一种适用于单个核细胞分层的离心管的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种适用于单个核细胞分层的离心管。
【背景技术】
[0002]目前，夕卜周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell，PBMC)即外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞，目前主要的分离方法是Ficoll-hypaque(葡聚糖一泛影葡胺)密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异，因此得以分离。红细胞和粒细胞密度大于分层液，同时因红细胞遇到Ficoll而凝集成串钱状而沉积于管底。血小板则因密度小而悬浮于血浆中，唯有与分层液密度相当的单个核细胞密集在血浆层和分层液的界面中，呈白膜状，吸取该层细胞递经洗涤离心重悬。本法分离单个核细胞纯度可达95%，淋巴细胞约占90%?95%,细胞获得率可达80%以上。
[0003]但是在实际操作过程中，白膜层的吸取是一项非常考验实验操作人员经验的工作，需要小心的将吸管插入单个核细胞白膜层上方，沿试管壁周缘吸取该层单个核细胞，要尽量避免吸取到白膜层下方的分离液。该操作步骤需要实验操作人员拥有较为熟练的实验操作技能，不然会影响到单个核细胞的收集量。为了解决这一问题，我们设计了一款专门用于单个核细胞密度梯度离心的离心管。
【实用新型内容】
[0004]本实用新型目的是针对现有技术存在的缺陷提供一种适用于单个核细胞分层的离心管。
[0005]本实用新型为实现上述目的，采用如下技术方案:一种适用于单个核细胞分层的离心管，包括由上至下依次设置的管盖、上部管身、中部管身和下部管身;所述上部管身的直径由上至下逐渐变小，且其下部以150°的圆弧角度向下延伸以形成下管接口；所述中部管身的中间部分为镂空结构，所述镂空结构内设置有中间软管，所述中间软管的上部与所述上部管身的下管接口连接，所述中间软管的下部与所述下部管身的上管接口连接;其中，所述下部管身呈锥型平底结构。
[0006]进一步的，所述管盖采用塑料材质制成，其直径为3.4cm，高为1.2cm，厚为0.15cmo
[0007]进一步的，所述管盖与所述上部管身螺纹连接，且所述管盖的外侧设有一圈防滑竖纹。
[0008]进一步的，所述上部管身采用塑料材质制成，其长度为53cm，其上部直径为29cm，其下部直径为23.6cm。
[0009]进一步的，所述上部管身的下管接口的长为6cm，直径为0.85cm。
[0010]进一步的，所述中间软管采用透明橡胶材质制成。
[0011]进一步的，所述下部管身的长度为43cm。
[0012]本实用新型的有益效果:本实用新型的离心管在离心时，白膜层和血浆层会浮在软管上层，分离液和红细胞层会沉淀在软管下层，分离时只需要用止血钳夹住软管，倒出白膜层和血浆层的液体即可，这样可以确保完全吸尽白膜层细胞又不会混入红细胞。
【附图说明】
[0013]图1本实用新型的结构示意图。
【具体实施方式】
[0014]图1所示，涉及一种适用于单个核细胞分层的离心管，包括由上至下依次设置的管盖1、上部管身2、中部管身3和下部管身4;所述上部管身2的直径由上至下逐渐变小，且其下部以150°的圆弧角度向下延伸以形成下管接口；所述中部管身3的中间部分为镂空结构，所述镂空结构内设置有中间软管31，所述中间软管31的上部与所述上部管身2的下管接口连接，所述中间软管31的下部与所述下部管身4的上管接口连接;其中，所述下部管身4呈锥型平底结构。
[0015]具体设计时，所述管盖I采用塑料材质制成，其直径为3.4cm，高为1.2cm，厚为
0.15cm。所述管盖I与所述上部管身2螺纹连接，且所述管盖I的外侧设有一圈防滑竖纹。所述上部管身2采用塑料材质制成，其长度为53cm，其上部直径为29cm，其下部直径为23.6cm。所述上部管身2的下管接口的长为6cm，直径为0.85cm。所述中间软管31采用透明橡胶材质制成。所述下部管身4的长度为43cm。
[0016]经测试，当下管接口的孔径大小设置为0.85cm时，能使试管倾倒时，FicolI表面产生的液体表面张力能确保试管底部的红细胞层不会倒出。
[0017]本实用新型的这款离心管的总容量为40ml，适用于15ml-20ml血液分离单个核细胞。
[0018]实验步骤:
[0019]1、向离心管中加入20ml淋巴细胞分离液(刚好位于橡胶软管下方)，缓慢加入20ml
血液，确保液面分层。
[0020]2、小心地将离心管放入离心机中400g离心30分钟。
[0021]3、离心分层后，可见最下层为红细胞和粒细胞(约5-8ml)上一层为20ml淋巴细胞分离液，软管上部分为部分淋巴细胞分离液、白膜层、血浆。
[0022]4、取血管钳夹住软管，直接将离心管竖直倾倒出软管上层的液体，即可方便快速的得到全部的单个核细胞。
[0023]离心时，白膜层和血浆层会浮在软管上层，分离液和红细胞层会沉淀在软管下层，分离时只需要用止血钳夹住软管，倒出白膜层和血浆层的液体就可以了，这样可以确保完全吸尽白膜层细胞又不会混入红细胞。
[0024]以上所述仅为本实用新型的较佳实施例，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。
【主权项】
1.一种适用于单个核细胞分层的离心管，其特征在于，包括由上至下依次设置的管盖(I)、上部管身(2)、中部管身(3)和下部管身(4);所述上部管身(2)的直径由上至下逐渐变小，且其下部以150°的圆弧角度向下延伸以形成下管接口；所述中部管身(3)的中间部分为镂空结构，所述镂空结构内设置有中间软管(31)，所述中间软管(31)的上部与所述上部管身(2)的下管接口连接，所述中间软管(31)的下部与所述下部管身(4)的上管接口连接;其中，所述下部管身(4)呈锥型平底结构。2.如权利要求1所述的一种适用于单个核细胞分层的离心管，其特征在于，所述管盖(I)采用塑料材质制成，其直径为3.4cm，高为1.2cm，厚为0.15cm。3.如权利要求2所述的一种适用于单个核细胞分层的离心管，其特征在于，所述管盖(I)与所述上部管身(2)螺纹连接，且所述管盖(I)的外侧设有一圈防滑竖纹。4.如权利要求1所述的一种适用于单个核细胞分层的离心管，其特征在于，所述上部管身(2)采用塑料材质制成，其长度为53cm，其上部直径为29cm，其下部直径为23.6cm。5.如权利要求1所述的一种适用于单个核细胞分层的离心管，其特征在于，所述上部管身(2)的下管接口的长为6cm，直径为0.85cmο6.如权利要求1所述的一种适用于单个核细胞分层的离心管，其特征在于，所述中间软管(31)采用透明橡胶材质制成。7.如权利要求1所述的一种适用于单个核细胞分层的离心管，其特征在于，所述下部管身(4)的长度为43cm。
【专利摘要】本实用新型公开了一种适用于单个核细胞分层的离心管，包括由上至下依次设置的管盖、上部管身、中部管身和下部管身；所述上部管身的直径由上至下逐渐变小，且其下部以150°的圆弧角度向下延伸以形成下管接口；所述中部管身的中间部分为镂空结构，所述镂空结构内设置有中间软管，所述中间软管的上部与所述上部管身的下管接口连接，所述中间软管的下部与所述下部管身的上管接口连接；其中，所述下部管身呈锥型平底结构。本实用新型的离心管在离心时，白膜层和血浆层会浮在软管上层，分离液和红细胞层会沉淀在软管下层，分离时只需要用止血钳夹住软管，倒出白膜层和血浆层的液体即可，这样可以确保完全吸尽白膜层细胞又不会混入红细胞。
【IPC分类】C12M1/24
【公开号】CN205313547
【申请号】CN201521129673
【发明人】刘洋, 范星洲, 张丽丽, 吴明远, 袁文杰, 陆梦晓, 刘红琼, 王建刚, 李宏涛
【申请人】协和华东干细胞基因工程有限公司
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2015年12月30日