专利名称：超声组织处理两步法及其组织超声处理装置的制作方法
技术领域：
本发明是涉及一种组织处理方法及其处理装置，尤其是能在临床病理诊断过程中对待检组织进行超声处理的方法及其一种组织超声处理装置。
为此，本发明提供了一种密闭组织超声处理装置，这种组织超声处理装置包括超声处理仪和密闭组织处理装置，其特征在于前述密闭组织处理装置包括冷凝回流器、组织篮、敞口试剂缸三部分；实施时将病理取材的组织标本放入组织篮内，再将组织篮放入盛有处理溶液的试剂缸内，然后再将冷凝回流器垂直插入试剂缸口中，通过胶塞与试剂缸密闭连接，至此，冷凝回流器与试剂缸及组织篮共同组成一个密闭组织处理装置，将该装置放在超声处理仪的超声换能器上。由此在密闭状态下对组织进行丙酮、浸蜡超声处理，使组织的超声处理过程避免了试剂被蒸干，试剂挥发污染环境的缺陷，并使处理过程更简单，耗时更短，切片质量更优良稳定，同时也能满足快速病理诊断的速度要求和常规病理制片的各种要求，从而达到组织处理时间短、切片质量高、诊断速度快、适用范围广、无空气污染的目的。
本发明还提供一种超声组织处理方法，其技术特征为将丙酮冰醋酸处理溶液装入试剂缸中，在90℃以下对组织进行超声处理10分钟以下，然后再将石蜡溶液装入试剂缸中，在90℃以下对组织进行超声浸蜡处理10分钟以下。我们将这种方法称之为“超声组织处理两步法”。
根据本发明的一个特征，采用90％～100％浓度丙酮100ml+冰醋酸5ml的丙酮冰醋酸溶液对组织进行超声处理。
为表明本发明，现就相关的技术设备及操作方法陈述如下一、基本设备1、超声组织处理仪国内厂家提供，该仪器的工作平台是电热可调恒温水浴槽及其中的超声换能器，为组织处理提供恒温加热和超声波振荡的环境，达到加速组织处理的过程。
2、本发明的组织超声处理装置包括试剂缸、冷凝回流器和组织篮三部分。该装置为超声组织处理过程提供了一个密闭的环境，避免试剂蒸发而导致试剂锐减和污染环境，并使装置内保持稳定压力和温度，有了该装置，可以选择较高的处理温度。适当的加热是组织处理必要的条件，温度过低，处理速度太慢，温度过高，组织收缩严重影响切片质量。
3、组织处理专用试剂丙酮冰醋酸溶液，90％～100％浓度丙酮100ml+冰醋酸5ml酿成。丙酮对组织具有良好的固定、脱水和透明作用，冰醋酸可以适当提高丙酮的沸点，减少处理过程组织的收缩和硬化，改善组织切片的顺应性，提高HE染色的亮丽和对比度。石蜡选用溶点58～60℃优质石蜡。该种石蜡具有密度较高，质地细腻和柔韧性好等优良品质，所以切片不易碎裂和皱褶，漂片时展开充分。二、具体操作方法1、标本取材临床送检的各种组织标本，用75％的酒精保存按常规取材。组织块厚度＜2mm，以1～1.5mm为佳；破碎成细小组织用擦镜纸包好，骨质脱钙后取材。经取材的组织按顺序放入组织篮小格内。
2、组织超声处理超声处理仪按使用说明书操作，首先给水浴槽内注水并打开电源开机预热到75℃或80℃。将组织连同组织篮移入盛丙酮溶液的试剂缸内，注入丙酮到浸没组织篮1cm左右，连接好冷凝回流器。丙酮处理将试剂缸移放在超声换能器上，开启超声工作开关，在90℃以下对组织进行超声处理10分钟以下，超声处理最佳为8分钟/75℃或5～6分钟/80℃。浸蜡石蜡预溶预热，将组织连同组织篮和冷凝回流器从盛丙酮溶液的试剂缸内取出，移入接到盛石蜡溶液的试剂缸内，再把试剂缸放置在超声换能器上，开启超声工作开关，在90℃以下对组织进行超声浸蜡处理10分钟以下，进行超声浸蜡处理最佳为7分钟/75℃或5分钟/80℃。
3、浸蜡完毕后，组织即可进行常规石蜡包埋和切片及染色制作。
为了更好地说明本发明的优点及特点，将本发明与现有技术比较如下1、传统石蜡切片法的具体步骤为病理标本取材→10％浓度的甲醛固定2小时→80％浓度的酒精脱水1小时→85％酒精脱水1小时→95％酒精脱水1小时×2次→100％酒精脱水1小时×2次→二甲苯透明30分钟×2次→浸蜡1小时×3次→组织石蜡包埋→切片→脱蜡→染色→封片。组织包埋前的处理需13小时以上。
本发明的具体步骤为病理标本取材→丙酮超声处理5～8分钟→超声浸蜡5～7分钟→组织石蜡包埋→切片→脱蜡→染色→封片。组织包埋前的处理仅需10～15分钟。
2、冰冻切片法的具体步骤为病理标本取材→速冻(约需5分钟)→切片→固定→染色→封片；共需时间15～20分钟完成全过程。速度虽较快，但切片质量常与传统切片不一致，同时，组织块不便保存，无法对细小组织进行切片。
本发明对组织处理整个过程能在20～25分钟内完成，切片质量与传统切片一致，同时能对细微组织进行切片，组织块便于保存。
3、原有超声组织处理石蜡切片法的具体步骤为病理标本常规取材→超声处理AF液(95％酒精90ml+40％甲醛10ml)超声固定5分钟→95％酒精超声脱水3～7分钟→100％酒精超声脱水5～8分钟→纯丙酮超声处理3～7分钟→二甲苯超声透明3～5分钟→超声浸蜡10～15分钟。浸蜡完毕，按常规石蜡包埋和切片。超声处理的工作温度60～65℃，组织处理过程均是开放式处理。各种试剂在加热和超声振荡作用下，大量蒸发，造成工作环境的极大污染，尤其是甲醛、二甲苯和丙酮的污染最为严重，可以说污染问题是超声组织处理石蜡切片技术难以推广应用的最大障碍。另外，操作过程需要6步和30～47分钟，加上步骤更换的时间，组织处理过程实际耗时会在40～60分钟，很难适应手术时快速病理诊断的要求。
本发明能很好地解决上述缺点，其具有组织处理快速—组织包埋前的处理仅需10～15分钟，步骤简单—丙酮超声处理、超声浸蜡处理两个步骤，采用密闭组织处理装置—无污染，并能完成常规制片工作的优点。
综上所述，本发明所提供的组织超声处理装置及“超声组织处理两步法”，彻底解决了原有病理制片技术的种种缺陷，且具备了制片快速、切片优良、能大批量制片，制片过程无污染、技术成本低等诸多优点。
本发明的优点具体体现为1、时间本发明的组织超声处理仅需丙酮和浸蜡两个步骤即可完成，如选用75℃的工作温度，共耗时15分钟，如选用80℃的工作温度，仅耗时10分钟，步骤简单，速度快，对单个组织的制片，能在20分钟内完成全过程，能满足手术时快速度病理诊断的要求。
2、切片质量选用75℃和15分钟方案处理组织，切片质量不低于常规石蜡切片，并能适用于任何类型组织的制片。选用80℃和10分钟的方案，对某些组织，如子宫内膜和胃肠粘膜等的处理，收缩度稍大于常规石蜡切片法，但不影响诊断。
3、适用范围广“超声组织处理两步法”，能一次性处理大批量和不同类型的组织标本且切片良好，能满足日常工作的要求，切片速度快，能适应手术时快速病理诊断的要求，用经“超声组织处理两步法”处理过的切片进行免疫组化染色和特殊染色，效果良好。
4、清洁环保“超声组织处理两步法”，是在密闭条件下处理组织，无空气污染。同时该法避免使用甲醛和二甲苯等强致癌物质，如按全国病理单位4000个，每个病理单位每周消耗一公斤甲醛(10％)和二甲苯计算，每年有近200吨甲醛和200吨二甲苯的废弃物污染水源，如全国病理单位能采用本法制片，其环保效益是可想而知的。
本发明的具体实施方式
由以下实施例及其附图详细给出
图2本发明中超声处理仪的俯视图。
图3本发明中冷凝回流器的剖面图。
图4本发明中试剂缸的剖面示意图。
图5本发明中组织篮的剖面示意图。
图6本发明中组织篮暨图5的俯视图。
1超声处理仪 2冷凝回流器3组织篮 4试剂缸11外壳 12控制平台13水浴槽 14超声换能器15电热管 20上气室21外壳体 22胶塞23进气口 24出气口25水箱 26直列冷却管27水箱上封板 28水箱下封板29下气室 31组织篮的叠加层格32中轴棒 33外板34内隔板 35网孔式底板41试剂缸外体 42瓶口加固沿43喇叭状瓶口 241安全阀具体实施方式
以下结合附图及较佳实施例，对依据本发明提出的组织超声处理装置其具体实施方式
、结构、特征及其功效，详细说明如下请参阅
图1所示，本发明的组织超声处理装置，其包括有超声处理仪1和密闭组织处理装置。该密闭组织处理装置包括冷凝回流器2、组织篮3、敞口试剂缸4三部分上述组织篮3放入盛有处理溶液的上述敞口试剂缸4内，上述冷凝回流器2垂直插入于敞口试剂缸口4中，通过胶塞22与上述敞口试剂缸4密闭连接；上述密闭组织处理装置放置在上述超声处理仪1的超声换能器14上。
请参见图2所示，超声处理仪1，其有立方体的外壳11，外壳11顶部靠前为控制平台12。该控制平台12包括有电源开关、超声开启键、温控键、控时键，外壳11顶部中央部分有一个圆形水浴槽13，圆形水浴槽13中安装有电热管15。工作时将水注入圆形水浴槽13，作为热能和超声能的传递介质，水浴槽13中于电热管15两边对应装有两个超声换能器14，超声换能器14提供一定功率和频率的超声源，电热管15在工作时对水浴槽13中的水加热。
请参见图3所示的冷凝回流器2，该冷凝回流器2为圆柱形外壳体21，外壳体21下部通过水箱下封板28与圆锥形下气室29相连接；进气口23与下气室29连接，并从胶塞22的中心穿过，胶塞22与试剂缸4密闭连接(参见图1)；外壳体21上部通过水箱上封板27与圆锥形上气室20连接；出气口24与上气室20连接；安全阀241置于出气口24处；安全阀241为玻璃球做成，能使冷凝回流器2内保持一定的正压力，从而起到安全阀的作用；外壳体21内部为水箱25，用水作为冷却剂；水箱25内置放有多根直列冷却管26，试剂蒸气通过直列冷却管26流通并获得冷凝和回流。
请参见图4所示的敞口试剂缸4，其为透明玻璃缸体41，具有喇叭状瓶口43，并有加固沿42，此加固沿采用无瓶颈形式，以方便组织篮3进出；实际操作时，将试剂缸4置放在水浴槽13中。
请参见图5、6所示的组织篮3，其为多层叠加格结构31，并由一中轴棒32固定；每层叠加格结构31由外板33、内格板34、网孔式底板35构成；实际操作时，将组织篮3置放于盛有处理液的试剂缸4中。
本发明实施例说明临床送检各种组织标本，用75％的酒精保存按常规取材。组织块厚度＜2mm，以1～1.5mm为佳；破碎成细小组织用擦镜纸包好，骨质脱钙后取材。经取材的组织按顺序放入组织篮小格31内；将超声处理仪1上的水浴槽13内注入水并打开电源开机预热到75℃或80℃，将组织连同组织篮移入试剂缸4内，注入丙酮到浸没组织篮1cm左右，然后将冷凝回流器2的进气口23垂直插入试剂缸4口，通过胶塞22与试剂缸4密闭连接，至此，冷凝回流器与试剂缸及组织篮共同组成一个密闭的组织处理装置，将该装放置在超声处理仪的水浴槽13中，借助水浴槽13中的超声换能器14及电热管15所提供的热能和超声能对组织篮3内的组织标本进行丙酮超声处理，超声处理8分钟/75℃或5～6分钟/80℃完毕。然后，将组织连同组织篮3和冷凝回流器2从试剂缸4中取出，移入接到盛有经过预溶预热石蜡的试剂缸4中，再把试剂缸4放置在超声处理仪1上(步骤同上)进行超声浸蜡处理7分钟/75℃或5分钟/80℃完毕。浸蜡完毕后，组织即可进行常规石蜡包埋和切片及染色制作。
现代医学，由于有了先进的窥镜活检和影像导引下的穿刺活检技术，因此，临床上任何部位和组织病变的手术前或治疗前的病理活检诊断已达到了无所不能的地步。然而传统的病理诊断需要2-3个工作日，严重迟滞了临床诊疗的进程，增加了病人的精神负担和经济负担。因此，再保证准确诊断的前提下，尽可能缩短病理的诊断过程，是现代社会生活和临床医学的迫切需要。本发明能对内窥镜或穿刺活检细小组织快速制出优良的切片，能满足现代医学对病理的快速诊断的要求。病理诊断将象做血常规一样，标本随到随切片，1小时内发出病理报告。病理科将不再使用甲醛和二甲苯，工作人员从此告别了这些致癌物质的危害，病理工作将成为安全的职业，同时也不再因甲醛和二甲苯的废弃而造成社会环境污染。另外本发明所使用的丙酮醋酸溶液对组织具有优良的固定、脱水和透明的性能，冰醋酸能有效降低组织收缩和增强染色的对比度，使切片更优良、染色更亮丽。用本法制作的切片，对抗原破坏较轻，不影响免疫组化和特殊染色结果。
权利要求
1.一种组织超声处理装置包括超声处理仪和密闭组织处理装置，其特征在于前述密闭组织处理装置包括冷凝回流器、组织篮、敞口试剂缸三部分；实施时将病理取材的组织标本放入组织篮内，再将组织篮放入盛有处理溶液的试剂缸内，然后再将冷凝回流器垂直插入试剂缸口中，通过胶塞与试剂缸密闭连接，至此，冷凝回流器与试剂缸及组织篮共同组成一个密闭组织处理装置，将该装置放在超声处理仪的超声换能器上。
2.根据权利要求1所述的组织超声处理装置，其特征在于所述的冷凝回流器为水冷或风冷式。
3.根据权利要求2所述的组织超声处理装置，其特征在于所述的冷凝回流器为直列管水冷或风冷式。
4.根据权利要求2所述的组织超声处理装置，其特征在于所述的冷凝回流器为单管或多管盘旋螺管状水冷或风冷式。
5.根据权利要求1、2、3或4所述的组织超声处理装置，其特征在于所述的组织篮为多层叠加结构，每层内分成若干个小格，由中轴棒固定。
6.根据权利要求5所述的组织超声处理装置，其特征在于所述的组织篮为圆形或方形的蜂窝状多层叠加结构。
7.根据权利要求5所述的组织超声处理装置，其特征在于所述的敞口试剂缸为敞口无瓶颈透明玻璃缸。
8.根据权利要求1或6所述的组织超声处理装置，其特征在于所述的敞口试剂缸为敞口无瓶颈透明玻璃缸。
9.一种超声组织处理方法，其特征在于将丙酮冰醋酸处理溶液装入试剂缸中，在90℃以下对组织进行超声处理10分钟以下，然后再将石蜡溶液装入试剂缸中，在90℃以下对组织进行超声浸蜡处理10分钟以下。
10.根据权利要求9所述的一种超声组织处理方法其特征在于所述的丙酮冰醋酸溶液的配方为90％～100％浓度丙酮100ml+冰醋酸5ml。
全文摘要
本发明用于解决组织超声处理过程试剂被蒸发和污染空气的问题，建立组织石蜡切片新方法及其装置。其发明为病理标本经常规取材，用超声组织处理仪和发明人自己制作的组织超声处理装置，对待检组织进行超声处理丙酮冰醋酸溶液处理10分钟以下，浸蜡处理10分钟以下，超声处理温度选用90℃以下。处理完毕，按常规包埋、切片和染色。组织处理两步骤共10～15分钟完成，组织超声处理过程无污染，切片质量好，能一次同时处理大量的不同组织类型和大小的组织标本，即便是微小的组织，亦能获得优良的切片。
文档编号G01N1/06GK1410751SQ02153488
公开日2003年4月16日 申请日期2002年12月3日 优先权日2002年12月3日
发明者吴伟健, 朱海丰 申请人:吴伟健, 朱海丰