专利名称：治疗骨质增生病药物穿龙骨刺片的检测方法
技术领域：
本发明涉及的是对治疗骨质增生病药物穿龙骨刺片的有效药用成分进行检测的一种方法。
穿龙骨刺片是一种用于治疗骨质增生病症的药物。目前对其有效药用成分尚无明确规范的检测方法，对于保证其质量和疗效的稳定可靠是一个不容忽视的影响因素。
鉴于此，本发明的目的是提供一种经试验表明是对其有效药用物质成分进行检测的简单方便的方法。
本发明用于治疗骨质增生病药物穿龙骨刺片的检测方法，是将粉碎状的待测药物用溶剂提取，将提取液分别与对照用的淫羊藿甙、枸杞标准品以薄层层析方式进行对照鉴别，其中a)将粉碎状药物以甲醇提取，除去甲醇后的提取物再用水溶解，对该提取物水溶液以用水饱和的正丁醇提取，提取液用2％碳酸氢钠溶液洗涤后除去正丁醇，得到的剩余提取物用甲醇溶解而成为第一待测试液。将其与对照用的淫羊藿甙标准品的甲醇溶液按常规方式用硅胶G薄层板进行层析展开后晾干，在其表面喷以重量/体积比为0.8-1.0的三氯化铝乙醇溶液后，于365纳米紫外灯下检视相应位置处的相同颜色荧光斑点。
b)将粉碎状药物用水浸提，该水溶提取液再用乙酸乙酯提取，对除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用乙醇溶解而成为第二待测试液。另将对照用枸杞子药材的水煎提取物用乙酸乙酯提取，对除去乙酸乙酯得到的剩余提取物用乙醇溶解作为对照用的枸杞标准品溶液，将其与第二待测试液按常规方式用硅胶G薄层板进行层析展开后晾干，于365纳米紫外灯下检视相应位置处的相同颜色荧光斑点。
上述方法中，所说的a)操作中将粉碎状药物以甲醇进行提取时，可以采用目前常用的多种方法。例如，采用甲醇加热下的回流方式就是试验表明有较好效果的方式之一。
在上述方法中所说的a)操作中进行薄层层析时，所用的展开试剂可以有多种选择。例如，采用体积比为10∶1∶1∶1的乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水的混合溶液体系，或是采用体积比为65∶35∶10的氯仿-甲醇-水的混合溶液体系等，都是可供选择的方式之一。众所周知，选择的展开试剂不同，对样品中的各类成分在层析推进过程中的分离程度会有不同的影响。在现有的试验中显示，其中以选择略有偏小极性的展开剂体系可以使上述的薄层层析有较好的分离效果。例如，在上述所列两种展开剂体系的试验中，前者的展开分离效果优于后者。
在上述方法中所说的b)操作中，对粉碎状的药物用水浸提时，根据具体情况也可以有多种选择。例如，可以采用水浸、煎煮或回流等不同方法，其中采用以热水，例如可以采用温度为40℃-50℃的温热水浸泡提取，在试验中显示是操作简便和提取效果较好的方式之一。
方法中所说的b)操作中进行薄层层析时所用的展开试剂，如上述，同样也可以有多种选择。例如，采用体积比为6∶4∶0.2的甲苯-乙酸乙酯-甲酸的混合溶液体系，或是采用体积比为6∶4∶2的乙酸乙酯-氯仿-甲酸的混合溶液体系，都是可供选择的方式之一。现有的试验也显示，在所选用的展开剂中，仍以极性偏小的展开剂体系的分离效果较好。例如，对于此处所列的两种展开剂体系，试验结果也显示，前者的展开分离效果优于后者。
试验表明，采用本发明的上述检测方法对治疗骨质增生病药物穿龙骨刺片的成分进行检测，可以具有较为理想的专属性和准确性，且能较少受到外界因素的干扰。
以下通过具体的实施例对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅局限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
图1是本发明检测方法对药物中淫羊藿成分的一种薄层层析的展开结果图2是本发明检测方法对药物中淫羊藿成分的另一种薄层层析的展开结果图3是本发明检测方法对药物中枸杞成分的一种薄层层析展开结果图4是本发明检测方法对药物中枸杞成分的另一种薄层层析展开结果本例治疗骨质增生病药物穿龙骨刺片的检测方法，是将粉碎状的待测药物分别用适当的溶剂提取并作适当分离纯化处理后，再将提取液成分分别与对照用的淫羊藿甙、枸杞子标准品以薄层层析方法展开并进行对照鉴别。具体操作为
(1)取药片10片，研细并加甲醇30毫升加热回流1小时后过滤，滤液挥尽甲醇后剩余的提取物加水约20毫升溶解，用以水饱和的正丁醇25毫升分别提取两次，对合并的正丁醇提取液用2％碳酸氢钠溶液20毫升洗涤两次后，将除去正丁醇后得到的剩余物用1毫升甲醇溶解，成为第一待测试液。另取对照用的淫羊藿甙标准品用甲醇溶解，制成淫羊藿甙含量为1毫克/毫升的对照试液。按《中国药典》(一)[2000版]附录中规定的薄层层析方法，分别取上述第一待测试液和对照用淫羊藿甙标准品试液各5-10微升点样于同一硅胶G薄层板上，以体积比为10∶1∶1∶1的乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水组成的混合溶液展开剂体系推进展开后，取出并晾干，在其表面喷以重量/体积比为0.8-1.0的三氯化铝乙醇溶液后，在105℃烘干15分钟后，置365纳米紫外灯下检视相应位置处的相同颜色荧光斑点。其薄层层析结果如图1所示。若上述的薄层层析中采用由体积比为65∶35∶10的氯仿-甲醇-水组成的混合溶液的展开剂体系，其层析展开结果如图2所示。
(2)取同样的药片15片研细后，加温度为40℃-50℃的热水30毫升浸泡溶解提取1小时后，对该水溶提取液分别用乙酸乙酯25毫升提取两次，将合并并除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用1毫升乙醇溶解，成为第二待测试液。另取对照用的枸杞子药材0.5克，加水50毫升煎煮20分钟，冷却后过滤，滤液用乙酸乙酯15毫升振摇提取，提取液除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用1毫升乙醇溶解后，作为对照用的枸杞标准品试液。同样按《中国药典》(一)[2000版]附录中规定的薄层层析方法，分别取上述的第二待测试液和对照用枸杞标准品试液各5-10微升点样于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6∶4∶0.2的甲苯-乙酸乙酯-甲酸的混合溶液展开剂体系推进展开后晾干，置365纳米紫外灯下检视相应位置处的相同颜色荧光斑点。其薄层层析结果如图3所示。若在上述的薄层层析中采用由体积比为6∶4∶2的乙酸乙酯-氯仿-甲酸的混合溶液展开剂体系，其层析展开的结果如图4所示。
权利要求
1.治疗骨质增生病药物穿龙骨刺片的检测方法，其特征在于将粉碎状的待测药物用溶剂提取，将提取液分别与对照用的淫羊藿甙、枸杞标准品以薄层层析方式进行对照鉴别，其中a)将粉碎状药物以甲醇提取，除去甲醇后的提取物再用水溶解，对该提取物水溶液以用水饱和的正丁醇提取，提取液用2％碳酸氢钠溶液洗涤后除去正丁醇，得到的剩余提取物用甲醇溶解而成为第一待测试液，将其与对照用的淫羊藿甙标准品的甲醇溶液按常规方式用硅胶G薄层板进行层析展开后晾干，在其表面喷以重量/体积比为0.8-1.0的三氯化铝乙醇溶液后，于365纳米紫外灯下检视相应位置处的相同颜色荧光斑点；b)将粉碎状药物用水浸提，该水溶提取液再用乙酸乙酯提取，对除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用乙醇溶解而成为第二待测试液，另将对照用枸杞子药材的水煎提取物用乙酸乙酯提取，对除去乙酸乙酯得到的剩余提取物用乙醇溶解作为对照用的枸杞标准品溶液，将其与第二待测试液按常规方式用硅胶G薄层板进行层析展开后晾干，于365纳米紫外灯下检视相应位置处的相同颜色荧光斑点。
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所说的a)操作中将粉碎状药物以甲醇提取时，采用甲醇加热下的回流方式。
3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所说的a)操作中进行薄层层析所用的展开试剂是体积比为10∶1∶1∶1的乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水的混合溶液体系。
4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所说的在a)操作中进行薄层层析所用的展开试剂是体积比为65∶35∶10的氯仿-甲醇-水的混合溶液体系。
5.如权利要求1至4之一所述的检测方法，其特征在于所说的a)操作中，将粉碎状药物以甲醇提取时的药物用量为10片待测药物，对除去正丁醇后得到的剩余提取物用1毫升甲醇溶解成为第一待测试液，对照用的淫羊藿甙标准品甲醇溶液浓度为含淫羊藿甙1毫克/毫升，进行薄层层析时各样品的点样量分别为5-10微升。
6.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所说的b)操作中对粉碎状药物用水浸提时采用以热水浸泡的方式。
7.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于所说的b)操作中对粉碎状药物用水浸提时采用的热水温度为40℃-50℃。
8.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所说的b)操作中进行薄层层析所用的展开试剂是体积比为6∶4∶0.2的甲苯-乙酸乙酯-甲酸的混合溶液体系。
9.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所说的b)操作中进行薄层层析所用的展开试剂是体积比为6∶4∶2的乙酸乙酯-氯仿-甲酸的混合溶液体系。
10.如权利要求1至9之一所述的检测方法，其特征在于所说的b)操作中，对粉碎状药物用水浸提时的药物用量为15片待测药物，对除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物用1毫升乙醇溶解成为第二待测试液，对照用的枸杞子标准品溶液为用0.5克枸杞子药材加水煎煮20分钟后的水溶液先用乙酸乙酯进行提取，除去乙酸乙酯后得到的剩余提取物再用1毫升乙醇溶解作为对照用的枸杞标准品溶液，进行薄层层析时各样品的点样量分别为5-10微升。
全文摘要
治疗骨质增生药物穿龙骨刺片的检测方法:将待测药物的溶剂提取液分别与对照用的淫羊藿甙、枸杞标准品以薄层层析方式进行对照鉴别。其中:a)药物的甲醇提取物经水溶、水饱和的正丁醇提取、洗涤并除去正丁醇的提取物用甲醇溶解,与淫羊藿甙标准品甲醇溶液薄层析展开、晾干并喷以三氯化铝乙醇溶液;b)药物的水浸提液用乙酸乙酯提取,除去溶剂的提取物乙醇溶解,与以同样方法得到的枸杞子提取物的乙醇溶液对照,薄层析展开后晾干。分别检视紫外灯下相应的荧光斑点。
文档编号G01N30/90GK1382987SQ0110737
公开日2002年12月4日 申请日期2001年4月25日 优先权日2001年4月25日
发明者尹述凡, 邓道清, 肖华, 夏都灵, 苏泽华, 贺云, 卢燕君, 张永昱, 陈乐 申请人:四川普瑞药业有限责任公司