物和一种新的治疗策略。



技术特征:

1.一种检测生物标志物的试剂在制备用于肝癌风险或进展评估的产品中的用途,所述生物标志物为lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽。

2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述lncrnaac016727.1的转录本核苷酸序列如seq id no.15所示,其编码的多肽的氨基酸序列如seq id no.16所示。

3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽高表达预示着患者的肝癌高风险或肝癌进展。

4.一种产品,其特征在于:所述产品含有lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽的检测试剂。

5.根据权利要求4所述的产品,其特征在于:检测lncrnaac016727.1的试剂包括特异性扩增lncrnaac016727.1的引物,所述引物的序列为:

6.抑制lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽表达的物质在制备肝癌治疗药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述物质包括化合物、蛋白、核苷酸分子。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:所述核苷酸分子包括sirna和shrna,所述shrna选自shrna#1、shrna#2,核苷酸序列如下:

9.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述物质抑制肝癌细胞的增殖、迁移和/或侵袭,或者抑制肝癌的进展。

10.一种治疗肝癌的药物,其特征在于:所述药物包含抑制lncrnaac016727.1和/或其编码的多肽表达的物质;优选所述药物还包含药学上可接受的载体。


技术总结
本发明属于生物医药技术领域,公开了一种检测生物标志物的试剂在制备用于肝癌风险或进展评估的产品中的用途,所述生物标志物为lncRNAAC016727.1和/或其编码的多肽;还公开了抑制lncRNAAC016727.1和/或其编码的多肽表达的物质在制备肝癌治疗药物中的应用,以及一种治疗肝癌的药物,所述药物包含抑制lncRNAAC016727.1和/或其编码的多肽表达的物质。本发明为肝癌风险或进展评估提供了一种新的生物标志物和一种新的治疗策略。

技术研发人员:唐丽灵,豆远尧,王秋霞
受保护的技术使用者:重庆大学
技术研发日:
技术公布日:2024/9/5
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