化合物及其在制备ptp1b抑制剂和治疗和/或预防ⅱ型糖尿病的药物的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及化合物领域，具体来说涉及化合物及其在制备PTP1B抑制剂和治疗和 /或预防II型糖尿病的药物的用途。
【背景技术】
[0002] 糖尿病（DiabetesMellitus，DM)是一种慢性内分泌代谢疾病，其中II型糖尿病 占了大多数，我国糖尿病患者有2000万以上，其中近90%为II型糖尿病，并且出现多发性、 年轻化的特点，严重威胁国民健康。
[0003] 胰岛素抵抗是II型糖尿病发病的关键因素，蛋白酪氨酸磷酯酶1B(PTP1B)在胰岛 素抵抗的形成中起到关键的作用。研究证实PTP1B作为胰岛素信号通路的负调节因子，可 以将被激活的胰岛素受体或其底物的酪氨酸残基去磷酸化，从而终止胰岛素信号通路，弓丨 起机体对胰岛素的抵抗，形成机体胰岛素相对缺乏进而发展为II型糖尿病。在动物研究中 显示，PTP1B基因敲除小鼠在糖耐量和胰岛素耐量试验中表现出对胰岛素敏感度的显著提 高。因而PTP1B抑制剂可作为一种新型的II型糖尿病治疗药物而发挥重要的作用。
[0004] 因此，开发PTP1B抑制剂类创新型降糖药物及治疗和/或预防II型糖尿病的药物 具有重要意义。
【发明内容】
[0005] 本发明提供了两种新的化合物，其可以用于制备PTP1B抑制剂和治疗和/或预防 II型糖尿病的药物。
[0006] 本发明的一个方面，提供了如式I和式II所示的化合物或其药用盐，
[0007]
[0008] 还提供了一种用于制备PTP1B抑制剂的药物组合物，含有有效量的至少一中权利 要求1中所述的化合物或其药用盐。
[0009] 又提供一种用于治疗和/或预防II型糖尿病的药物组合物，所述药物组合物含有 有效量的至少一种权利要求1中的化合物和/或其药用盐。
[0010] 以上所述的药物组合物，其中所述药物组合物包括一种或多种药学上可接受的辅 料。
[0011] 以上所述的药物组合物，其中所述药物组合物为注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、丸 剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂或喷剂。
[0012] 还提供了以上所述的化合物及其药用盐在制备PTP1B抑制剂的产品的用途。
[0013] 也提供了所述的化合物及其药用盐在制备治疗和/或预防II型糖尿病的产品的 用途。
[0014] 以上所述的用途，所述产品为药物或可食用的产品。
[0015] 以上所述的用途，所述可食用的产品为口服液、茶饮、含片、胶囊、饮品或泡腾片。
[0016] 本发明所提供的两个化合物均为首次被发现，亦没有关于两个化合物的化学合成 方面的相关报道。实验证明式I所示化合物与式II所示化合物表现出显著的对PTP1B抑 制活性；式I和式II所示结构的化合物对PTP1B抑制的IC5。值分别为32. 10和30. 50yM， 具有显著效果，在治疗II型糖尿病方面具有成药潜力，为开发成为治疗II型糖尿病创新药 物、开发PTP1B抑制剂类创新型降糖药物提供了新的物质基础。本发明对研究与开发新的 PTP1B抑制剂和治疗II型糖尿病的药物提供了候选化合物，为开发利用大型真菌来源的天 然活性物质提供了科学依据。另外，上述的两个化合物分离自被大众广泛食用的真菌，其安 全性具有初步的保障。
【具体实施方式】
[0017] 以下结合实施例，对本发明的【具体实施方式】进行更加详细的说明，以便能够更好 地理解本发明的方案以及其各个方面的优点。
[0018] 下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0019] 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0020] 实施例1、化合物金顶侧耳素A和金顶侧耳素E的分离制备
[0021] 1、金顶侧耳菌株L736的发酵
[0022] 金顶侧耳种子培养液的制备：将金顶侧耳菌株L736 (购自中国农业科学院）的菌 丝接种至灭菌的PDB培养基中，25°C培养7天。PDB培养基：马铃薯200克，葡萄糖20克， 琼脂15克，水定容至1000毫升。
[0023] 取10mL种子培养液分别接种到灭菌的装有固体培养基的500毫升三角瓶中，接种 20并瓦，25°C培养40天。固体培养基：90克籼米，120毫升去尚子水。
[0024] 2、金顶侧耳素A和金顶侧耳素E的提取与分离制备
[0025] 发酵结束，将800毫升乙酸乙酯加入到培养的三角瓶中，常温浸泡提取一周，重复 提取三次，合并乙酸乙酯提取液减压干燥，得到13. 5克提取物浸膏。
[0026] 将浸膏使用硅胶柱（青岛海洋化工有限公司，200-300目，柱层析硅胶200克； ①6X80厘米）层析，以二氯甲烷_甲醇为流动相进行梯度洗脱（100:0，100:1，100:2， 100:3,100:5,100:10,100:20,0:100)，每个梯度洗脱溶剂2000毫升，每500毫升收集为一 个馏分，分别收集100%二氯甲烷梯度的洗脱物和二氯甲烷-甲醇体积比为100:10的洗脱 物。
[0027]将100 %二氯甲烷梯度的洗脱物（700毫克），经制备HPLC分离纯化（RP-18， YMC-Pack，250X10毫米，5微米），以乙腈-水体积比为78:22的混合溶剂进行洗脱得到金 顶侧耳素A(2毫克），即式I所示化合物。
[0028] 将二氯甲烷-甲醇体积比为100:10的洗脱物（2. 6克）经反相中低压柱层析（0DS， Merck公司，40-63微米，〇 3X60厘米），以甲醇-水为溶剂进行梯度洗脱（20:80,40:60， 60:40,80:20,100:0)，每个梯度洗脱溶剂400毫升，每100毫升收集为一个馏分。收集甲 醇-水体积比为40:60的洗脱产物（60mg)经制备HPLC分离纯化，以甲醇-水体积比为 30:70的混合溶剂进行洗脱得到金顶侧耳素E(4毫克），即式II所示化合物。
[0029] 3、化合物的结构确认
[0030] 金顶侧耳素A，其波谱数据如下所示：
[0031] HRT0FMS(正离子模式）m/z: [M+Na]+251. 1047 (calcd.forC15H1602Na251. 1043); 其分子式为C15H1602。iH-NMR(500MHz，甲醇-d4): 57.51 (lH，d，J=8.lHz，H-4)， 8 7. 30(1H,s,H-7), 8 7. 12(1H,d,J=8. 1Hz,H-6), 8 6. 94 (1H,m,H-9), 8 2. 62 (3H,s,H -13), 5 2.50 (3H,s，H-14), 5 2.30 (3H,s，H-ll), 5 2.05 (3H,s,H-12)。13C-NMR(125MHz，甲 醇-d4) :S183. 5 (C-8)，S157. 8 (C-10)，S154. 3 (C-7a)，S149. 1 (C-2)，S138. 7 (C-6)，S 127. 5(C-3a), 8 124. 9 (C-5), 8 124. 5 (C-3), 8l21.4(C-9), 8 120. 8 (C-4), 8 112. 2 (C-7) ，S28.5(C-12),S22.2(C-14),S21.4(C-11), 5 9.9(013)。
[0032] 据此，确定金顶侧耳素A的结构式如式⑴所示：
[0033]
[0034] 金顶侧耳素E，其波谱数据如下所示：
[0035] HRT0FMS(正离子模式）m/z: [M+Na]+307. 1516 (calcd.forC15H2405Na307. 1516); 其分子式为C15H2405。iH-NMRGOOMHz，甲醇-d4) :s6. 65 (1H,s,H-9)，s4. 18 (1H,dd,J= 8. 2Hz,H