本发明属于医药领域，具体涉及一种从植物荔枝草中分离出的内生真菌fusariumoxysporum lzc03中提取分离得到的新的次级代谢产物、制备方法及其应用。
背景技术：
1、荔枝草(salviaplebeia r.br.)是唇形科、鼠尾草属一年生或二年生草本植物，除西北部分地区外，几乎分布于全国各地，资源丰富。荔枝草的全草可入药，具有清热解毒、利尿消肿、凉血止血等功效。
2、植物内生菌是一类存在于宿主植物内部，但不引发宿主植物表现出明显的感染症状的微生物，并且内生菌与宿主之间存在着较强的相互作用理论。内生菌存在于不同植物体内，例如：藻类、苔藓、被子植物、裸子植物等。并且，内生菌可以分布于植物的不同组织细胞中，例如根、茎、叶、果实等。不同植物的内生菌是丰富多样的，不同内生菌可产生的代谢产物也是不可估计的。
3、目前，尚未有关于(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯及其活性的报道。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种次级代谢产物、制备方法及其应用。该代谢产物的名称为(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯，是从内生真菌fusarium oxysporumlzc03的发酵液分离得到。该代谢产物具有抗肿瘤及抗氧化的作用。
2、本发明所要解决上述技术问题的技术方案如下：
3、本发明提供一种新的次级代谢产物，名称为(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯，其结构式如式1a所示：
4、
5、上述化合物是从植物荔枝草根部分离出的内生真菌fusarium oxysporum lzc03中提取分离得到的，为本发明首次发现。通过对其进行生物活性测定，发现其具有抗肿瘤活性和抗氧化活性。
6、本发明提供上述次级代谢产物的制备方法，包括以下步骤：从尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)的发酵液中提取分离。
7、进一步，尖孢镰刀菌的菌株名称为尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)lzc03，菌株保藏编号为cgmcc no.41251，保藏单位名称为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2024年5月31日。
8、采取上述方案的有益效果包括：本发明从植物荔枝草根部分离出的内生真菌fusarium oxysporum lzc03次级代谢产物中提取分离得到的新的化合物(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯具有抗肿瘤以及抗氧化的活性，可用于研究开发新的抗肿瘤或抗氧化产物，例如：食品、药物、保健品等。
9、进一步，尖孢镰刀菌发酵液的制备方法包括以下步骤：将尖孢镰刀菌接种于含有大米的培养基，发酵培养。
10、进一步，提取分离包括以下步骤：
11、(1)将尖孢镰刀菌的发酵液采用甲醇提取，之后经正丁醇萃取，经硅胶柱色谱分离，收集以二氯甲烷与甲醇体积比为100∶2洗脱得到的馏分，将馏分薄层层析检测，得到产物fr.2；
12、(2)将fr.2经ods十八烷基键合相中高压色谱柱分离，收集以甲醇与水体积比30∶70洗脱得到的馏分，将馏分进行薄层层析检测，得到产物fr.2-1；
13、(3)将产物fr.2-1经半制备hplc纯化，得到(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯。
14、进一步，步骤(1)中，硅胶柱色谱分离的条件包括：以体积比为100：0-100∶50二氯甲烷-甲醇系统进行梯度洗脱。
15、进一步，步骤(2)中，ods十八烷基键合相中高压色谱柱分离的条件包括：以体积比为30∶70-80∶20的甲醇-蒸馏水系统进行梯度洗脱，流速21.00ml/min。
16、进一步，步骤(3)中，半制备hplc纯化的条件包括：ch3cn与h2o体积比为30∶70，agela半制备色谱柱xb-c18-l 5μm，流速3ml/min，波长210nm。
17、具体的，(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯的制备方法可以包括以下步骤：
18、将fusarium oxysporum lzc03接入pdb培养基，于28℃，150rpm摇床中连续培养7天；将发酵种子液接种于经灭菌后的含有大米的培养基，含有大米的培养基包括大米和水，大米和水比例为100g∶120ml，接种时比例可以为每瓶大米培养基(每瓶装有100g大米和120ml水)中倒入100ml发酵种子液，室温静置培养50天；将发酵产物加入甲醇浸泡并超声30min，过滤，取滤液，重复上述步骤，合并滤液，抽滤，旋蒸，得到浸膏；将500g浸膏分散于水中，用正丁醇萃取，浓缩，得到正丁醇层萃取物；将正丁醇层萃取物经硅胶柱色谱分离，以体积比为100：0-100：50二氯甲烷-甲醇系统进行梯度洗脱，收集馏分，将所收集得到的馏分进行薄层层析检测(二氯甲烷：甲醇＝9：1，体积比，rf＝0.75)，得到fr.2(ch2c12：ch3oh＝100：2)；将fr.2经ods十八烷基键合相中高压色谱柱以体积比为30：70-80：20的甲醇-蒸馏水系统(流速21.00ml/min)进行梯度洗脱，收集馏分，将所收集得到的馏分进行薄层层析检测(二氯甲烷：甲醇＝12：1，体积比，rf＝0.8)，得到fr.2-1(ch3oh：h2o＝30：70)；将fr.2-1经半制备hplc，半制备条件包括：ch3cn与h2o体积比30：70，agela半制备色谱柱xb-c18-l 5μm，流速3ml/min，波长210nm，纯化得到化合物1a(保留时间28.00min)。
19、本发明提供新的化合物(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯在制备抗肿瘤产品中的应用。
20、本发明提供新的化合物(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯在制备抗氧化产品中的应用。
21、上述中的产品包括但不限于药物、食品、保健品中的一种或几种。
22、本发明提供一株尖孢镰刀菌，菌株名称为尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)lzc03，菌株保藏编号为cgmcc no.41251，保藏单位名称为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2024年5月31日。
23、本发明提供上述尖孢镰刀菌在制备新的化合物(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯中的应用。
24、采用上述尖孢镰刀菌可以制备新的化合物(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯，该化合物具有抗氧化、抗肿瘤的作用。
1.一种次级代谢产物，其特征在于，名称为(2-(4-(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯，结构式如1a所示：
2.权利要求1所述次级代谢产物在制备抗氧化产品中的应用。
3.一株尖孢镰刀菌，其特征在于，菌株名称为尖孢镰刀菌(fusariumoxysporum)lzc03，菌株保藏编号为cgmcc no.41251。
4.权利要求3所述尖孢镰刀菌在制备权利要求1所述次级代谢产物中的应用。