连翘生物碱B及其制备方法和抗炎、抗病毒应用

本发明涉及生物碱及其制备方法和应用，具体涉及一种从连翘的果实中分离得到的生物碱（连翘生物碱b）及其制备方法和抗炎、抗病毒应用，属于药物化学。

背景技术：

1、连翘（ forsythia suspensa）为木樨科连翘属灌木，其果实是《中国药典》收载的常用中草药。连翘具有良好的抗炎和抗病毒功效，但其药效物质基础并不完全清楚。有关连翘抗炎和抗病毒药效物质基础的研究，国内外科研人员主要聚焦于含量较多的苯丙素、黄酮、三萜及苯乙醇等类型化合物，但对其中含量较少但抗炎和抗病毒活性较高的生物碱类化合物却鲜有研究。

技术实现思路

1、为解决现有技术的不足，本发明的目的在于：采用创新的提取分离工艺，从连翘的果实中分离出一种抗炎和抗流感病毒活性较高的生物碱类化合物。

2、为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

3、连翘生物碱b，所述连翘生物碱b是一种降半日花烷型二萜生物碱，分子式为c17h23no2，结构式如下所示：

4、。

5、前述连翘生物碱b的制备方法，包括以下步骤：

6、（1）取连翘果实，用甲醇或95%乙醇回流提取，回收有机溶剂，得到浸膏i；

7、（2）将浸膏i用去离子水分散，然后用氯仿或乙酸乙酯萃取，合并有机溶剂萃取部分，回收有机溶剂，得到浸膏ii；

8、（3）将浸膏ii用正丁醇溶解，然后用3～4%盐酸萃取，合并酸水萃取液；

9、（4）将酸水萃取液的ph值用氨水调节至8～9，然后用氯仿或乙酸乙酯萃取，合并有机溶剂萃取部分，回收有机溶剂，得到生物碱部位；

10、（5）将生物碱部位上正相硅胶层析柱，以环己烷-丙酮系统作为洗脱剂梯度洗脱，洗脱液用tlc检测，截取含有生物碱的洗脱液并减压浓缩，得到浓缩液i；

11、（6）用制备型薄层对浓缩液i再次进行层析分离，展开剂加5～8%的乙酸，截取生物碱条带，用丙酮洗脱并减压浓缩，得到浓缩液ii；

12、（7）用制备型高效液相色谱对浓缩液ii进行分离，c18色谱柱，规格22mm×250mm，填料颗粒直径5μm，流动相v乙腈：v20mmol/l乙酸铵-0.1%甲酸缓冲液=65：35，流速7.0ml/min，进样量2ml，检测波长345nm，收集保留时间在13min～15min的组分，减压浓缩，结晶，烘干，得到连翘生物碱b。

13、优选的，在步骤（1）中，连翘果实与甲醇或95%乙醇的用量比例为1kg：10l～23l，回流提取时间为3h，回流提取次数为2次～3次。

14、优选的，在步骤（2）中，将浸膏i用等体积去离子水分散，用等体积氯仿或乙酸乙酯萃取3次。

15、优选的，在步骤（3）中，将浸膏ii用2倍～3倍体积正丁醇溶解，用等体积盐酸萃取5次。

16、优选的，在步骤（4）中，用等体积氯仿或乙酸乙酯萃取3次。

17、优选的，在步骤（5）中，环己烷和丙酮按照体积比100：0～80：20或95：5～75：25梯度洗脱。

18、优选的，在步骤（6）中，展开剂选用的是甲醇、氯仿和乙酸乙酯的混合物，v甲醇：v氯仿：v乙酸乙酯=0.6：10：4。

19、前述连翘生物碱b在制备抗炎药物中的应用，以及在制备抗h9n2、h5n1和h1n1流感病毒药物中的应用。

20、本发明的有益之处在于：采用创新的提取分离工艺，从连翘的果实中分离出了连翘生物碱b，连翘生物碱b的结构新颖，并且具有良好的抗炎和抗h9n2、h5n1和h1n1流感病毒活性，为连翘的抗炎活性和抗病毒活性研究提供了新的物质基础。

技术特征：

1.连翘生物碱b，其特征在于，所述连翘生物碱b是一种降半日花烷型二萜生物碱，分子式为c17h23no2，结构式如下所示：

2.权利要求1所述连翘生物碱b的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的连翘生物碱b的制备方法，其特征在于，在步骤（1）中，连翘果实与甲醇或95%乙醇的用量比例为1kg：10l～23l，回流提取时间为3h，回流提取次数为2次～3次。

4.根据权利要求2所述的连翘生物碱b的制备方法，其特征在于，在步骤（2）中，将浸膏i用等体积去离子水分散，用等体积氯仿或乙酸乙酯萃取3次。

5.根据权利要求2所述的连翘生物碱b的制备方法，其特征在于，在步骤（3）中，将浸膏ii用2倍～3倍体积正丁醇溶解，用等体积盐酸萃取5次。

6.根据权利要求2所述的连翘生物碱b的制备方法，其特征在于，在步骤（4）中，用等体积氯仿或乙酸乙酯萃取3次。

7.根据权利要求2所述的连翘生物碱b的制备方法，其特征在于，在步骤（5）中，环己烷和丙酮按照体积比100：0～80：20或95：5～75：25梯度洗脱。

8.根据权利要求2所述的连翘生物碱b的制备方法，其特征在于，在步骤（6）中，展开剂选用的是甲醇、氯仿和乙酸乙酯的混合物，v甲醇：v氯仿：v乙酸乙酯=0.6：10：4。

9.权利要求1所述连翘生物碱b在制备抗炎药物中的应用。

10.权利要求1所述连翘生物碱b在制备抗h9n2、h5n1和h1n1流感病毒药物中的应用。

技术总结
本发明公开了连翘生物碱B及其制备方法和抗炎、抗病毒应用，属于药物化学技术领域。该连翘生物碱B是一种降半日花烷型二萜生物碱，分子式为C<subgt;17</subgt;H<subgt;23</subgt;NO<subgt;2</subgt;，结构式如下所示。本发明的有益之处在于：采用创新的提取分离工艺，从连翘的果实中分离出了连翘生物碱B，连翘生物碱B的结构新颖，并且具有良好的抗炎和抗H<subgt;9</subgt;N<subgt;2</subgt;、H<subgt;5</subgt;N<subgt;1</subgt;和H<subgt;1</subgt;N<subgt;1</subgt;流感病毒活性，为连翘的抗炎活性和抗病毒活性研究提供了新的物质基础。连翘生物碱B。

技术研发人员：戴胜军,岳喜典,刘佳欢,王越
受保护的技术使用者：烟台大学
技术研发日：
技术公布日：2024/11/28