一种生物活性肽PCT-2及其制备方法和应用

本发明涉及一种小分子肽及其制备方法和应用，具体涉及一种具有抗氧化和肠道菌群调节功能的小分子生物活性肽pct-2及其制备方法和在抗氧化和肠道菌群调节功能食品中的应用，属于生物。

背景技术：

1、人体肠道微生物主要包括细菌、酵母和寄生虫等，它们携带有人体基因数量100倍以上的基因信息，与肥胖、高血压、肠道炎症和心血管疾病等密切相关，有助于调节肠道菌群被写入《允许保健食品声称的保健功能目录》。常见的调节肠道菌群方式是补充益生菌；除此之外，生物活性肽也被发现具有肠道菌群调节作用。陈鸽在论文《鲟鱼肽llle改善氯菊酯诱导的高脂饮食小鼠肥胖的机制研究》中描述了鲟鱼肽llle对肥胖小鼠肠道菌群的调节作用；胡学佳在论文《红娘鱼鱼肉降血压肽的制备及其降血压机理的研究》中描述了红娘鱼鱼肉降血压肽对高血压小鼠肠道菌群的调节作用；siqing fan等在文章《novel anti-hyperuricemic hexapeptides derived from apostichopus japonicus hydrolysateand their modulation effects on the gut microbiota and host microrna profile》中描述了六肽gpagpr和六肽gpsgrp的肠道菌群调节作用。上述文献公开的具有肠道菌群调节功能的生物活性肽结构多样，没有明显的序列结构规律。

2、自由基和机体氧化平衡同样与人体健康密切相关，一旦失衡会导致衰老、癌症、心血管疾病和阿尔茨海默症等的发生。人体内具有较好的自由基动态平衡维持机制，可以通过抗氧化酶、螯合金属离子和清除自由基等发挥作用。若人体内的自由基失衡超出自我调节水平，就需要补充外源性的抗氧化剂。传统的抗氧化剂一般来源于化学合成，存在稳定性差、毒副作用强等缺点，而来自于蛋白水解的抗氧化肽具有安全无毒、稳定性强等优势，更符合消费需求。吴园园等在《带鱼生物活性肽酶法制备和功能特性研究进展》中综述了带鱼抗氧化肽的发现和制备工艺优化；孟乐等在《厚壳贻贝抗氧化肽的分离、鉴定及活性评价》中描述了以厚壳贻贝为原材料，以抗氧化活性为筛选指标，运用酶解技术和现代分离纯化技术制备抗氧化多肽；左依瑾在论文《罗非鱼皮抗氧化肽分离纯化过程对其结构及活性的影响》中详细描述了罗非鱼皮酶解液的抗氧化活性，以及其中的核心功能抗氧化肽组分十肽pgiiglpgpa、八肽avgpvgps和八肽ergppgpp等。上述文献公开的具有抗氧化功能的生物活性肽结构多样，也没有明显的序列结构规律。

3、刘晶等在《螺旋藻生物活性肽的营养健康特性研究进展》中综述了螺旋藻在抗氧化、抗炎性、调节血脂血糖代谢、降血压和抗癌等方面的活性。马艳芳等在《碱性蛋白酶水解螺旋藻制备抗氧化活性肽的工艺优化》中描述了以螺旋藻蛋白为原料制备抗氧化肽的工艺优化过程，但对其中的特定抗氧化肽组分以及对肠道菌群的调节作用均没有报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种筛选自螺旋藻蛋白肽、具有抗氧化和肠道菌群调节功能、可以应用于抗氧化和肠道菌群调节功能食品中的小分子活性肽。

2、为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

3、一种生物活性肽pct-2，所述生物活性肽pct-2的氨基酸序列为mtcedr，如序列表seq id no：6所示，具有抗氧化和肠道菌群调节功能。

4、前述生物活性肽pct-2在抗氧化和肠道菌群调节功能食品中的应用。

5、前述生物活性肽pct-2的一种制备方法，采用固相合成法，具体的：

6、以fmoc保护的氨基酸为原料，以聚苯乙烯树脂为固相载体，采用fmoc固相合成策略进行固相合成。

7、前述生物活性肽pct-2的另一种制备方法，采用酶解法，具体的：

8、（1）取螺旋藻蛋白，加入螺旋藻蛋白9倍质量的水，按照0.5％的酶底比加入复合蛋白酶进行酶解，酶解温度为55℃，ph值为8.0，酶解时间为6h，得到酶解产物，其中，所述复合蛋白酶由碱性蛋白酶和中性蛋白酶按照1：1的质量比混合而成；

9、（2）酶解结束后，用八层纱布对酶解产物进行过滤，去除残渣，得到螺旋藻蛋白肽酶解液；

10、（3）冻干上述螺旋藻蛋白肽酶解液，得到螺旋藻蛋白肽粉末，该螺旋藻蛋白肽粉末中含有较多的生物活性肽pct-2。

11、本发明的有益之处在于：本发明从螺旋藻蛋白肽中筛选获得的生物活性肽pct-2能显著提高血清中sod和gsh-px的活性，显著降低血清中mda含量，其体内抗氧化活性与阳性对照trolox相当；与此同时，与空白对照组相比，pct-2处理可以减少肠道菌群α多样性指数，改变肠道菌群的整体结构（β多样性指数），调节肠道菌群各个分类层级的丰度，显著增加乙酸和丁酸含量；该生物活性肽pct-2可应用于抗氧化和肠道菌群调节功能食品中。

技术特征：

1.一种生物活性肽pct-2，其特征在于，所述生物活性肽pct-2的氨基酸序列为mtcedr，如序列表seq id no：6所示，具有抗氧化和肠道菌群调节功能。

2.权利要求1所述生物活性肽pct-2在抗氧化和肠道菌群调节功能食品中的应用。

3.权利要求1所述生物活性肽pct-2的制备方法，其特征在于，采用固相合成法，具体的：

4.权利要求1所述生物活性肽pct-2的制备方法，其特征在于，采用酶解法，具体的：

技术总结
本发明公开了一种生物活性肽PCT‑2及其制备方法和应用，属于生物技术领域。所述生物活性肽PCT‑2的氨基酸序列为MTCEDR，如序列表SEQ ID NO：6所示，具有抗氧化和肠道菌群调节功能。该生物活性肽PCT‑2从螺旋藻蛋白肽中提取得到，能显著提高血清中SOD和GSH‑Px的活性，显著降低血清中MDA含量，其体内抗氧化活性与阳性对照Trolox相当，与此同时，与空白对照组相比，该生物活性肽PCT‑2还可减少肠道菌群α多样性指数，改变肠道菌群整体结构，调节肠道菌群各个分类层级的丰度，显著增加乙酸和丁酸含量，可应用于抗氧化和肠道菌群调节功能食品中。

技术研发人员：李文军,车团结,芦晨阳,秦松,徐进章,焉丽波,解桂珍,阚莹
受保护的技术使用者：中国科学院烟台海岸带研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/11/28