一种检测RhD血型抗原的抗体及其应用的制作方法

文档序号:42958587发布日期:2025-09-09 18:56阅读:22来源:国知局

本发明涉及免疫诊断,具体而言,涉及一种检测rhd血型抗原的抗体及其应用。


背景技术:

1、血型抗原是存在于红细胞表面的分子结构,根据其不同的表达情况,人类被分为多种不同的血型系统,如abo血型系统和rh血型系统等。血型抗体是一种针对特定血型抗原的免疫蛋白质,具有与特定血型抗原相对应的抗体活性。

2、在rh血型系统中,常见的有d、c、e、c、e五种抗原,其中d抗原性最强,因此,rh血型系统最常检测rhd抗原。

3、rh血型系统一般没有天然抗体,故第一次输血时可能不会产生不良反应。但rh阴性的受血者接受rh阳性血液后,可产生免疫性抗rh抗体,如再次输受rh阳性血液时,抗体便会攻击外部的rh阳性血液,即可发生溶血性输血反应,导致摧毁红细胞,并造成疾病或死亡。rh阴性母亲若孕育rh阳性的胎儿,一旦胎儿红细胞上的rh因子由于某些原因进入母体血液(如胎盘剥落引起的流血),会使母体产生抗凝集素(抗rh抗体)。抗凝集素又经过胎盘进入胎儿循环,使胎儿的红细胞凝集、破坏,这可以导致胎儿的严重贫血,甚至死亡。

4、rhd血型抗原检测和匹配在输血、器官移植和血型鉴定等医疗应用中非常重要。目前普遍使用的血型鉴定方法有:玻片法、试管法、微柱凝胶法、固相法,医院检测血型的方法大多为玻片法,即在玻璃片上滴上一滴抗d抗体,然后加入待检测的血红细胞,如果血红细胞表面含有rhd抗原会与抗d抗体相凝聚,即为rhd阳性型血;如果不凝聚,即为rhd阴性型血。

5、上述检测方法需要针对rhd型血型抗原的抗体,目前的抗rhd血型抗原的抗体存在低温稳定性较差的问题,在2~8℃长期储存时易发生聚集或变性,导致效价下降,迫使添加高浓度稳定剂(如蔗糖、海藻糖)或依赖冷冻保存,增加成本和运输难度。


技术实现思路

1、本申请提供一种抗体,为rhd血型抗原的检测提供重要的原料来源,且具有改善的低温稳定性,易于储存和运输。

2、为了实现上述目的,根据本发明的第一个方面,提供了一种检测rhd血型抗原的抗体,前述抗体包含具有氨基酸序列seq id no:15所示重链可变区的三个互补决定区和具有氨基酸序列seq id no:18所示轻链可变区的三个互补决定区,所述互补决定区中连续的两个精氨酸残基择一突变或均独立突变为不带电氨基酸。

3、为了实现上述目的,根据本发明的第二个方面,提供了一种检测rhd血型抗原的抗体,前述所述抗体包括如下互补决定区:hcdr1,其包含gyfwt(seq id no:1)所示的氨基酸序列,或由其组成;hcdr2,其包含einhsgsttynpslks(seq id no:2)所示的氨基酸序列,或由其组成;hcdr3,其包含gfswggynygfaidy(seq id no:3)所示的氨基酸序列,或由其组成;lcdr1,其包含qgdslx1x2yygs(seq id no:4)所示的氨基酸序列,或由其组成,x1和x2各自独立地选自甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和苏氨酸;lcdr2,其包含gknnrps(seq id no:5)所示的氨基酸序列,或由其组成;lcdr3,其包含nsrdssgnhri(seq id no:6)所示的氨基酸序列,或由其组成。

4、为了实现上述目的,根据本发明的第三个方面,提供了一种检测rhd血型抗原的抗体,前述抗体包括重链可变区和轻链可变区,前述重链可变区氨基酸序列如seq id no:15所示;所述轻链可变区氨基酸序列如seq id no:18所示;所述轻链可变区中连续的两个精氨酸残基择一突变或均独立突变为不带电氨基酸。

5、为了实现上述目的,根据本发明的第四个方面,提供了一种检测rhd血型抗原的抗体,前述抗体包括重链和轻链,前述重链氨基酸序列如seq id no:17所示,所述轻链氨基酸序列如seq id no:20所示。

6、为了实现上述目的,根据本发明的第五个方面,提供了一种抗体偶联物,前述抗体偶联物包括上述抗体。

7、为了实现上述目的,根据本发明的第六个方面,提供了一种检测rhd血型抗原的试剂盒,前述试剂盒包括上述的抗体或抗体偶联物。

8、为了实现上述目的,根据本发明的第七个方面,提供了一种检测rhd血型抗原的方法,包括:

9、a)在足以发生抗体/抗原结合反应的条件下,使上述抗体、抗体偶联物、或试剂盒与待检测样品接触形成免疫复合物;和

10、b)检测所述免疫复合物的存在,所述复合物的存在指示所述测试样品中rhd血型抗原的存在。

11、为了实现上述目的,根据本发明的第八个方面,提供了上述抗体、抗体偶联物、或试剂盒在制备检测rhd血型抗原的产品或制备鉴定血型的产品中的用途。



技术特征:

1.一种检测rhd血型抗原的抗体,其特征在于,所述抗体包含具有氨基酸序列seq idno:15所示重链可变区的三个互补决定区和具有氨基酸序列seq id no:18所示轻链可变区的三个互补决定区,所述互补决定区中连续的两个精氨酸残基择一突变或均独立突变为不带电氨基酸;

2.一种检测rhd血型抗原的抗体,其特征在于,所述抗体包括如下互补决定区:

3.根据权利要求1或2所示的抗体,其特征在于,所述抗体还包括hfr1、hfr2、hfr3、hfr4、lfr1、lfr2、lfr3和lfr4所示的框架区;

4.一种检测rhd血型抗原的抗体,其包含重链可变区和轻链可变区,其特征在于,所述重链可变区氨基酸序列如seq id no:15所示;所述轻链可变区氨基酸序列如seq id no:18所示;所述轻链可变区中连续的两个精氨酸残基择一突变或均独立突变为不带电氨基酸;

5.根据权利要求1至4任一项所述的抗体,其特征在于,所述抗体还包括恒定区;

6.一种检测rhd血型抗原的抗体,其特征在于,所述抗体包括重链和轻链,所述重链的氨基酸序列如seq id no:17所示,所述轻链的氨基酸序列如seq id no:20所示,所述轻链的可变区中连续的两个精氨酸残基择一突变或均独立突变为不带电氨基酸;

7.一种抗体偶联物,其特征在于,所述抗体偶联物包括权利要求1至6任一项所述的抗体;

8.一种检测rhd血型抗原的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1至6任一项所述的抗体或权利要求7所述的抗体偶联物。

9.一种检测rhd血型抗原的方法,其特征在于,包括:

10.权利要求1至6任一项所述抗体、权利要求7所述的抗体偶联物或权利要求8所述的试剂盒在制备检测rhd血型抗原的产品或制备鉴定血型的产品中的用途。


技术总结
本发明公开了一种检测RhD血型抗原的抗体及其应用,涉及免疫诊断技术领域。本发明公开的抗RhD血型抗原抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区,该抗体为RhD血型抗原的检测提供了重要的原料来源,且具有改善的低温稳定性。

技术研发人员:季红斌,孟媛,钟冬梅,苏文昌,付永青,魏亚庆,曹慧方
受保护的技术使用者:菲鹏生物股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2025/9/8
网友询问留言 留言:0条
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!