一种云南地方晾晒烟中黄酮类化合物及其制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物化学技术领域，具体涉及一种源于云南地方晾晒烟中黄酮类化合 物及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002] 云南地方晾晒烟是烟草的云南特有变种，烟草从明万历末年进入云南，至清乾隆 年间成为当地常见的农作物。云南自然条件好，温暖的河谷，冷凉的半山区、山区都适应烟 草的生长。而且由于云南气候及地理环境多样，所以烟草在多年的栽培过程中形成了很多 个具有地方特色的晾晒烟品种，其中著名的有：罗平八大河烟、师宗五洛河烟、会泽乐业烟、 蒙自新安所烟、富源大河烟、大姚赵户冲烟、云龙天登烟、宾川白塔烟、巍山南门烟、南涧乐 居烟、腾冲绮罗生烟等。这些晾晒烟在当地常盛产不衰，但其次生代谢产物的研宄还从未见 报道过。
[0003] 黄酮（flavone)，是黄酮类化合物的总称，泛指两个具有酚羟基的苯环（A-环与 B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物。研宄表明，黄酮类化合物具有心 血管系统活性、抗菌及抗病毒活性、抗肿瘤活性、抗氧化自由基活性、抗炎、镇痛、抗变态等 多种药理活性。同时已有研宄证实，其药理作用与化学结构密切相关，为了研宄这类化合物 的构效关系，可进一步研宄和开发更多的黄酮类化合物，从中寻找有效的先导化合物和活 性基团。本发明从云南地方晾晒烟中分离得到了一种新的黄酮类化合物，该化合物至今尚 未见到相关报道，值得一提的是该化合物具有显著的抗轮转病毒活性。
【发明内容】
[0004] 本发明的第一方面在于提供一种结构新颖的的黄酮类化合物，其分子式为 C21H1605，经过分析化学鉴定，其具有下述结构：
[0005]
【主权项】
1. 如式（I)所示黄酮类化合物，该化合物命名为烟草黄酮-E，其分子式为C21H1605，且 具有下述结构：
2. 权利要求1所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 以晾晒烟叶片为原料，先制备烟草提取物浸膏，再用硅胶柱层析法处理所述烟草提取 物浸膏以得到洗脱液，然后使该洗脱液经过高压液相色谱分离，以得到所述黄酮类化合物。
3. 根据权利要求2所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： a. 制备烟草提取物浸膏：以晾晒烟叶片为原料，将其粉碎并用第一溶剂浸泡提取2~ 4次，每次浸泡12h~72h，将提取液合并，过滤，滤液浓缩后得到所述烟草提取物浸膏；其中 所述第一溶剂为浓度为60wt%~lOOwt%的乙醇、甲醇或丙酮的水溶液，且每次提取用的 第一溶剂的重量与晾晒烟叶片的重量比=1. 5~4:1 ; b. 硅胶柱层析：将步骤a得到的烟草提取物浸膏用纯甲醇、纯乙醇或纯丙酮溶解后，与 为烟草提取物浸膏的0. 8~2. 5重量倍的60~120目硅胶拌样，得到拌样后的混合物； 将为烟草提取物浸膏的2~8重量倍的160~300目硅胶干法装柱后，将拌样后的混 合物上样，然后用体积比依次为10:0、9:1、8:2、7:3、6:4和5:5的氯仿-甲醇的混合溶剂作 为洗脱剂进行梯度洗脱，收集其中用体积比为9:1的氯仿-甲醇的混合溶剂洗脱时得到的 洗脱液，称为第一洗脱液； 将上述第一洗脱液用硅胶层析柱继续分离，用体积比从15:1线性变化至2:1的氯 仿-丙酮的混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，薄层层析色谱跟踪，将其先后划分成6个部 分，其中第二个部分称为第二洗脱液；将上述第二洗脱液用硅胶柱层析继续分离，洗脱剂为 石油醚-乙酸乙酯的混合溶剂，洗脱梯度的体积比为从9:1线性变化至5:5,薄层层析色谱 跟踪，将其先后划分成5个部分，其中第三部分称为第三洗脱液； c. 高压液相色谱分离：将步骤b得到的第三洗脱液通入高压液相色谱进行分离纯化， 该高压液相色谱采用21. 2mmX250mm，5ym的C18色谱柱，流动相为60wt%的甲醇水溶液，流 动相流速为12mL/min，紫外检测器检测波长为371nm，第三洗脱液液每次进样60~150yL， 收集每次进样后色谱峰保留时间为28. 2min时所对应的洗脱液，称为第四洗脱液，将该第 四洗脱液脱除溶剂后即得所述黄酮类化合物。
4. 根据权利要求2或3所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，所述高压液相色 谱分离是指使用时压力在5-15Mpa的反相制备色谱。
5. 根据权利要求2或3所述的黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，还包括以下进 一步提纯的步骤：将在所述高压液相色谱分离之后得到的所述黄酮类化合物再次溶于纯甲 醇，并以纯甲醇的为流动相，通过葡聚糖凝胶柱进行层析分离，提到进一步提纯的所述异黄 酮类化合物。
6. 权利要求1所述的黄酮类化合物在制备抗轮状病毒药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种结构新颖的黄酮类化合物，该化合物命名为烟草黄酮-E，其分子式为C21H16O5，且具有如式(Ⅰ)所示的结构：式(Ⅰ)。本发明还公开了上述化合物的用途，经活性测试表明，其对轮状病毒具有很好的抑制作用。本发明化合物结构新颖，且具有较好的抗毒活性，可作为抗轮状病毒的先导化合物用于抗轮状病毒药物制剂研发。
【IPC分类】A61P31-12, C07D493-04
【公开号】CN104844615
【申请号】CN201510170058
【发明人】杨光宇, 申钦鹏, 刘春波, 张凤梅, 何沛, 张涛, 司晓喜, 刘志华, 朱瑞芝, 王昆淼, 苏钟璧, 缪明明
【申请人】云南中烟工业有限责任公司
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2015年4月11日