水产养殖降低富营养化菌种的培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及微生物培养技术领域，更具体地说涉及一种水产养殖降低富营养化菌种的培养方法。
【背景技术】
[0002]水产养殖是人为控制下繁殖、培育和收获水生动植物的生产活动。一般包括在人工饲养管理下从苗种养成水产品的全过程。广义上也可包括水产资源增殖。水产养殖有粗养、精养和高密度精养等方式。粗养是在中、小型天然水域中投放苗种，完全靠天然饵料养成水产品，如湖泊水库养鱼和浅海养贝等。精养是在较小水体中用投饵、施肥方法养成水产品，如池塘养鱼、网箱养鱼和围栏养殖等。高密度精养采用流水、控温、增氧和投喂优质饵料等方法，在小水体中进行高密度养殖，从而获得高产，如流水高密度养鱼、虾等。
[0003]芽孢杆菌细菌的一科，能形成芽孢(内生孢子)的杆菌或球菌。包括芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、梭菌属、脱硫肠状菌属和芽孢八叠球菌属等。它们对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处。芽孢杆菌(bacillus)杆菌科的一属细囷。
[0004]绝大多数是一个菌体仅形成一个芽孢芽孢位于菌体内，为革兰氏阳性菌。内含DNA、RNA、可能与DNA相联系的特异芽孢蛋白质以及合成蛋白质和产生能量的系统。此外，还有大量的吡啶二羧酸钙布满整个芽孢。皮层处于核心和芽孢壳之间，含有丰富的肽聚糖。芽孢壳主要由蛋白质组成，此外，还有少量的碳水化合物和类脂类，可能还有大量的磷。最外层是外壁，其主要成分是蛋白质、一定量的葡萄糖和类脂。由于芽孢具有厚而含水量低的多层结构，所以折光性强、对染料不易着色，芽孢对热、干燥、辐射、化学消毒剂和其他理化因素有较强的抵抗力，这可能与芽孢独具的高含量吡啶二羧酸有关。
【发明内容】
[0005]本发明克服了现有技术中的不足，提供了一种水产养殖降低富营养化菌种的培养方法。
[0006]本发明的目的通过下述技术方案予以实现。
[0007]水产养殖降低富营养化菌种的培养方法，按照下述步骤进行:
[0008]步骤1，将亚硝化螺菌:红螺菌:芽孢杆菌:乳酸杆菌按体积比为2-7:5-25:15-36:9-25进行配比，得到配比后的混合菌种；
[0009]步骤2，将所述步骤I中得到的混合菌种接种在培养基上，所述培养基的组成为:牛肉膏5-35g，蛋白胨15-55g，氯化钠0.4-4.8g，氯化铵0.5-3.9g，醋酸钠1.5-2.6g，钼酸钠0.02-0.25g以及经过灭菌的海水1L，培养3-5天，得到耐盐混合菌株；
[0010]步骤3，将所述步骤2中得到的耐盐混合菌株在25-35°C，光照强度为2000-7000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为:海参养殖海水1L，氯化钠0.4-4.8g，氯化铵0.5-3.9g，醋酸钠 1.5-2.6g，硫酸镁 1.2-2.8g 以及硫酸亚铁 0.08-0.36g，PH 为 7.0-7.7，培养5-10天，得到适用于水产养殖的耐盐混合菌株。
[0011]在所述步骤I中，所述红螺菌采用淡水红螺菌或者无硫红螺菌的一种或两种，所述芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌、豆芽芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或者短小芽孢杆菌中的一种或几种，所述亚硝化螺菌:所述红螺菌:所述芽孢杆菌:所述乳酸杆菌的体积比为5:18:28:20ο
[0012]在所述步骤2中，所述培养基的组成为:牛肉膏28g，蛋白胨45g，氯化钠3.2g，氯化铵2.2g，醋酸钠1.9g，钼酸钠0.18g以及经过灭菌的海水1L，所述培养时间为4天。
[0013]在所述步骤3中，所述培养条件为:30°C，光照强度为5000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为:海参养殖海水1L，氯化钠3.2g，氯化铵2.2g，醋酸钠1.9g，硫酸镁1.9g以及硫酸亚铁0.27g，PH为7.6，所述培养时间为7天。
[0014]本发明的有益效果为:通过本方法得到的适用于水产养殖的耐盐混合菌株，对水生动物无毒性，对人体无毒副作用，并且有效的改善了海参养殖水域的水域条件，应用方法简单，具有良好的应用前景；同时向水产养殖的水域中投入该耐盐混合菌株，能够明显的改善水产养殖水域的水质环境，降低水域富营养化发生的可能性，有效地提高水产养殖的鱼、虾、蟹等等水产品的生长。
【具体实施方式】
[0015]下面通过具体的实施例对本发明的技术方案作进一步的说明。
[0016]实施例1
[0017]水产养殖降低富营养化菌种的培养方法，按照下述步骤进行:
[0018]步骤1，将亚硝化螺菌:红螺菌:芽孢杆菌:乳酸杆菌按体积比为2:5:15:9进行配比，得到配比后的混合菌种；
[0019]步骤2，将步骤I中得到的混合菌种接种在培养基上，培养基的组成为:牛肉膏5g，蛋白胨15g，氯化钠0.4g，氯化钱0.5g，醋酸钠1.5g，钼酸钠0.02g以及经过灭菌的海水1L，培养5天，得到耐盐混合菌株；
[0020]步骤3，将步骤2中得到的耐盐混合菌株在35°C，光照强度为7000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为:海参养殖海水1L，氯化钠0.4g，氯化铵0.5g，醋酸钠1.5g，硫酸镁1.2g以及硫酸亚铁0.08g，PH为7.0，培养10天，得到适用于水产养殖的耐盐混合菌株。
[0021]在步骤I中，红螺菌采用淡水红螺菌，芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌和豆芽芽孢杆菌。
[0022]实施例2
[0023]水产养殖降低富营养化菌种的培养方法，按照下述步骤进行:
[0024]步骤1，将亚硝化螺菌:红螺菌:芽孢杆菌:乳酸杆菌按体积比为7:25:36:25进行配比，得到配比后的混合菌种；
[0025]步骤2，将步骤I中得到的混合菌种接种在培养基上，所述培养基的组成为:牛肉膏35g，蛋白胨55g，氯化钠4.8g，氯化钱3.9g，醋酸钠2.6g，钼酸钠0.25g以及经过灭菌的海水1L，培养3天，得到耐盐混合菌株；
[0026]步骤3，将步骤2中得到的耐盐混合菌株在25°C，光照强度为2000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为:海参养殖海水1L，氯化钠4.8g，氯化铵3.9g，醋酸钠2.6g，硫酸镁2.8g以及硫酸亚铁0.36g，PH为7.7，培养5天，得到适用于水产养殖的耐盐混合菌株。
[0027]在步骤I中，红螺菌采用无硫红螺菌，芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌、豆芽芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌。
[0028]实施例3
[0029]水产养殖降低富营养化菌种的培养方法，按照下述步骤进行:
[0030]步骤1，将亚硝化螺菌:红螺菌:芽孢杆菌:乳酸杆菌按体积比为5:18:28:20进行配比，得到配比后的混合菌种；
[0031]步骤2，将步骤I中得到的混合菌种接种在培养基上，所述培养基的组成为:牛肉膏28g，蛋白胨45g，氯化钠3.2g，氯化钱2.2g，醋酸钠1.9g，钼酸钠0.18g以及经过灭菌的海水1L，培养4天，得到耐盐混合菌株；
[0032]步骤3，将步骤2中得到的耐盐混合菌株在30°C，光照强度为5000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为:海参养殖海水1L，氯化钠3.2g,氯化铵2.2g,醋酸钠1.9g，硫酸镁1.9g以及硫酸亚铁0.27g，PH为7.6，培养7天，得到适用于水产养殖的耐盐混合菌株。
[0033]在步骤I中，红螺菌采用淡水红螺菌和无硫红螺菌，芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌、豆芽芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌和短小芽孢杆菌。
[0034]通过本方法得到的适用于水产养殖的耐盐混合菌株，对水生动物无毒性，对人体无毒副作用，并且有效的改善了海参养殖水域的水域条件，应用方法简单，具有良好的应用前景；同时向水产养殖的水域中投入该耐盐混合菌株，能够明显的改善水产养殖水域的水质环境，降低水域富营养化发生的可能性，有效地提高水产养殖的鱼、虾、蟹等等水产品的生长。
[0035]以上对本发明做了示例性的描述，应该说明的是，在不脱离本发明的核心的情况下，任何简单的变形、修改或者其他本领域技术人员能够不花费创造性劳动的等同替换均落入本发明的保护范围。
【主权项】
1.水产养殖降低富营养化菌种的培养方法，其特征在于:按照下述步骤进行: 步骤1，将亚硝化螺菌:红螺菌:芽孢杆菌:乳酸杆菌按体积比为2-7:5-25:15-36:9-25进行配比，得到配比后的混合菌种； 步骤2，将所述步骤I中得到的混合菌种接种在培养基上，所述培养基的组成为:牛肉膏5-35g，蛋白胨15-55g，氯化钠0.4-4.8g，氯化铵0.5-3.9g，醋酸钠1.5-2.6g，钼酸钠0.02-0.25g以及经过灭菌的海水1L，培养3-5天，得到耐盐混合菌株； 步骤3，将所述步骤2中得到的耐盐混合菌株在25-35°C，光照强度为2000-7000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为:海参养殖海水1L，氯化钠0.4-4.8g，氯化铵0.5-3.9g，醋酸钠 1.5-2.6g，硫酸镁 1.2-2.8g 以及硫酸亚铁 0.08-0.36g，PH 为 7.0-7.7，培养5-10天，得到适用于水产养殖的耐盐混合菌株。
2.根据权利要求1所述的水产养殖降低富营养化菌种的培养方法，其特征在于:在所述步骤I中，所述红螺菌采用淡水红螺菌或者无硫红螺菌的一种或两种，所述芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌、豆芽芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或者短小芽孢杆菌中的一种或几种，所述亚硝化螺菌:所述红螺菌:所述芽孢杆菌:所述乳酸杆菌的体积比为5:18:28:20。
3.根据权利要求1所述的水产养殖降低富营养化菌种的培养方法，其特征在于:在所述步骤2中，所述培养基的组成为:牛肉膏28g，蛋白胨45g，氯化钠3.2g，氯化铵2.2g，醋酸钠1.9g，钼酸钠0.18g以及经过灭菌的海水1L，所述培养时间为4天。
4.根据权利要求1所述的水产养殖降低富营养化菌种的培养方法，其特征在于:在所述步骤3中，所述培养条件为:30°C，光照强度为5000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为:海参养殖海水1L，氯化钠3.2g，氯化铵2.2g，醋酸钠1.9g，硫酸镁1.9g以及硫酸亚铁0.27g，PH为7.6，所述培养时间为7天。
【专利摘要】本发明提供用于水产养殖降低富营养化的芽孢杆菌培养方法，包括混合菌种的配比、耐盐混合菌种的培养、适用于水产养殖的耐盐混合菌株的培养。本发明的有益效果是通过本方法得到的适用于水产养殖的耐盐混合菌株，对水生动物无毒性，对人体无毒副作用，并且有效的改善了海参养殖水域的水域条件，应用方法简单，具有良好的应用前景；同时向水产养殖的水域中投入该耐盐混合菌株，能够明显的改善水产养殖水域的水质环境，降低水域富营养化发生的可能性，有效地提高水产养殖的鱼、虾、蟹等等水产品的生长。
【IPC分类】C02F3-34, C12R1-225, C12R1-07, C12R1-01, C12N1-20
【公开号】CN104560807
【申请号】CN201410834627
【发明人】季延滨, 李涛
【申请人】天津振邦水产养殖有限公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月29日