一种用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置

本技术属于生物医学细胞分离，尤其涉及一种用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置。

背景技术：

1、外周血单核细胞(pbmc)以及骨髓来源的原代细胞(bmdn)作为临床的体外研究中的重要原料，是基础研究和细胞治疗中最为常用的细胞群。因此，将所需细胞从血液样本中分离对于这些领域的研究以及免疫学的诊断和治疗十分关键。

2、当前用于从血液样本中分离上述细胞的技术大体上包括去除红血细胞的初始步骤。传统的密度分离方法是从外周血中去除红血细胞最常用的方法之一。ficoll-paquetm(ficoll)是目前使用最为广泛的密度分离液。在ficoll密度分离中，离心前需要将样本层叠在ficoll分离液上。离心后，由于单个核细胞、粒细胞和红细胞之间的密度差异，红细胞和粒细胞沉淀到底部，靶细胞群保持在ficoll和血浆之间。

3、目前实验室中适用于密度梯度分离的离心机仅适合15ml离心管，可用于人及大鼠中细胞的提取，而小鼠体积较小，其血量、骨髓量(通常为1ml以下)都比人及大鼠相当少。若用常规离心管进行梯度离心时很难看清楚分层，导致分离后不能准确吸取目标细胞。

4、因此，需要开发一种提小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，能够采用密度梯度离心法快速地分离出纯度较高的单核细胞或原代细胞，提升效率，为使用者提供便利。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的不足，本实用新型的目的在于提供一种用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，所述分离装置能够快速提取小鼠原代细胞或单核细胞，避免了因离心管体积大而小鼠样本量少导致实验者无法看清分层，因无法获取原代细胞或单核细胞进而造成实验失败。

2、为达此目的，本实用新型采用以下技术方案：

3、本实用新型提供了一种用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，所述分离装置包括离心管体和第一管盖；

4、所述离心管体包括第一离心管和第二离心管；

5、所述第二离心管同轴固定在所述第一离心管的内部；

6、所述第一离心管与所述第二离心管之间设置有填充层。

7、本实用新型通过将第二离心管同轴固定在所述第一离心管的内部，能够满足小鼠提原代细胞或单核细胞实验的需求并提高了提取细胞效率，通过在第一离心管与第二离心管之间设置有填充层，其能够将第一离心管与第二离心管之间空隙填满，起到平衡离心管的作用，不因离心管很轻在离心机里旋转时被倾倒，导致分层出来的层面被混匀或分不清层的情况。

8、本实用新型中，对所述分离装置中第二离心管的具体固定方式不做限定，只要保证在离心过程中第二离心管不与第一离心管脱离即可。

9、作为本实用新型优选的技术方案，所述第一离心管的顶部与所述第二离心管的顶部位于同一水平面上。

10、作为本实用新型优选的技术方案，所述第一离心管与所述第一管盖螺纹连接。

11、优选地，所述第二离心管上设置有第二管盖。

12、本实用新型中，所述第二离心管与所述第二管盖固定连接。

13、作为本实用新型优选的技术方案，所述第一离心管的体积为14-16ml，例如可以是14ml、14.5ml、15ml、15.5ml或16ml等，但不限于所列举的数值，数值范围内其它未列举的数值同样适用。

14、作为本实用新型优选的技术方案，所述第一离心管的直径为14-18mm，例如可以是14mm、14.5mm、15mm、15.5mm、16mm、16.5mm、17mm、17.5mm或18mm等，但不限于所列举的数值，数值范围内其它未列举的数值同样适用。

15、作为本实用新型优选的技术方案，所述第二离心管的体积为3-5ml，例如可以是3ml、3.5ml、4ml、4.5ml或5ml等，但不限于所列举的数值，数值范围内其它未列举的数值同样适用。

16、作为本实用新型优选的技术方案，所述第二离心管的直径为3-6mm，例如可以是3mm、3.5mm、4mm、4.5mm、5mm、5.5mm或6mm等，但不限于所列举的数值，数值范围内其它未列举的数值同样适用。

17、作为本实用新型优选的技术方案，所述第一离心管包括聚乙烯管、聚丙烯管、聚四氟乙烯管或聚碳酸酯管中的任意一种。

18、优选地，所述第二离心管包括聚乙烯管、聚丙烯管、聚四氟乙烯管或聚碳酸酯管中的任意一种。

19、作为本实用新型优选的技术方案，所述填充层包括泡沫填充层、水填充层或汞填充层中的任意一种。

20、作为本实用新型优选的技术方案，所述小鼠为3-8周的小鼠。

21、本实用新型中，所述小鼠可以为c57bl/6小鼠。

22、本实用新型中，所述小鼠的骨髓量为0.5-1ml，例如可以是0.6ml、0.7ml、0.8ml、0.9ml或1ml等，但不限于所列举的数值，数值范围内其它未列举的数值同样适用。

23、本实用新型还提供了一种前述分离装置的进行淋巴细胞分离方法，所述分离方法包括：

24、(1)将0.5ml血液和0.5ml pbs缓冲液加入第二离心管内，吹打混匀，得到血液稀释液；

25、(2)将0.75ml ficoll(ficoll 1.084，货号17544602)加入新的第二离心管内；所述ficoll使用前上下混匀；

26、(3)向ficoll层上加入1ml血液稀释液，然后在400-500xg转速、18-20℃下离心30-40min，之后去除上层的血浆层，吸取中间的白膜层(淋巴细胞)至新的第二离心管内；

27、(4)将pbs缓冲液加入步骤(3)所述新的第二离心管内，然后在400-500xg转速、18-20℃下离心10-15min，之后取淋巴细胞待用；

28、步骤(4)所述pbs缓冲液与步骤(3)所述淋巴细胞的体积比为3:1；

29、步骤(1)与步骤(2)不分先后顺序。

30、与现有技术相比，本实用新型的有益效果为：

31、本实用新型提供的分离装置通过将第二离心管同轴固定在所述第一离心管的内部，能够满足小鼠提原代细胞或单核细胞实验的需求并提高了提取细胞效率，通过在第一离心管与第二离心管之间设置有填充层，其能够将第一离心管与第二离心管之间空隙填满，起到平衡离心管的作用，避免分层出来的层面被混匀或分不清层的情况；所述分离装置结构简单，使用时操作便捷，成本较低。

技术特征：

1.一种用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述分离装置包括离心管体和第一管盖；

2.根据权利要求1所述的用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述第一离心管的顶部与所述第二离心管的顶部位于同一水平面上。

3.根据权利要求1所述的用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述第一离心管与所述第一管盖螺纹连接；

4.根据权利要求1所述的用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述第一离心管的体积为14-16ml。

5.根据权利要求1所述的用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述第一离心管的直径为14-18mm。

6.根据权利要求1所述的用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述第二离心管的体积为3-5ml。

7.根据权利要求1所述的用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述第二离心管的直径为3-6mm。

8.根据权利要求1所述的用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述第一离心管包括聚乙烯管、聚丙烯管、聚四氟乙烯管或聚碳酸酯管中的任意一种；

9.根据权利要求1所述的用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述填充层包括泡沫填充层、水填充层或汞填充层中的任意一种。

10.根据权利要求1所述的用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，其特征在于，所述小鼠为3-8周的小鼠。

技术总结
本技术提供了一种用于提取小鼠原代细胞或单核细胞的分离装置，所述分离装置包括离心管体和第一管盖；所述离心管体包括第一离心管和第二离心管；所述第二离心管同轴固定在所述第一离心管的内部；所述第一离心管与所述第二离心管之间设置有填充层。所述分离装置能够快速提取小鼠原代细胞或单核细胞，避免了因离心管体积大而小鼠样本量少导致实验者无法看清分层，因无法获取原代细胞或单核细胞进而造成实验失败。

技术研发人员：努尔比亚·阿吉,唐薪竣,宋元林,冯娜娜,陈翠翠
受保护的技术使用者：复旦大学附属中山医院
技术研发日：20230526
技术公布日：2024/1/15