背景技术:
1、cd19,一种b淋巴细胞上的细胞表面分子,由于其在大多数b细胞癌细胞上稳健且可靠的表达,已成为治疗急性白血病和淋巴瘤的临床重要靶标。cd19定向疗法的成功体现在fda批准的cd19定向抗体和嵌合抗原受体(car)t细胞药物的数量上,尽管有若干挑战限制现有疗法的功效。cd19定向car-t细胞在癌症之外还显示出对抗自身抗体介导的自身免疫性疾病情况下的“不需要的免疫”(比如用于治疗红斑狼疮和其它自身免疫性疾病)以及用于预防由于供体特异性hla抗体的存在而导致的同种抗体介导的实体器官移植免疫不相容性(alloantibody-mediated solid organ transplant immune incompatibility)的前景。在两种情况下,cd19定向car t细胞起到耗竭产生致病性抗体蛋白的b细胞的作用。
2、本领域存在开发新型cd19定向免疫疗法的需求。
技术实现思路
1、本公开在各个方面解决上述需求。一方面,本发明包括特异性结合人cd19的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或其抗原结合片段包括:
2、(a)重链互补决定区1(hcdr1),其包括seq id no:87、92、97、102、106、111、116、121、126、130、134、137、142、145、150、155、163、168、173、177、182、187、191、195、206、211、218、223、231、236、240或244中列出的氨基酸序列;
3、(b)重链互补决定区2(hcdr2),其包括seq id no:88、93、98、103、107、112、117、122、131、135、138、143、146、151、156、160、164、169、174、178、183、188、192、196、207、215、219、224、227、232或237中列出的氨基酸序列;
4、(c)重链互补决定区3(hcdr3),其包括seq id no:89、94、99、104、108、113、118、123、127、132、136、139、144、147、152、157、161、170、175、179、184、189、193、197、208、212、216、220、225、228、233、238、241或245中列出的氨基酸序列;
5、(d)轻链互补决定区1(lcdr1),其包括seq id no:90、95、100、109、114、119、124、128、140、148、153、158、166、171、180、185、200、203、209、213、221、229、234、242或246中列出的氨基酸序列;
6、(e)轻链互补决定区2(lcdr2),其包括seq id no:ads、and、ani、eas、gns、gnt、gsh、gss、gyn、kdt、lvs、nnd、qvs、rdt、sdg、snk、sss或svs中列出的氨基酸序列,或
7、(f)轻链互补决定区3(lcdr3),其包括seq id no:91、96、101、105、110、115、120、125、129、133、141、149、154、159、162、165、167、172、176、181、186、190、194、198、199、201、202、204、205、210、214、217、222、226、230、235、239、243或247中列出的氨基酸序列。
8、在某些实施方式中,hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1和lcdr3分别包括以下当中列出的氨基酸序列:
9、(a)seq id no:87、88、89、90和91,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
10、(b)seq id no:92、93、94、95和96,并且其中lcdr2包括氨基酸序列and;
11、(c)seq id no:97、98、99、100和101,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
12、(d)seq id no:102、103、104、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
13、(e)seq id no:106、107、108、109和110,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
14、(f)seq id no:111、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
15、(g)seq id no:116、117、118、119和120,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gnt;
16、(h)seq id no:121、122、123、124和125,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
17、(i)seq id no:126、117、127、128和129,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
18、(j)seq id no:130、131、132、100和133,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
19、(k)seq id no:134、135、136、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
20、(l)seq id no:137、138、139、140和141,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ads;
21、(m)seq id no:142、143、144、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
22、(n)seq id no:145、146、147、148和149,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
23、(o)seq id no:150、151、152、153和154,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
24、(p)seq id no:155、156、157、158和159,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gsh;
25、(q)seq id no:121、160、161、128和162,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
26、(r)seq id no:163、164、123、124和165,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
27、(s)seq id no:106、107、108、166和167,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
28、(t)seq id no:168、169、170、171和172,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
29、(u)seq id no:173、174、175、171和176,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
30、(v)seq id no:177、178、179、180和181,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sss;
31、(w)seq id no:182、183、184、185和186,并且其中lcdr2包括氨基酸序列lvs;
32、(x)seq id no:187、188、189、100和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
33、(y)seq id no:191、192、193、185和194,并且其中lcdr2包括氨基酸序列qvs;
34、(z)seq id no:195、196、197、171和198,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
35、(aa)seq id no:195、196、197、171和199,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
36、(bb)seq id no:195、196、197、200和201,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
37、(cc)seq id no:195、196、197、200和202,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
38、(dd)seq id no:195、196、197、171和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
39、(ee)seq id no:195、196、197、203和204,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
40、(ff)seq id no:195、196、197、171和205,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
41、(gg)seq id no:206、207、208、209和210,并且其中lcdr2包括氨基酸序列svs;
42、(hh)seq id no:211、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
43、(ii)seq id no:168、117、212、213和214,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
44、(jj)seq id no:121、215、216、166和217,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
45、(kk)seq id no:218、219、220、221和222,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
46、(ll)seq id no:223、224、225、213和226,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
47、(mm)seq id no:121、227、228、229和230,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
48、(nn)seq id no:231、232、233、234和235,并且其中lcdr2包括氨基酸序列nnd;
49、(oo)seq id no:236、237、238、171和239,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
50、(pp)seq id no:240、143、241、242和243,并且其中lcdr2包括氨基酸序列snk;或
51、(qq)seq id no:244、138、245、246和247,并且其中lcdr2包括氨基酸序列eas。
52、在某些实施方式中,所述抗体或其抗原结合片段包括:
53、(a)重链可变区,其包括与seq id no:314-356中列出的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、96%、97%、98%、99%同一性的氨基酸序列;和/或
54、(b)轻链可变区,其包括与seq id no:271-313中列出的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%同一性的氨基酸序列。
55、在某些实施方式中,所述抗体或其抗原结合片段包括:
56、(a)重链可变区,其包括seq id no:314中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:271中列出的氨基酸序列;
57、(b)重链可变区,其包括seq id no:315中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:272中列出的氨基酸序列;
58、(c)重链可变区,其包括seq id no:316中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:273中列出的氨基酸序列;
59、(d)重链可变区,其包括seq id no:317中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:274中列出的氨基酸序列;
60、(e)重链可变区,其包括seq id no:318中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:275中列出的氨基酸序列;
61、(f)重链可变区,其包括seq id no:319中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:276中列出的氨基酸序列;
62、(g)重链可变区,其包括seq id no:320中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:277中列出的氨基酸序列;
63、(h)重链可变区,其包括seq id no:321中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:278中列出的氨基酸序列;
64、(i)重链可变区,其包括seq id no:322中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:279中列出的氨基酸序列;
65、(j)重链可变区,其包括seq id no:323中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:280中列出的氨基酸序列;
66、(k)重链可变区,其包括seq id no:324中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:281中列出的氨基酸序列;
67、(l)重链可变区,其包括seq id no:325中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:282中列出的氨基酸序列;
68、(m)重链可变区,其包括seq id no:326中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:283中列出的氨基酸序列;
69、(n)重链可变区,其包括seq id no:327中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:284中列出的氨基酸序列;
70、(o)重链可变区,其包括seq id no:328中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:285中列出的氨基酸序列;
71、(p)重链可变区,其包括seq id no:329中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:286中列出的氨基酸序列;
72、(q)重链可变区,其包括seq id no:330中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:287中列出的氨基酸序列;
73、(r)重链可变区,其包括seq id no:331中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:288中列出的氨基酸序列;
74、(s)重链可变区,其包括seq id no:332中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:289中列出的氨基酸序列;
75、(t)重链可变区,其包括seq id no:333中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:290中列出的氨基酸序列;
76、(u)重链可变区,其包括seq id no:334中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:291中列出的氨基酸序列;
77、(v)重链可变区,其包括seq id no:335中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:292中列出的氨基酸序列;
78、(w)重链可变区,其包括seq id no:336中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:293中列出的氨基酸序列;
79、(x)重链可变区,其包括seq id no:337中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:294中列出的氨基酸序列;
80、(y)重链可变区,其包括seq id no:338中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:295中列出的氨基酸序列;
81、(z)重链可变区,其包括seq id no:339中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:296中列出的氨基酸序列;
82、(aa)重链可变区,其包括seq id no:340中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:297中列出的氨基酸序列;
83、(bb)重链可变区,其包括seq id no:341中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:298中列出的氨基酸序列;
84、(cc)重链可变区,其包括seq id no:342中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:299中列出的氨基酸序列;
85、(dd)重链可变区,其包括seq id no:343中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:300中列出的氨基酸序列;
86、(ee)重链可变区,其包括seq id no:344中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:301中列出的氨基酸序列;
87、(ff)重链可变区,其包括seq id no:345中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:302中列出的氨基酸序列;
88、(gg)重链可变区,其包括seq id no:346中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:303中列出的氨基酸序列;
89、(hh)重链可变区,其包括seq id no:347中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:304中列出的氨基酸序列;
90、(ii)重链可变区,其包括seq id no:348中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:305中列出的氨基酸序列;
91、(jj)重链可变区,其包括seq id no:349中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:306中列出的氨基酸序列;
92、(kk)重链可变区,其包括seq id no:350中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:307中列出的氨基酸序列;
93、(ll)重链可变区,其包括seq id no:351中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:308中列出的氨基酸序列;
94、(mm)重链可变区,其包括seq id no:352中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:309中列出的氨基酸序列;
95、(nn)重链可变区,其包括seq id no:353中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:310中列出的氨基酸序列;
96、(oo)重链可变区,其包括seq id no:354中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:311中列出的氨基酸序列;
97、(pp)重链可变区,其包括seq id no:355中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:312中列出的氨基酸序列;或
98、(qq)重链可变区,其包括seq id no:356中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:313中列出的氨基酸序列。
99、另一方面,本发明包括特异性结合人cd19的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或其抗原结合片段包括:
100、(a)重链可变区,其包括与seq id no:314-356中列出的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、96%、97%、98%、99%同一性的氨基酸序列;和
101、(b)轻链可变区,其包括与seq id no:271-313中列出的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%同一性的氨基酸序列。
102、在某些实施方式中,所述抗体或其抗原结合片段包括:
103、(a)重链可变区,其包括seq id no:314中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:271中列出的氨基酸序列;
104、(b)重链可变区,其包括seq id no:315中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:272中列出的氨基酸序列;
105、(c)重链可变区,其包括seq id no:316中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:273中列出的氨基酸序列;
106、(d)重链可变区,其包括seq id no:317中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:274中列出的氨基酸序列;
107、(e)重链可变区,其包括seq id no:318中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:275中列出的氨基酸序列;
108、(f)重链可变区,其包括seq id no:319中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:276中列出的氨基酸序列;
109、(g)重链可变区,其包括seq id no:320中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:277中列出的氨基酸序列;
110、(h)重链可变区,其包括seq id no:321中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:278中列出的氨基酸序列;
111、(i)重链可变区,其包括seq id no:322中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:279中列出的氨基酸序列;
112、(j)重链可变区,其包括seq id no:323中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:280中列出的氨基酸序列;
113、(k)重链可变区,其包括seq id no:324中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:281中列出的氨基酸序列;
114、(l)重链可变区,其包括seq id no:325中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:282中列出的氨基酸序列;
115、(m)重链可变区,其包括seq id no:326中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:283中列出的氨基酸序列;
116、(n)重链可变区,其包括seq id no:327中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:284中列出的氨基酸序列;
117、(o)重链可变区,其包括seq id no:328中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:285中列出的氨基酸序列;
118、(p)重链可变区,其包括seq id no:329中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:286中列出的氨基酸序列;
119、(q)重链可变区,其包括seq id no:330中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:287中列出的氨基酸序列;
120、(r)重链可变区,其包括seq id no:331中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:288中列出的氨基酸序列;
121、(s)重链可变区,其包括seq id no:332中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:289中列出的氨基酸序列;
122、(t)重链可变区,其包括seq id no:333中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:290中列出的氨基酸序列;
123、(u)重链可变区,其包括seq id no:334中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:291中列出的氨基酸序列;
124、(v)重链可变区,其包括seq id no:335中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:292中列出的氨基酸序列;
125、(w)重链可变区,其包括seq id no:336中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:293中列出的氨基酸序列;
126、(x)重链可变区,其包括seq id no:337中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:294中列出的氨基酸序列;
127、(y)重链可变区,其包括seq id no:338中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:295中列出的氨基酸序列;
128、(z)重链可变区,其包括seq id no:339中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:296中列出的氨基酸序列;
129、(aa)重链可变区,其包括seq id no:340中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:297中列出的氨基酸序列;
130、(bb)重链可变区,其包括seq id no:341中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:298中列出的氨基酸序列;
131、(cc)重链可变区,其包括seq id no:342中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:299中列出的氨基酸序列;
132、(dd)重链可变区,其包括seq id no:343中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:300中列出的氨基酸序列;
133、(ee)重链可变区,其包括seq id no:344中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:301中列出的氨基酸序列;
134、(ff)重链可变区,其包括seq id no:345中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:302中列出的氨基酸序列;
135、(gg)重链可变区,其包括seq id no:346中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:303中列出的氨基酸序列;
136、(hh)重链可变区,其包括seq id no:347中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:304中列出的氨基酸序列;
137、(ii)重链可变区,其包括seq id no:348中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:305中列出的氨基酸序列;
138、(jj)重链可变区,其包括seq id no:349中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:306中列出的氨基酸序列;
139、(kk)重链可变区,其包括seq id no:350中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:307中列出的氨基酸序列;
140、(ll)重链可变区,其包括seq id no:351中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:308中列出的氨基酸序列;
141、(mm)重链可变区,其包括seq id no:352中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:309中列出的氨基酸序列;
142、(nn)重链可变区,其包括seq id no:353中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:310中列出的氨基酸序列;
143、(oo)重链可变区,其包括seq id no:354中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:311中列出的氨基酸序列;
144、(pp)重链可变区,其包括seq id no:355中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:312中列出的氨基酸序列;或
145、(qq)重链可变区,其包括seq id no:356中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:313中列出的氨基酸序列。
146、另一方面,本发明包括特异性结合cd19的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或其抗原结合片段包括:
147、(a)重链可变区,其包括seq id no:314-356中列出的氨基酸序列;和
148、(b)轻链可变区,其包括seq id no:271-313中列出的氨基酸序列。
149、在某些实施方式中,所述抗体或其抗原结合片段选自全长抗体、fab、单链可变片段(scfv)、sc(fv)2、dsfv、fab、fab’、(fab’)2和双抗体。
150、在某些实施方式中,所述抗原结合片段包括scfv。
151、另一方面,本发明包括特异性结合人cd19的单链可变片段(scfv),其包括:
152、(a)重链可变区,其包括hcdr1、hcdr2和hcdr3,其中hcdr1包括选自seq id no:87、92、97、102、106、111、116、121、126、130、134、137、142、145、150、155、163、168、173、177、182、187、191、195、206、211、218、223、231、236、240和244的氨基酸序列;hcdr2包括选自seqid no:88、93、98、103、107、112、117、122、131、135、138、143、146、151、156、160、164、169、174、178、183、188、192、196、207、215、219、224、227、232和237的氨基酸序列;并且hcdr3包括选自seq id no:89、94、99、104、108、113、118、123、127、132、136、139、144、147、152、157、161、170、175、179、184、189、193、197、208、212、216、220、225、228、233、238、241和245的氨基酸序列;和
153、(b)轻链可变区,其包括lcdr1、lcdr2和lcdr3,其中lcdr1包括选自seq id no:90、95、100、109、114、119、124、128、140、148、153、158、166、171、180、185、200、203、209、213、221、229、234、242和246的氨基酸序列;lcdr2包括选自ads、and、ani、eas、gns、gnt、gsh、gss、gyn、kdt、lvs、nnd、qvs、rdt、sdg、snk、sss和svs的氨基酸序列;并且lcdr3包括选自seqid no:91、96、101、105、110、115、120、125、129、133、141、149、154、159、162、165、167、172、176、181、186、190、194、198、199、201、202、204、205、210、214、217、222、226、230、235、239、243和247的氨基酸序列,
154、其中所述重链可变区与所述轻链可变区由连接体连接。
155、在某些实施方式中,hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1和lcdr3分别包括以下当中列出的氨基酸序列:
156、(a)seq id no:87、88、89、90和91,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
157、(b)seq id no:92、93、94、95和96,并且其中lcdr2包括氨基酸序列and;
158、(c)seq id no:97、98、99、100和101,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
159、(d)seq id no:102、103、104、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
160、(e)seq id no:106、107、108、109和110,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
161、(f)seq id no:111、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
162、(g)seq id no:116、117、118、119和120,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gnt;
163、(h)seq id no:121、122、123、124和125,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
164、(i)seq id no:126、117、127、128和129,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
165、(j)seq id no:130、131、132、100和133,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
166、(k)seq id no:134、135、136、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
167、(l)seq id no:137、138、139、140和141,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ads;
168、(m)seq id no:142、143、144、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
169、(n)seq id no:145、146、147、148和149,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
170、(o)seq id no:150、151、152、153和154,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
171、(p)seq id no:155、156、157、158和159,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gsh;
172、(q)seq id no:121、160、161、128和162,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
173、(r)seq id no:163、164、123、124和165,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
174、(s)seq id no:106、107、108、166和167,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
175、(t)seq id no:168、169、170、171和172,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
176、(u)seq id no:173、174、175、171和176,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
177、(v)seq id no:177、178、179、180和181,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sss;
178、(w)seq id no:182、183、184、185和186,并且其中lcdr2包括氨基酸序列lvs;
179、(x)seq id no:187、188、189、100和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
180、(y)seq id no:191、192、193、185和194,并且其中lcdr2包括氨基酸序列qvs;
181、(z)seq id no:195、196、197、171和198,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
182、(aa)seq id no:195、196、197、171和199,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
183、(bb)seq id no:195、196、197、200和201,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
184、(cc)seq id no:195、196、197、200和202,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
185、(dd)seq id no:195、196、197、171和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
186、(ee)seq id no:195、196、197、203和204,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
187、(ff)seq id no:195、196、197、171和205,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
188、(gg)seq id no:206、207、208、209和210,并且其中lcdr2包括氨基酸序列svs;
189、(hh)seq id no:211、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
190、(ii)seq id no:168、117、212、213和214,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
191、(jj)seq id no:121、215、216、166和217,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
192、(kk)seq id no:218、219、220、221和222,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
193、(ll)seq id no:223、224、225、213和226,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
194、(mm)seq id no:121、227、228、229和230,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
195、(nn)seq id no:231、232、233、234和235,并且其中lcdr2包括氨基酸序列nnd;
196、(oo)seq id no:236、237、238、171和239,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
197、(pp)seq id no:240、143、241、242和243,并且其中lcdr2包括氨基酸序列snk;或
198、(qq)seq id no:244、138、245、246和247,并且其中lcdr2包括氨基酸序列eas。
199、另一方面,本发明包括特异性结合cd19的单链可变片段(scfv),其包括:
200、(a)重链可变区,其包括seq id no:314-356中列出的氨基酸序列;和
201、(b)轻链可变区,其包括seq id no:271-313中列出的氨基酸序列,
202、其中所述重链可变区与所述轻链可变区由连接体连接。
203、在某些实施方式中,所述scfv包括:
204、(a)重链可变区,其包括seq id no:314中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:271中列出的氨基酸序列;
205、(b)重链可变区,其包括seq id no:315中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:272中列出的氨基酸序列;
206、(c)重链可变区,其包括seq id no:316中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:273中列出的氨基酸序列;
207、(d)重链可变区,其包括seq id no:317中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:274中列出的氨基酸序列;
208、(e)重链可变区,其包括seq id no:318中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:275中列出的氨基酸序列;
209、(f)重链可变区,其包括seq id no:319中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:276中列出的氨基酸序列;
210、(g)重链可变区,其包括seq id no:320中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:277中列出的氨基酸序列;
211、(h)重链可变区,其包括seq id no:321中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:278中列出的氨基酸序列;
212、(i)重链可变区,其包括seq id no:322中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:279中列出的氨基酸序列;
213、(j)重链可变区,其包括seq id no:323中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:280中列出的氨基酸序列;
214、(k)重链可变区,其包括seq id no:324中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:281中列出的氨基酸序列;
215、(l)重链可变区,其包括seq id no:325中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:282中列出的氨基酸序列;
216、(m)重链可变区,其包括seq id no:326中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:283中列出的氨基酸序列;
217、(n)重链可变区,其包括seq id no:327中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:284中列出的氨基酸序列;
218、(o)重链可变区,其包括seq id no:328中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:285中列出的氨基酸序列;
219、(p)重链可变区,其包括seq id no:329中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:286中列出的氨基酸序列;
220、(q)重链可变区,其包括seq id no:330中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:287中列出的氨基酸序列;
221、(r)重链可变区,其包括seq id no:331中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:288中列出的氨基酸序列;
222、(s)重链可变区,其包括seq id no:332中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:289中列出的氨基酸序列;
223、(t)重链可变区,其包括seq id no:333中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:290中列出的氨基酸序列;
224、(u)重链可变区,其包括seq id no:334中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:291中列出的氨基酸序列;
225、(v)重链可变区,其包括seq id no:335中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:292中列出的氨基酸序列;
226、(w)重链可变区,其包括seq id no:336中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:293中列出的氨基酸序列;
227、(x)重链可变区,其包括seq id no:337中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:294中列出的氨基酸序列;
228、(y)重链可变区,其包括seq id no:338中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:295中列出的氨基酸序列;
229、(z)重链可变区,其包括seq id no:339中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:296中列出的氨基酸序列;
230、(aa)重链可变区,其包括seq id no:340中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:297中列出的氨基酸序列;
231、(bb)重链可变区,其包括seq id no:341中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:298中列出的氨基酸序列;
232、(cc)重链可变区,其包括seq id no:342中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:299中列出的氨基酸序列;
233、(dd)重链可变区,其包括seq id no:343中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:300中列出的氨基酸序列;
234、(ee)重链可变区,其包括seq id no:344中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:301中列出的氨基酸序列;
235、(ff)重链可变区,其包括seq id no:345中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:302中列出的氨基酸序列;
236、(gg)重链可变区,其包括seq id no:346中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:303中列出的氨基酸序列;
237、(hh)重链可变区,其包括seq id no:347中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:304中列出的氨基酸序列;
238、(ii)重链可变区,其包括seq id no:348中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:305中列出的氨基酸序列;
239、(jj)重链可变区,其包括seq id no:349中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:306中列出的氨基酸序列;
240、(kk)重链可变区,其包括seq id no:350中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:307中列出的氨基酸序列;
241、(ll)重链可变区,其包括seq id no:351中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:308中列出的氨基酸序列;
242、(mm)重链可变区,其包括seq id no:352中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:309中列出的氨基酸序列;
243、(nn)重链可变区,其包括seq id no:353中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:310中列出的氨基酸序列;
244、(oo)重链可变区,其包括seq id no:354中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:311中列出的氨基酸序列;
245、(pp)重链可变区,其包括seq id no:355中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:312中列出的氨基酸序列;或
246、(qq)重链可变区,其包括seq id no:356中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:313中列出的氨基酸序列。
247、另一方面,本发明包括特异性结合cd19的单链可变片段(scfv),其包括seq idno:44-86中列出的氨基酸序列。
248、另一方面,本发明包括嵌合抗原受体(car),其包括本文公开的各实施方式或方面中的任一个的scfv。
249、另一方面,本发明包括嵌合抗原受体(car),其包括对人cd19(hcd19)特异的抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域,其中所述car包括:
250、(a)重链可变区,其包括重链互补决定区1(hcdr1)、hcdr2和hcdr3,其中hcdr1包括选自seq id no:87、92、97、102、106、111、116、121、126、130、134、137、142、145、150、155、163、168、173、177、182、187、191、195、206、211、218、223、231、236、240和244的氨基酸序列;hcdr2包括选自seq id no:88、93、98、103、107、112、117、122、131、135、138、143、146、151、156、160、164、169、174、178、183、188、192、196、207、215、219、224、227、232和237的氨基酸序列;并且hcdr3包括选自seq id no:89、94、99、104、108、113、118、123、127、132、136、139、144、147、152、157、161、170、175、179、184、189、193、197、208、212、216、220、225、228、233、238、241和245的氨基酸序列;和
251、(b)轻链可变区,其包括轻链互补决定区1(lcdr1)、lcdr2和lcdr3,其中lcdr1包括选自seq id no:90、95、100、109、114、119、124、128、140、148、153、158、166、171、180、185、200、203、209、213、221、229、234、242和246的氨基酸序列;lcdr2包括选自ads、and、ani、eas、gns、gnt、gsh、gss、gyn、kdt、lvs、nnd、qvs、rdt、sdg、snk、sss和svs的氨基酸序列;并且lcdr3包括选自seq id no:91、96、101、105、110、115、120、125、129、133、141、149、154、159、162、165、167、172、176、181、186、190、194、198、199、201、202、204、205、210、214、217、222、226、230、235、239、243和247的氨基酸序列。
252、在某些实施方式中,所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2和lcdr3分别包括以下当中列出的氨基酸序列:
253、(a)seq id no:87、88、89、90和91,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
254、(b)seq id no:92、93、94、95和96,并且其中lcdr2包括氨基酸序列and;
255、(c)seq id no:97、98、99、100和101,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
256、(d)seq id no:102、103、104、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
257、(e)seq id no:106、107、108、109和110,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
258、(f)seq id no:111、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
259、(g)seq id no:116、117、118、119和120,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gnt;
260、(h)seq id no:121、122、123、124和125,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
261、(i)seq id no:126、117、127、128和129,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
262、(j)seq id no:130、131、132、100和133,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
263、(k)seq id no:134、135、136、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
264、(l)seq id no:137、138、139、140和141,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ads;
265、(m)seq id no:142、143、144、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
266、(n)seq id no:145、146、147、148和149,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
267、(o)seq id no:150、151、152、153和154,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
268、(p)seq id no:155、156、157、158和159,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gsh;
269、(q)seq id no:121、160、161、128和162,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
270、(r)seq id no:163、164、123、124和165,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
271、(s)seq id no:106、107、108、166和167,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
272、(t)seq id no:168、169、170、171和172,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
273、(u)seq id no:173、174、175、171和176,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
274、(v)seq id no:177、178、179、180和181,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sss;
275、(w)seq id no:182、183、184、185和186,并且其中lcdr2包括氨基酸序列lvs;
276、(x)seq id no:187、188、189、100和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
277、(y)seq id no:191、192、193、185和194,并且其中lcdr2包括氨基酸序列qvs;
278、(z)seq id no:195、196、197、171和198,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
279、(aa)seq id no:195、196、197、171和199,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
280、(bb)seq id no:195、196、197、200和201,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
281、(cc)seq id no:195、196、197、200和202,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
282、(dd)seq id no:195、196、197、171和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
283、(ee)seq id no:195、196、197、203和204,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
284、(ff)seq id no:195、196、197、171和205,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
285、(gg)seq id no:206、207、208、209和210,并且其中lcdr2包括氨基酸序列svs;
286、(hh)seq id no:211、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
287、(ii)seq id no:168、117、212、213和214,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
288、(jj)seq id no:121、215、216、166和217,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
289、(kk)seq id no:218、219、220、221和222,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
290、(ll)seq id no:223、224、225、213和226,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
291、(mm)seq id no:121、227、228、229和230,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
292、(nn)seq id no:231、232、233、234和235,并且其中lcdr2包括氨基酸序列nnd;
293、(oo)seq id no:236、237、238、171和239,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
294、(pp)seq id no:240、143、241、242和243,并且其中lcdr2包括氨基酸序列snk;或
295、(qq)seq id no:244、138、245、246和247,并且其中lcdr2包括氨基酸序列eas。
296、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括:
297、(a)重链可变区,其包括seq id no:314中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:271中列出的氨基酸序列;
298、(b)重链可变区,其包括seq id no:315中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:272中列出的氨基酸序列;
299、(c)重链可变区,其包括seq id no:316中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:273中列出的氨基酸序列;
300、(d)重链可变区,其包括seq id no:317中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:274中列出的氨基酸序列;
301、(e)重链可变区,其包括seq id no:318中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:275中列出的氨基酸序列;
302、(f)重链可变区,其包括seq id no:319中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:276中列出的氨基酸序列;
303、(g)重链可变区,其包括seq id no:320中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:277中列出的氨基酸序列;
304、(h)重链可变区,其包括seq id no:321中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:278中列出的氨基酸序列;
305、(i)重链可变区,其包括seq id no:322中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:279中列出的氨基酸序列;
306、(j)重链可变区,其包括seq id no:323中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:280中列出的氨基酸序列;
307、(k)重链可变区,其包括seq id no:324中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:281中列出的氨基酸序列;
308、(l)重链可变区,其包括seq id no:325中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:282中列出的氨基酸序列;
309、(m)重链可变区,其包括seq id no:326中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:283中列出的氨基酸序列;
310、(n)重链可变区,其包括seq id no:327中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:284中列出的氨基酸序列;
311、(o)重链可变区,其包括seq id no:328中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:285中列出的氨基酸序列;
312、(p)重链可变区,其包括seq id no:329中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:286中列出的氨基酸序列;
313、(q)重链可变区,其包括seq id no:330中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:287中列出的氨基酸序列;
314、(r)重链可变区,其包括seq id no:331中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:288中列出的氨基酸序列;
315、(s)重链可变区,其包括seq id no:332中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:289中列出的氨基酸序列;
316、(t)重链可变区,其包括seq id no:333中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:290中列出的氨基酸序列;
317、(u)重链可变区,其包括seq id no:334中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:291中列出的氨基酸序列;
318、(v)重链可变区,其包括seq id no:335中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:292中列出的氨基酸序列;
319、(w)重链可变区,其包括seq id no:336中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:293中列出的氨基酸序列;
320、(x)重链可变区,其包括seq id no:337中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:294中列出的氨基酸序列;
321、(y)重链可变区,其包括seq id no:338中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:295中列出的氨基酸序列;
322、(z)重链可变区,其包括seq id no:339中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:296中列出的氨基酸序列;
323、(aa)重链可变区,其包括seq id no:340中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:297中列出的氨基酸序列;
324、(bb)重链可变区,其包括seq id no:341中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:298中列出的氨基酸序列;
325、(cc)重链可变区,其包括seq id no:342中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:299中列出的氨基酸序列;
326、(dd)重链可变区,其包括seq id no:343中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:300中列出的氨基酸序列;
327、(ee)重链可变区,其包括seq id no:344中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:301中列出的氨基酸序列;
328、(ff)重链可变区,其包括seq id no:345中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:302中列出的氨基酸序列;
329、(gg)重链可变区,其包括seq id no:346中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:303中列出的氨基酸序列;
330、(hh)重链可变区,其包括seq id no:347中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:304中列出的氨基酸序列;
331、(ii)重链可变区,其包括seq id no:348中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:305中列出的氨基酸序列;
332、(jj)重链可变区,其包括seq id no:349中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:306中列出的氨基酸序列;
333、(kk)重链可变区,其包括seq id no:350中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:307中列出的氨基酸序列;
334、(ll)重链可变区,其包括seq id no:351中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:308中列出的氨基酸序列;
335、(mm)重链可变区,其包括seq id no:352中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:309中列出的氨基酸序列;
336、(nn)重链可变区,其包括seq id no:353中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:310中列出的氨基酸序列;
337、(oo)重链可变区,其包括seq id no:354中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:311中列出的氨基酸序列;
338、(pp)重链可变区,其包括seq id no:355中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:312中列出的氨基酸序列;或
339、(qq)重链可变区,其包括seq id no:356中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:313中列出的氨基酸序列。
340、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括重链可变区,所述重链可变区包括与seq id no:314-356中列出的重链可变区中的任一个的氨基酸序列具有至少95%-99%同一性的氨基酸序列。
341、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括重链可变区,所述重链可变区包括seq id no:314-356中列出的重链可变区中的任一个的氨基酸序列。
342、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括重链可变区,所述重链可变区由seqid no:314-356中列出的重链可变区中的任一个的氨基酸序列组成。
343、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括轻链可变区,所述轻链可变区包括与seq id no:271-313中列出的轻链可变区中的任一个的氨基酸序列具有至少95-99%同一性的氨基酸序列。
344、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括轻链可变区,所述轻链可变区包括seq id no:271-313中列出的轻链可变区中的任一个的氨基酸序列。
345、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域由轻链可变区组成,所述轻链可变区由seq id no:271-313中列出的轻链可变区中的任一个的氨基酸序列组成。
346、另一方面,本发明包括嵌合抗原受体(car),其包括抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内结构域,其中所述抗原结合结构域包括:重链可变区,其包括seq id no:314-356中列出的氨基酸序列中的任一个;和轻链可变区,其包括seq id no:271-313中列出的氨基酸序列中的任一个。
347、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括:
348、(a)重链可变区,其包括seq id no:314中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:271中列出的氨基酸序列;
349、(b)重链可变区,其包括seq id no:315中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:272中列出的氨基酸序列;
350、(c)重链可变区,其包括seq id no:316中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:273中列出的氨基酸序列;
351、(d)重链可变区,其包括seq id no:317中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:274中列出的氨基酸序列;
352、(e)重链可变区,其包括seq id no:318中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:275中列出的氨基酸序列;
353、(f)重链可变区,其包括seq id no:319中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:276中列出的氨基酸序列;
354、(g)重链可变区,其包括seq id no:320中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:277中列出的氨基酸序列;
355、(h)重链可变区,其包括seq id no:321中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:278中列出的氨基酸序列;
356、(i)重链可变区,其包括seq id no:322中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:279中列出的氨基酸序列;
357、(j)重链可变区,其包括seq id no:323中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:280中列出的氨基酸序列;
358、(k)重链可变区,其包括seq id no:324中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:281中列出的氨基酸序列;
359、(l)重链可变区,其包括seq id no:325中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:282中列出的氨基酸序列;
360、(m)重链可变区,其包括seq id no:326中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:283中列出的氨基酸序列;
361、(n)重链可变区,其包括seq id no:327中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:284中列出的氨基酸序列;
362、(o)重链可变区,其包括seq id no:328中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:285中列出的氨基酸序列;
363、(p)重链可变区,其包括seq id no:329中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:286中列出的氨基酸序列;
364、(q)重链可变区,其包括seq id no:330中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:287中列出的氨基酸序列;
365、(r)重链可变区,其包括seq id no:331中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:288中列出的氨基酸序列;
366、(s)重链可变区,其包括seq id no:332中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:289中列出的氨基酸序列;
367、(t)重链可变区,其包括seq id no:333中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:290中列出的氨基酸序列;
368、(u)重链可变区,其包括seq id no:334中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:291中列出的氨基酸序列;
369、(v)重链可变区,其包括seq id no:335中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:292中列出的氨基酸序列;
370、(w)重链可变区,其包括seq id no:336中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:293中列出的氨基酸序列;
371、(x)重链可变区,其包括seq id no:337中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:294中列出的氨基酸序列;
372、(y)重链可变区,其包括seq id no:338中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:295中列出的氨基酸序列;
373、(z)重链可变区,其包括seq id no:339中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:296中列出的氨基酸序列;
374、(aa)重链可变区,其包括seq id no:340中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:297中列出的氨基酸序列;
375、(bb)重链可变区,其包括seq id no:341中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:298中列出的氨基酸序列;
376、(cc)重链可变区,其包括seq id no:342中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:299中列出的氨基酸序列;
377、(dd)重链可变区,其包括seq id no:343中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:300中列出的氨基酸序列;
378、(ee)重链可变区,其包括seq id no:344中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:301中列出的氨基酸序列;
379、(ff)重链可变区,其包括seq id no:345中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:302中列出的氨基酸序列;
380、(gg)重链可变区,其包括seq id no:346中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:303中列出的氨基酸序列;
381、(hh)重链可变区,其包括seq id no:347中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:304中列出的氨基酸序列;
382、(ii)重链可变区,其包括seq id no:348中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:305中列出的氨基酸序列;
383、(jj)重链可变区,其包括seq id no:349中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:306中列出的氨基酸序列;
384、(kk)重链可变区,其包括seq id no:350中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:307中列出的氨基酸序列;
385、(ll)重链可变区,其包括seq id no:351中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:308中列出的氨基酸序列;
386、(mm)重链可变区,其包括seq id no:352中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:309中列出的氨基酸序列;
387、(nn)重链可变区,其包括seq id no:353中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:310中列出的氨基酸序列;
388、(oo)重链可变区,其包括seq id no:354中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:311中列出的氨基酸序列;
389、(pp)重链可变区,其包括seq id no:355中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:312中列出的氨基酸序列;或
390、(qq)重链可变区,其包括seq id no:356中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:313中列出的氨基酸序列。
391、另一方面,本发明包括嵌合抗原受体(car),其包括抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域,其中所述抗原结合结构域包括seq id no:44-86中列出的氨基酸序列中的任一个。
392、在某些实施方式中,所述胞内信号传导结构域衍生自人nk细胞受体(nkr),并且其中所述car是nkr-car。
393、在某些实施方式中,所述nkr结构域选自actkir结构域、ncr结构域、slamf结构域、fcr结构域、cd16结构域、cd64结构域、actly49结构域和inhly49结构域。
394、在某些实施方式中,所述胞内信号传导结构域是选自下列的kir信号传导结构域:kir2ds2信号传导结构域、kir2ds2信号传导结构域、kir2dl3信号传导结构域、kir2dl1信号传导结构域、kir2dl2信号传导结构域、kir2dl4信号传导结构域、kir2dl5a信号传导结构域、kir2dl5b信号传导结构域、kir2ds1信号传导结构域、kir2ds3信号传导结构域、kir2ds4信号传导结构域、kir2ds5信号传导结构域、kir3dl1信号传导结构域、kir3ds1信号传导结构域、kir3dl2信号传导结构域、kir3dl3信号传导结构域、kir2dp1信号传导结构域和kir3dp1信号传导结构域。
395、在某些实施方式中,所述跨膜结构域是选自下列的kir跨膜结构域:kir2ds2跨膜结构域、kir2ds2跨膜结构域、kir2dl3跨膜结构域、kir2dl1跨膜结构域、kir2dl2跨膜结构域、kir2dl4跨膜结构域、kir2dl5a跨膜结构域、kir2dl5b跨膜结构域、kir2ds1跨膜结构域、kir2ds3跨膜结构域、kir2ds4跨膜结构域、kir2ds5跨膜结构域、kir3dl1跨膜结构域、kir3ds1跨膜结构域、kir3dl2跨膜结构域、kir3dl3跨膜结构域、kir2dp1跨膜结构域和kir3dp1跨膜结构域。
396、在某些实施方式中,所述跨膜结构域能够结合dap12的跨膜结构域。
397、在某些实施方式中,所述kir信号传导结构域包括seq id no:266中列出的氨基酸序列。
398、在某些实施方式中,所述car包括seq id no:370-412中列出的氨基酸序列。
399、另一方面,本发明包括nk细胞受体(nkr)-car复合物,其包括:nkr-car,所述nkr-car包括seq id no:370-412中的任一个中列出的氨基酸序列;和衔接分子。
400、在某些实施方式中,所述衔接分子是dap12或fcεrγ。
401、在某些实施方式中,在所述nkr-car的抗原结合结构域与人cd19结合后,所述nkr-car与所述衔接分子相互作用。
402、另一方面,本发明包括nkr-car,其包括:
403、(a)抗原结合结构域,其特异性结合人cd19(hcd19),和其中的一个或两者;
404、(b)nkr跨膜结构域;或
405、(c)nkr胞内信号传导结构域。
406、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括:
407、(a)抗原结合结构域,其包括:重链可变区,所述重链可变区包括三个重链互补决定区(hcdr),其中hcdr1包括选自seq id no:87、92、97、102、106、111、116、121、126、130、134、137、142、145、150、155、163、168、173、177、182、187、191、195、206、211、218、223、231、236、240和244的氨基酸序列;hcdr2包括选自seq id no:88、93、98、103、107、112、117、122、131、135、138、143、146、151、156、160、164、169、174、178、183、188、192、196、207、215、219、224、227、232和237的氨基酸序列;并且hcdr3包括选自seq id no:89、94、99、104、108、113、118、123、127、132、136、139、144、147、152、157、161、170、175、179、184、189、193、197、208、212、216、220、225、228、233、238、241和245的氨基酸序列;和
408、(b)轻链可变区,所述轻链可变区包括三个轻链互补决定区(lcdr),其中lcdr1包括选自seq id no:90、95、100、109、114、119、124、128、140、148、153、158、166、171、180、185、200、203、209、213、221、229、234、242和246的氨基酸序列;lcdr2包括选自ads、and、ani、eas、gns、gnt、gsh、gss、gyn、kdt、lvs、nnd、qvs、rdt、sdg、snk、sss和svs的氨基酸序列;并且lcdr3包括选自seq id no:91、96、101、105、110、115、120、125、129、133、141、149、154、159、162、165、167、172、176、181、186、190、194、198、199、201、202、204、205、210、214、217、222、226、230、235、239、243和247的氨基酸序列。
409、在某些实施方式中,hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1和lcdr3分别包括以下当中列出的氨基酸序列:
410、(a)seq id no:87、88、89、90和91,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
411、(b)seq id no:92、93、94、95和96,并且其中lcdr2包括氨基酸序列and;
412、(c)seq id no:97、98、99、100和101,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
413、(d)seq id no:102、103、104、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
414、(e)seq id no:106、107、108、109和110,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
415、(f)seq id no:111、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
416、(g)seq id no:116、117、118、119和120,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gnt;
417、(h)seq id no:121、122、123、124和125,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
418、(i)seq id no:126、117、127、128和129,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
419、(j)seq id no:130、131、132、100和133,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
420、(k)seq id no:134、135、136、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
421、(l)seq id no:137、138、139、140和141,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ads;
422、(m)seq id no:142、143、144、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
423、(n)seq id no:145、146、147、148和149,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
424、(o)seq id no:150、151、152、153和154,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
425、(p)seq id no:155、156、157、158和159,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gsh;
426、(q)seq id no:121、160、161、128和162,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
427、(r)seq id no:163、164、123、124和165,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
428、(s)seq id no:106、107、108、166和167,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
429、(t)seq id no:168、169、170、171和172,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
430、(u)seq id no:173、174、175、171和176,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
431、(v)seq id no:177、178、179、180和181,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sss;
432、(w)seq id no:182、183、184、185和186,并且其中lcdr2包括氨基酸序列lvs;
433、(x)seq id no:187、188、189、100和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
434、(y)seq id no:191、192、193、185和194,并且其中lcdr2包括氨基酸序列qvs;
435、(z)seq id no:195、196、197、171和198,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
436、(aa)seq id no:195、196、197、171和199,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
437、(bb)seq id no:195、196、197、200和201,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
438、(cc)seq id no:195、196、197、200和202,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
439、(dd)seq id no:195、196、197、171和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
440、(ee)seq id no:195、196、197、203和204,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
441、(ff)seq id no:195、196、197、171和205,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
442、(gg)seq id no:206、207、208、209和210,并且其中lcdr2包括氨基酸序列svs;
443、(hh)seq id no:211、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
444、(ii)seq id no:168、117、212、213和214,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
445、(jj)seq id no:121、215、216、166和217,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
446、(kk)seq id no:218、219、220、221和222,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
447、(ll)seq id no:223、224、225、213和226,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
448、(mm)seq id no:121、227、228、229和230,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
449、(nn)seq id no:231、232、233、234和235,并且其中lcdr2包括氨基酸序列nnd;
450、(oo)seq id no:236、237、238、171和239,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
451、(pp)seq id no:240、143、241、242和243,并且其中lcdr2包括氨基酸序列snk;或
452、(qq)seq id no:244、138、245、246和247,并且其中lcdr2包括氨基酸序列eas。
453、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括:重链可变区,其包括seq id no:314-356中列出的氨基酸序列中的任一个;和轻链可变区,其包括seq id no:271-313中列出的氨基酸序列中的任一个。
454、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括:
455、(a)重链可变区,其包括seq id no:314中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:271中列出的氨基酸序列;
456、(b)重链可变区,其包括seq id no:315中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:272中列出的氨基酸序列;
457、(c)重链可变区,其包括seq id no:316中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:273中列出的氨基酸序列;
458、(d)重链可变区,其包括seq id no:317中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:274中列出的氨基酸序列;
459、(e)重链可变区,其包括seq id no:318中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:275中列出的氨基酸序列;
460、(f)重链可变区,其包括seq id no:319中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:276中列出的氨基酸序列;
461、(g)重链可变区,其包括seq id no:320中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:277中列出的氨基酸序列;
462、(h)重链可变区,其包括seq id no:321中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:278中列出的氨基酸序列;
463、(i)重链可变区,其包括seq id no:322中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:279中列出的氨基酸序列;
464、(j)重链可变区,其包括seq id no:323中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:280中列出的氨基酸序列;
465、(k)重链可变区,其包括seq id no:324中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:281中列出的氨基酸序列;
466、(l)重链可变区,其包括seq id no:325中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:282中列出的氨基酸序列;
467、(m)重链可变区,其包括seq id no:326中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:283中列出的氨基酸序列;
468、(n)重链可变区,其包括seq id no:327中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:284中列出的氨基酸序列;
469、(o)重链可变区,其包括seq id no:328中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:285中列出的氨基酸序列;
470、(p)重链可变区,其包括seq id no:329中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:286中列出的氨基酸序列;
471、(q)重链可变区,其包括seq id no:330中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:287中列出的氨基酸序列;
472、(r)重链可变区,其包括seq id no:331中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:288中列出的氨基酸序列;
473、(s)重链可变区,其包括seq id no:332中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:289中列出的氨基酸序列;
474、(t)重链可变区,其包括seq id no:333中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:290中列出的氨基酸序列;
475、(u)重链可变区,其包括seq id no:334中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:291中列出的氨基酸序列;
476、(v)重链可变区,其包括seq id no:335中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:292中列出的氨基酸序列;
477、(w)重链可变区,其包括seq id no:336中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:293中列出的氨基酸序列;
478、(x)重链可变区,其包括seq id no:337中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:294中列出的氨基酸序列;
479、(y)重链可变区,其包括seq id no:338中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:295中列出的氨基酸序列;
480、(z)重链可变区,其包括seq id no:339中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:296中列出的氨基酸序列;
481、(aa)重链可变区,其包括seq id no:340中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:297中列出的氨基酸序列;
482、(bb)重链可变区,其包括seq id no:341中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:298中列出的氨基酸序列;
483、(cc)重链可变区,其包括seq id no:342中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:299中列出的氨基酸序列;
484、(dd)重链可变区,其包括seq id no:343中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:300中列出的氨基酸序列;
485、(ee)重链可变区,其包括seq id no:344中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:301中列出的氨基酸序列;
486、(ff)重链可变区,其包括seq id no:345中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:302中列出的氨基酸序列;
487、(gg)重链可变区,其包括seq id no:346中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:303中列出的氨基酸序列;
488、(hh)重链可变区,其包括seq id no:347中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:304中列出的氨基酸序列;
489、(ii)重链可变区,其包括seq id no:348中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:305中列出的氨基酸序列;
490、(jj)重链可变区,其包括seq id no:349中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:306中列出的氨基酸序列;
491、(kk)重链可变区,其包括seq id no:350中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:307中列出的氨基酸序列;
492、(ll)重链可变区,其包括seq id no:351中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:308中列出的氨基酸序列;
493、(mm)重链可变区,其包括seq id no:352中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:309中列出的氨基酸序列;
494、(nn)重链可变区,其包括seq id no:353中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:310中列出的氨基酸序列;
495、(oo)重链可变区,其包括seq id no:354中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:311中列出的氨基酸序列;
496、(pp)重链可变区,其包括seq id no:355中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:312中列出的氨基酸序列;或
497、(qq)重链可变区,其包括seq id no:356中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:313中列出的氨基酸序列。
498、在某些实施方式中,所述nkr胞内信号传导结构域选自actkir结构域、ncr结构域、slamf结构域、fcr结构域、cd16结构域、cd64结构域、actly49结构域和inhly49结构域。
499、在某些实施方式中,所述nkr-car是kir-car。
500、在某些实施方式中,所述胞内信号传导结构域是选自下列的kir信号传导结构域:kir2ds2信号传导结构域、kir2ds2信号传导结构域、kir2dl3信号传导结构域、kir2dl1信号传导结构域、kir2dl2信号传导结构域、kir2dl4信号传导结构域、kir2dl5a信号传导结构域、kir2dl5b信号传导结构域、kir2ds1信号传导结构域、kir2ds3信号传导结构域、kir2ds4信号传导结构域、kir2ds5信号传导结构域、kir3dl1信号传导结构域、kir3ds1信号传导结构域、kir3dl2信号传导结构域、kir3dl3信号传导结构域、kir2dp1信号传导结构域和kir3dp1信号传导结构域。
501、在某些实施方式中,所述跨膜结构域是选自下列的kir跨膜结构域:kir2ds2跨膜结构域、kir2ds2跨膜结构域、kir2dl3跨膜结构域、kir2dl1跨膜结构域、kir2dl2跨膜结构域、kir2dl4跨膜结构域、kir2dl5a跨膜结构域、kir2dl5b跨膜结构域、kir2ds1跨膜结构域、kir2ds3跨膜结构域、kir2ds4跨膜结构域、kir2ds5跨膜结构域、kir3dl1跨膜结构域、kir3ds1跨膜结构域、kir3dl2跨膜结构域、kir3dl3跨膜结构域、kir2dp1跨膜结构域和kir3dp1跨膜结构域。
502、在某些实施方式中,所述跨膜结构域能够通过dap12的跨膜结构域结合和/或活化dap12。
503、在某些实施方式中,所述kir信号传导结构域包括seq id no:266中列出的氨基酸序列。
504、在某些实施方式中,所述car包括seq id no:370-412中列出的氨基酸序列。
505、另一方面,本发明包括嵌合抗原受体(car),其包括:
506、(a)抗原结合结构域,其包括:重链可变区,所述重链可变区包括三个重链互补决定区(hcdr),其中hcdr1包括选自seq id no:87、92、97、102、106、111、116、121、126、130、134、137、142、145、150、155、163、168、173、177、182、187、191、195、206、211、218、223、231、236、240和244的氨基酸序列;hcdr2包括选自seq id no:88、93、98、103、107、112、117、122、131、135、138、143、146、151、156、160、164、169、174、178、183、188、192、196、207、215、219、224、227、232和237的氨基酸序列;并且hcdr3包括选自seq id no:89、94、99、104、108、113、118、123、127、132、136、139、144、147、152、157、161、170、175、179、184、189、193、197、208、212、216、220、225、228、233、238、241和245的氨基酸序列;和轻链可变区,所述轻链可变区包括三个轻链互补决定区(lcdr),其中lcdr1包括选自seq id no:90、95、100、109、114、119、124、128、140、148、153、158、166、171、180、185、200、203、209、213、221、229、234、242和246的氨基酸序列;lcdr2包括选自ads、and、ani、eas、gns、gnt、gsh、gss、gyn、kdt、lvs、nnd、qvs、rdt、sdg、snk、sss和svs的氨基酸序列;并且lcdr3包括选自seq id no:91、96、101、105、110、115、120、125、129、133、141、149、154、159、162、165、167、172、176、181、186、190、194、198、199、201、202、204、205、210、214、217、222、226、230、235、239、243和247的氨基酸序列;
507、(b)跨膜结构域;和
508、(c)kir2ds2胞内信号传导结构域。
509、在某些实施方式中,hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1和lcdr3分别包括以下当中列出的氨基酸序列:
510、(a)seq id no:87、88、89、90和91,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
511、(b)seq id no:92、93、94、95和96,并且其中lcdr2包括氨基酸序列and;
512、(c)seq id no:97、98、99、100和101,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
513、(d)seq id no:102、103、104、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
514、(e)seq id no:106、107、108、109和110,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
515、(f)seq id no:111、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
516、(g)seq id no:116、117、118、119和120,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gnt;
517、(h)seq id no:121、122、123、124和125,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
518、(i)seq id no:126、117、127、128和129,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
519、(j)seq id no:130、131、132、100和133,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
520、(k)seq id no:134、135、136、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
521、(l)seq id no:137、138、139、140和141,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ads;
522、(m)seq id no:142、143、144、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
523、(n)seq id no:145、146、147、148和149,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
524、(o)seq id no:150、151、152、153和154,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
525、(p)seq id no:155、156、157、158和159,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gsh;
526、(q)seq id no:121、160、161、128和162,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
527、(r)seq id no:163、164、123、124和165,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
528、(s)seq id no:106、107、108、166和167,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
529、(t)seq id no:168、169、170、171和172,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
530、(u)seq id no:173、174、175、171和176,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
531、(v)seq id no:177、178、179、180和181,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sss;
532、(w)seq id no:182、183、184、185和186,并且其中lcdr2包括氨基酸序列lvs;
533、(x)seq id no:187、188、189、100和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
534、(y)seq id no:191、192、193、185和194,并且其中lcdr2包括氨基酸序列qvs;
535、(z)seq id no:195、196、197、171和198,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
536、(aa)seq id no:195、196、197、171和199,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
537、(bb)seq id no:195、196、197、200和201,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
538、(cc)seq id no:195、196、197、200和202,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
539、(dd)seq id no:195、196、197、171和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
540、(ee)seq id no:195、196、197、203和204,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
541、(ff)seq id no:195、196、197、171和205,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
542、(gg)seq id no:206、207、208、209和210,并且其中lcdr2包括氨基酸序列svs;
543、(hh)seq id no:211、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
544、(ii)seq id no:168、117、212、213和214,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
545、(jj)seq id no:121、215、216、166和217,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
546、(kk)seq id no:218、219、220、221和222,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
547、(ll)seq id no:223、224、225、213和226,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
548、(mm)seq id no:121、227、228、229和230,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
549、(nn)seq id no:231、232、233、234和235,并且其中lcdr2包括氨基酸序列nnd;
550、(oo)seq id no:236、237、238、171和239,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
551、(pp)seq id no:240、143、241、242和243,并且其中lcdr2包括氨基酸序列snk;或
552、(qq)seq id no:244、138、245、246和247,并且其中lcdr2包括氨基酸序列eas。
553、另一方面,本发明包括嵌合抗原受体(car),其包括:
554、(a)抗原结合结构域,其包括:重链可变区,所述重链可变区包括seq id no:314-356中列出的氨基酸序列中的任一个;和轻链可变区,所述轻链可变区包括seq id no:271-313中列出的氨基酸序列中的任一个;
555、(b)跨膜结构域;和
556、(c)kir2ds2胞内信号传导结构域。
557、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括:
558、(a)重链可变区,其包括seq id no:314中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:271中列出的氨基酸序列;
559、(b)重链可变区,其包括seq id no:315中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:272中列出的氨基酸序列;
560、(c)重链可变区,其包括seq id no:316中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:273中列出的氨基酸序列;
561、(d)重链可变区,其包括seq id no:317中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:274中列出的氨基酸序列;
562、(e)重链可变区,其包括seq id no:318中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:275中列出的氨基酸序列;
563、(f)重链可变区,其包括seq id no:319中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:276中列出的氨基酸序列;
564、(g)重链可变区,其包括seq id no:320中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:277中列出的氨基酸序列;
565、(h)重链可变区,其包括seq id no:321中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:278中列出的氨基酸序列;
566、(i)重链可变区,其包括seq id no:322中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:279中列出的氨基酸序列;
567、(j)重链可变区,其包括seq id no:323中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:280中列出的氨基酸序列;
568、(k)重链可变区,其包括seq id no:324中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:281中列出的氨基酸序列;
569、(l)重链可变区,其包括seq id no:325中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:282中列出的氨基酸序列;
570、(m)重链可变区,其包括seq id no:326中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:283中列出的氨基酸序列;
571、(n)重链可变区,其包括seq id no:327中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:284中列出的氨基酸序列;
572、(o)重链可变区,其包括seq id no:328中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:285中列出的氨基酸序列;
573、(p)重链可变区,其包括seq id no:329中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:286中列出的氨基酸序列;
574、(q)重链可变区,其包括seq id no:330中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:287中列出的氨基酸序列;
575、(r)重链可变区,其包括seq id no:331中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:288中列出的氨基酸序列;
576、(s)重链可变区,其包括seq id no:332中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:289中列出的氨基酸序列;
577、(t)重链可变区,其包括seq id no:333中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:290中列出的氨基酸序列;
578、(u)重链可变区,其包括seq id no:334中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:291中列出的氨基酸序列;
579、(v)重链可变区,其包括seq id no:335中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:292中列出的氨基酸序列;
580、(w)重链可变区,其包括seq id no:336中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:293中列出的氨基酸序列;
581、(x)重链可变区,其包括seq id no:337中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:294中列出的氨基酸序列;
582、(y)重链可变区,其包括seq id no:338中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:295中列出的氨基酸序列;
583、(z)重链可变区,其包括seq id no:339中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:296中列出的氨基酸序列;
584、(aa)重链可变区,其包括seq id no:340中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:297中列出的氨基酸序列;
585、(bb)重链可变区,其包括seq id no:341中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:298中列出的氨基酸序列;
586、(cc)重链可变区,其包括seq id no:342中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:299中列出的氨基酸序列;
587、(dd)重链可变区,其包括seq id no:343中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:300中列出的氨基酸序列;
588、(ee)重链可变区,其包括seq id no:344中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:301中列出的氨基酸序列;
589、(ff)重链可变区,其包括seq id no:345中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:302中列出的氨基酸序列;
590、(gg)重链可变区,其包括seq id no:346中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:303中列出的氨基酸序列;
591、(hh)重链可变区,其包括seq id no:347中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:304中列出的氨基酸序列;
592、(ii)重链可变区,其包括seq id no:348中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:305中列出的氨基酸序列;
593、(jj)重链可变区,其包括seq id no:349中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:306中列出的氨基酸序列;
594、(kk)重链可变区,其包括seq id no:350中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:307中列出的氨基酸序列;
595、(ll)重链可变区,其包括seq id no:351中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:308中列出的氨基酸序列;
596、(mm)重链可变区,其包括seq id no:352中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:309中列出的氨基酸序列;
597、(nn)重链可变区,其包括seq id no:353中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:310中列出的氨基酸序列;
598、(oo)重链可变区,其包括seq id no:354中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:311中列出的氨基酸序列;
599、(pp)重链可变区,其包括seq id no:355中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:312中列出的氨基酸序列;或
600、(qq)重链可变区,其包括seq id no:356中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:313中列出的氨基酸序列。
601、另一方面,本发明包括嵌合抗原受体(car),其包括:
602、(a)seq id no:357中列出的cd8前导氨基酸序列;
603、(b)seq id no:44-86中列出的scfv氨基酸序列;
604、(c)seq id no:264中列出的myc标签氨基酸序列;和
605、(d)seq id no:266中列出的跨膜/kir2ds2信号传导结构域氨基酸序列。
606、在某些实施方式中,所述car包括seq id no:370-412中列出的氨基酸序列。
607、另一方面,本发明包括分离核酸,其编码本文公开的各实施方式中的任一个的抗体或其抗原结合片段。
608、在某些实施方式中,本发明包括分离核酸,其编码本文公开的各方面或实施方式中的任一个的car,或本文公开的各方面或实施方式中的任一个的nkr-car。
609、另一方面,本发明包括分离核酸,其编码抗体或其抗原结合片段,其中所述核酸抗体或其抗原结合片段包括与seq id no:1-43中列出的多核苷酸序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、96%、97%、98%、99%同一性的核酸。
610、另一方面,本发明包括分离核酸,其编码抗体或其抗原结合片段,其中所述核酸抗体或其抗原结合片段包括seq id no:1-43中列出的多核苷酸序列。
611、在某些实施方式中,所述抗体或其抗原结合片段选自全长抗体、fab、单链可变片段(scfv)、sc(fv)2、dsfv、fab、fab’、(fab’)2和双抗体。
612、另一方面,本发明包括分离核酸,其编码包括seq id no:1-43中列出的多核苷酸序列的单链可变片段(scfv)。
613、在某些实施方式中,所述抗体或其抗原结合片段或所述scfv或所述car或nkr-car的抗原结合片段特异性结合人cd19。
614、另一方面,本发明包括分离核酸,其编码嵌合抗原受体(car),所述嵌合抗原受体(car)包括抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域,其中所述抗原结合结构域包括:
615、(a)重链可变区,其包括编码seq id no:314-356中列出的氨基酸序列中的任一个的核酸;和
616、(b)轻链可变区,其包括编码seq id no:271-313中列出的氨基酸序列中的任一个的核酸。
617、在某些实施方式中,所述抗原结合结构域包括:
618、(a)重链可变区,其包括seq id no:314中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:271中列出的氨基酸序列;
619、(b)重链可变区,其包括seq id no:315中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:272中列出的氨基酸序列;
620、(c)重链可变区,其包括seq id no:316中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:273中列出的氨基酸序列;
621、(d)重链可变区,其包括seq id no:317中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:274中列出的氨基酸序列;
622、(e)重链可变区,其包括seq id no:318中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:275中列出的氨基酸序列;
623、(f)重链可变区,其包括seq id no:319中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:276中列出的氨基酸序列;
624、(g)重链可变区,其包括seq id no:320中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:277中列出的氨基酸序列;
625、(h)重链可变区,其包括seq id no:321中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:278中列出的氨基酸序列;
626、(i)重链可变区,其包括seq id no:322中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:279中列出的氨基酸序列;
627、(j)重链可变区,其包括seq id no:323中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:280中列出的氨基酸序列;
628、(k)重链可变区,其包括seq id no:324中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:281中列出的氨基酸序列;
629、(l)重链可变区,其包括seq id no:325中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:282中列出的氨基酸序列;
630、(m)重链可变区,其包括seq id no:326中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:283中列出的氨基酸序列;
631、(n)重链可变区,其包括seq id no:327中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:284中列出的氨基酸序列;
632、(o)重链可变区,其包括seq id no:328中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:285中列出的氨基酸序列;
633、(p)重链可变区,其包括seq id no:329中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:286中列出的氨基酸序列;
634、(q)重链可变区,其包括seq id no:330中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:287中列出的氨基酸序列;
635、(r)重链可变区,其包括seq id no:331中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:288中列出的氨基酸序列;
636、(s)重链可变区,其包括seq id no:332中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:289中列出的氨基酸序列;
637、(t)重链可变区,其包括seq id no:333中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:290中列出的氨基酸序列;
638、(u)重链可变区,其包括seq id no:334中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:291中列出的氨基酸序列;
639、(v)重链可变区,其包括seq id no:335中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:292中列出的氨基酸序列;
640、(w)重链可变区,其包括seq id no:336中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:293中列出的氨基酸序列;
641、(x)重链可变区,其包括seq id no:337中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:294中列出的氨基酸序列;
642、(y)重链可变区,其包括seq id no:338中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:295中列出的氨基酸序列;
643、(z)重链可变区,其包括seq id no:339中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:296中列出的氨基酸序列;
644、(aa)重链可变区,其包括seq id no:340中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:297中列出的氨基酸序列;
645、(bb)重链可变区,其包括seq id no:341中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:298中列出的氨基酸序列;
646、(cc)重链可变区,其包括seq id no:342中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:299中列出的氨基酸序列;
647、(dd)重链可变区,其包括seq id no:343中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:300中列出的氨基酸序列;
648、(ee)重链可变区,其包括seq id no:344中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:301中列出的氨基酸序列;
649、(ff)重链可变区,其包括seq id no:345中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:302中列出的氨基酸序列;
650、(gg)重链可变区,其包括seq id no:346中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:303中列出的氨基酸序列;
651、(hh)重链可变区,其包括seq id no:347中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:304中列出的氨基酸序列;
652、(ii)重链可变区,其包括seq id no:348中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:305中列出的氨基酸序列;
653、(jj)重链可变区,其包括seq id no:349中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:306中列出的氨基酸序列;
654、(kk)重链可变区,其包括seq id no:350中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:307中列出的氨基酸序列;
655、(ll)重链可变区,其包括seq id no:351中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:308中列出的氨基酸序列;
656、(mm)重链可变区,其包括seq id no:352中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:309中列出的氨基酸序列;
657、(nn)重链可变区,其包括seq id no:353中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:310中列出的氨基酸序列;
658、(oo)重链可变区,其包括seq id no:354中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:311中列出的氨基酸序列;
659、(pp)重链可变区,其包括seq id no:355中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:312中列出的氨基酸序列;或
660、(qq)重链可变区,其包括seq id no:356中列出的氨基酸序列;和轻链可变区,其包括seq id no:313中列出的氨基酸序列。
661、另一方面,本发明包括分离核酸,其编码嵌合抗原受体(car),所述嵌合抗原受体(car)包括抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域,其中所述抗原结合结构域由seq id no:1-43中列出的核苷酸多核苷酸序列中的任一个编码。
662、在某些实施方式中,所述胞内信号传导结构域包括胞内结构域,所述胞内结构域包括人nk细胞kir受体的一个或多个胞质信号传导结构域。
663、在某些实施方式中,所述kir信号传导结构域包括kir2ds2信号传导结构域。
664、在某些实施方式中,所述kir信号传导结构域由包括seq id no:265中列出的序列的多核苷酸序列编码。
665、另一方面,本发明包括载体,其包括本文公开的各方面或实施方式中的任一个的分离核酸。
666、在某些实施方式中,所述载体是表达载体。
667、在某些实施方式中,所述载体选自dna载体、rna载体、质粒、慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体和逆转录病毒载体。
668、另一方面,本发明包括宿主细胞,其包括本文公开的各方面或实施方式中的任一个的分离核酸,或本文公开的各方面或实施方式中的任一个的载体。
669、在某些实施方式中,所述宿主细胞是真核生物或原核生物来源的宿主细胞。
670、在某些实施方式中,所述宿主细胞是哺乳动物来源的宿主细胞。
671、在某些实施方式中,所述宿主细胞是细菌来源的宿主细胞。
672、在某些实施方式中,所述宿主细胞是中国仓鼠卵巢细胞。
673、另一方面,本发明包括修饰免疫细胞或其前体细胞,其包括嵌合抗原受体(car),所述嵌合抗原受体(car)包括抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内结构域,其中所述抗原结合结构域包括:
674、(a)重链可变区,其包括三个重链互补决定区(hcdr),其中hcdr1包括选自seq idno:87、92、97、102、106、111、116、121、126、130、134、137、142、145、150、155、163、168、173、177、182、187、191、195、206、211、218、223、231、236、240和244的氨基酸序列;hcdr2包括选自seq id no:88、93、98、103、107、112、117、122、131、135、138、143、146、151、156、160、164、169、174、178、183、188、192、196、207、215、219、224、227、232和237的氨基酸序列;并且hcdr3包括选自seq id no:89、94、99、104、108、113、118、123、127、132、136、139、144、147、152、157、161、170、175、179、184、189、193、197、208、212、216、220、225、228、233、238、241和245的氨基酸序列;和
675、(b)轻链可变区,其包括三个轻链互补决定区(lcdr),其中lcdr1包括选自seq idno:90、95、100、109、114、119、124、128、140、148、153、158、166、171、180、185、200、203、209、213、221、229、234、242和246的氨基酸序列;lcdr2包括选自seq id no:ads、and、ani、eas、gns、gnt、gsh、gss、gyn、kdt、lvs、nnd、qvs、rdt、sdg、snk、sss和svs的氨基酸序列;并且lcdr3包括选自seq id no:91、96、101、105、110、115、120、125、129、133、141、149、154、159、162、165、167、172、176、181、186、190、194、198、199、201、202、204、205、210、214、217、222、226、230、235、239、243和247的氨基酸序列。
676、在某些实施方式中,hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1和lcdr3分别包括以下当中列出的氨基酸序列:
677、(a)seq id no:87、88、89、90和91,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
678、(b)seq id no:92、93、94、95和96,并且其中lcdr2包括氨基酸序列and;
679、(c)seq id no:97、98、99、100和101,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
680、(d)seq id no:102、103、104、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
681、(e)seq id no:106、107、108、109和110,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
682、(f)seq id no:111、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
683、(g)seq id no:116、117、118、119和120,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gnt;
684、(h)seq id no:121、122、123、124和125,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
685、(i)seq id no:126、117、127、128和129,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
686、(j)seq id no:130、131、132、100和133,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
687、(k)seq id no:134、135、136、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
688、(l)seq id no:137、138、139、140和141,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ads;
689、(m)seq id no:142、143、144、100和105,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
690、(n)seq id no:145、146、147、148和149,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
691、(o)seq id no:150、151、152、153和154,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
692、(p)seq id no:155、156、157、158和159,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gsh;
693、(q)seq id no:121、160、161、128和162,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gns;
694、(r)seq id no:163、164、123、124和165,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gyn;
695、(s)seq id no:106、107、108、166和167,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
696、(t)seq id no:168、169、170、171和172,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
697、(u)seq id no:173、174、175、171和176,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
698、(v)seq id no:177、178、179、180和181,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sss;
699、(w)seq id no:182、183、184、185和186,并且其中lcdr2包括氨基酸序列lvs;
700、(x)seq id no:187、188、189、100和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列ani;
701、(y)seq id no:191、192、193、185和194,并且其中lcdr2包括氨基酸序列qvs;
702、(z)seq id no:195、196、197、171和198,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
703、(aa)seq id no:195、196、197、171和199,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
704、(bb)seq id no:195、196、197、200和201,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
705、(cc)seq id no:195、196、197、200和202,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
706、(dd)seq id no:195、196、197、171和190,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
707、(ee)seq id no:195、196、197、203和204,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
708、(ff)seq id no:195、196、197、171和205,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
709、(gg)seq id no:206、207、208、209和210,并且其中lcdr2包括氨基酸序列svs;
710、(hh)seq id no:211、112、113、114和115,并且其中lcdr2包括氨基酸序列gss;
711、(ii)seq id no:168、117、212、213和214,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
712、(jj)seq id no:121、215、216、166和217,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
713、(kk)seq id no:218、219、220、221和222,并且其中lcdr2包括氨基酸序列rdt;
714、(ll)seq id no:223、224、225、213和226,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
715、(mm)seq id no:121、227、228、229和230,并且其中lcdr2包括氨基酸序列sdg;
716、(nn)seq id no:231、232、233、234和235,并且其中lcdr2包括氨基酸序列nnd;
717、(oo)seq id no:236、237、238、171和239,并且其中lcdr2包括氨基酸序列kdt;
718、(pp)seq id no:240、143、241、242和243,并且其中lcdr2包括氨基酸序列snk;或
719、(qq)seq id no:244、138、245、246和247,并且其中lcdr2包括氨基酸序列eas。
720、在某些实施方式中,所述car结合人cd19。
721、在某些实施方式中,所述car包括抗原结合结构域选自抗体、scfv和fab。
722、在某些实施方式中,所述car包括胞内结构域,所述胞内结构域包括人nk细胞kir受体的胞质信号传导结构域。
723、在某些实施方式中,所述kir信号传导结构域包括kir2ds2信号传导结构域。
724、在某些实施方式中,所述修饰细胞是自体细胞。
725、在某些实施方式中,所述修饰细胞是同种异体细胞。
726、在某些实施方式中,所述修饰细胞是分离自人对象的细胞。
727、在某些实施方式中,所述修饰细胞是修饰t细胞。
728、另一方面,本发明包括药物组合物,其包括:本文公开的各方面或实施方式中的任一个的抗体或其抗原结合片段、scfv、car、nkr-car、分离核酸、载体或修饰免疫细胞,或其任意组合,以及药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂。
729、另一方面,本发明包括用于生成修饰免疫细胞或其前体细胞的方法,其包括将编码本文公开的各方面或实施方式中的任一个的嵌合抗原受体(car)或本文公开的各方面或实施方式中的任一个的nkr-car的分离核酸导入所述免疫细胞或前体细胞中。
730、在某些实施方式中,所述修饰免疫细胞是t细胞。
731、另一方面,本发明包括治疗有需要的对象的癌症的方法,其包括向所述对象施用有效量的本文公开的修饰免疫细胞,从而治疗所述癌症。
732、在某些实施方式中,所述癌症是血液学癌症。
733、在某些实施方式中,所述癌症与cd19的表达相关。
734、在某些实施方式中,所述cd19表达于肿瘤细胞上。
735、在某些实施方式中,所述癌症选自伯基特淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病(cll)、急性成淋巴细胞性白血病(all)、b细胞淋巴瘤和b细胞白血病。
736、在某些实施方式中,所述对象是人。
737、另一方面,本发明包括治疗有需要的对象的自身免疫性障碍或疾病的方法,其包括向所述对象施用有效量的本文公开的修饰免疫细胞,从而治疗所述自身免疫性障碍。
738、在某些实施方式中,所述自身免疫性障碍是抗体介导的。
739、在某些实施方式中,所述修饰免疫细胞的施用耗竭自身免疫性b细胞。
740、在某些实施方式中,所述自身免疫性障碍选自类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(sle)、狼疮肾炎(ln)、特发性/自身免疫性血小板减少性紫癜(itp)、特发性血栓性血小板减少性紫癜(ttp)、天疱疮相关障碍、糖尿病、硬皮病、重症肌无力、多发性硬化、血管炎和自身免疫性溶血性贫血。
741、另一方面,本发明包括治疗有需要的对象的同种抗体介导的障碍或疾病的方法,其包括向所述对象施用有效量的本文公开的修饰免疫细胞,从而治疗所述同种抗体介导的障碍或疾病。
742、在某些实施方式中,所述修饰免疫细胞的施用耗竭产生同种抗体的b细胞。
743、在某些实施方式中,所述同种抗体介导的障碍选自实体器官移植免疫不相容性、酶替代疗法抗性(resistance to enzyme replacement therapy)或急性或迟发性溶血性输血反应(acute or delayed hemolytic reactions to transfusion)以及慢性同种抗体介导的排斥(chronic alloantibody mediated rejection,camr)、器官移植免疫不相容性血友病(血友病a或b)、溶酶体贮积病(lsd)、尿素循环障碍、腺苷脱氨酶缺陷、神经元蜡样脂褐质沉积症(ncl)、血氨过多症和慢性移植物抗宿主病(cgvhd)。
744、在某些实施方式中,所述溶酶体贮积病选自糖原贮积病、高歇病、尼-皮二氏病、法布里病以及粘多糖贮积病(mps)i型、mps ii型和mps vi型。