本发明涉及生物医药，尤其涉及一种sftsv假病毒及其制备方法与应用。
背景技术：
1、严重发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(severe fever withthrombocytopenia syndrome bunyavirus，sftsv)，又称大别班达病毒(dabiebandavirus，dbv)其能引发一种人兽共患病——严重发热伴血小板减少综合征(severefever with thrombocytopenia syndrome,sfts)，患者主要临床表现为发高热、血细胞、白细胞减少及胃肠道症状，严重患者会出现器官衰竭等症状最终导致死亡。流行病学数据显示，sfts病死率可达6％-30％，已在中国、韩国、越南等东亚地区形成稳定疫源地，在中国，sfts患者主要分布于中部与东部地区，病死率平均为12％-16％。由于病毒通过蜱媒进行跨宿主传播且蜱虫在全世界范围分布广泛，sftsv已经对全球范围的公共安全造成了严重威胁，世界卫生组织已经将其列为需优先防控的传染性疾病之一。
2、sftsv属于布尼亚病毒目,白纤病毒科,白蛉病毒属；其形状为球形，直径大约为100nm，基因组中包含3个rna环段：小(s)、中(m)、大(l)三个片段。s基因片段编码核蛋白(nucleocapsidprotein，np)和非结构蛋白(nonstructural protein，nss)，由1744个核苷酸组成。np可以包裹sftsv的三个rna基因组片段，并与rna依赖的rna聚合酶形成核糖核蛋白复合体(rnp)，保护病毒免受核酸酶和宿主免疫系统的降解。nss是病毒的主要毒力因素，能影响干扰素(ifn)的分泌，促进病毒复制。m片段由3378个核苷酸组成，编码前体蛋白(gpc)，gpc在体内转变为gn与gc两种糖蛋白，糖蛋白能与宿主表面受体结合，gc是药物筛选和疫苗主要靶点。l片段由6,368个核苷酸组成，编码rdrp，其对病毒基因组的复制，mrna的转录，病毒的装配与成熟中起着关键作用。
3、sftsv作为高致病性病毒至今还没有特效药物来应对其感染，根据目前研究结果显示，氟达拉滨在神经细胞中对sftsv有良好的抵抗效果，但其会导致淋巴细胞减少和肠道不良反应；非诺贝特和洛伐他汀可抑制sftsv的复制但疗效还需要临床评估；利巴韦林对sftsv的感染有较好的预防效果，但对感染后的治疗作用并不显著；法匹拉韦虽然对治疗sftsv感染有较为明显效果，但其对发病时间长、高龄、病毒拷贝数多的病人作用比较有限；钙离子通道阻滞剂在体外可以抑制sftsv的复制，但是距离应用需要进一步的临床研究。因此新的针对sftsv的药物开发至关重要。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本发明开发了一种将sftsvnp(nucleoprotein)基因替换成报告基因的sftsvδn假病毒，以便进行高通量抗病毒化合物的筛选及病毒感染机制、组织嗜性的研究，为sftsv新药物的开发提供新方式。
2、本发明的第一个目的是提供一种sftsv假病毒，所述sftsv假病毒通过sftsv病毒的s基因中核蛋白编码基因缺失得到。
3、进一步地，所述核蛋白编码基因(np基因)的序列如seq id no.1所示。
4、本发明的第二个目的是提供含有所述sftsv假病毒的报告系统，所述报告系统中含有所述sftsv假病毒，且将缺失的核蛋白编码基因序列替换为报告基因序列。
5、进一步地，所述报告基因包括但不限于荧光蛋白基因、荧光素酶基因等。
6、本发明的第三个目的是提供含有所述sftsv假病毒或所述报告系统的重组细胞。
7、进一步地，所述重组细胞为非植物细胞，优选为动物细胞。
8、本发明的第四个目的是提供所述sftsv假病毒或所述报告系统在抗sftsv病毒感染的药物筛选中的应用。
9、进一步地，所述抗sftsv病毒感染的药物包括预防药物和/或治疗药物。
10、本发明的第五个目的是提供一种sftsv假病毒包装系统，所述sftsv假病毒sftsv假病毒中包括：
11、含有缺失s基因的表达载体，所述缺失s基因为缺失核蛋白编码基因的s基因，
12、含有m基因的表达载体，
13、含有l基因的表达载体，
14、含有np orf基因的表达载体，
15、含有rdrp orf基因的表达载体。
16、进一步地，所述表达载体包括pcdna3.1质粒。
17、进一步地，所述含有缺失s基因的表达载体上，还含有报告基因。
18、进一步地，所述s基因的序列如seq id no.2所示。
19、进一步地，所述m基因的序列如seq id no.3所示。
20、进一步地，所述l基因的序列如seq id no.4所示。
21、本发明的第五个目的是提供所述sftsv假病毒或所述报告系统的制备方法，通过所述sftsv假病毒包装系统制备得到。具体地，将sftsv假病毒包装系统转染真核细胞，表达出sftsv假病毒。
22、进一步地，通过反向遗传学技术实现sftsv假病毒的制备。与本发明制备的含荧光素酶报告基因的假病毒相比，带有gfp报告基因的假病毒包装出的滴度能力较弱。
23、借由上述方案，本发明至少具有以下优点：
24、本发明制备得到一种新的sftsv假病毒，为np缺失的sftsvδn假病毒，且在小鼠体内实验成功。该假病毒可以在生物安全防护二级实验室(bsl-2)进行体内感染实验，无法自主进行病毒复制，其可以安全地模拟病毒入侵体内过程，既避免了直接使用活病毒的高风险，又可以促进病毒的组织嗜性、致病机制的研究。该假病毒携带有相关病毒的表面蛋白，可以评估疫苗或抗体药物的中和效果；通过其表面蛋白与宿主受体的相互作用，解析病毒入侵的分子机制；具有报告基因可以高通量进行抗病药物筛选。
1.一种sftsv假病毒，其特征在于，所述sftsv假病毒通过sftsv病毒的s基因中核蛋白编码基因缺失得到。
2.根据权利要求1所述的sftsv假病毒，其特征在于，所述核蛋白编码基因的序列如seqid no.1所示。
3.一种含有sftsv假病毒的报告系统，其特征在于，所述报告系统中含有权利要求1或2所述sftsv假病毒，且将缺失的核蛋白编码基因序列替换为报告基因序列。
4.根据权利要求3所述的报告系统，其特征在于，所述报告基因包括荧光蛋白基因或荧光素酶基因。
5.含有权利要求1或2所述sftsv假病毒或权利要求3或4所述报告系统的重组细胞。
6.权利要求1或2所述sftsv假病毒、权利要求3或4所述报告系统或权利要求5所述重组细胞在抗sftsv病毒感染药物筛选中的应用。
7.一种sftsv假病毒包装系统，其特征在于，所述sftsv假病毒sftsv假病毒中包括：
8.根据权利要求7所述的sftsv假病毒包装系统，其特征在于，至少含有以下特征中的一项：
9.权利要求1或2所述sftsv假病毒或权利要求3或4所述报告系统的制备方法，其特征在于，通过权利要求7或8所述sftsv假病毒包装系统制备得到。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，通过反向遗传学制备。