专利名称：一种牛冷冻精液畸形率检测的方法
技术领域：
本发明涉及一种精液精子数的检测方法，尤其涉及一种牛冷冻精液畸形率检测的方法。
背景技术：
牛冷冻精液作为繁育改良和育种工作的重要手段，已成为国际贸易的重要商品，而其质量的优劣直接影响到农牧企业的经济效益。牛冷冻精液在我国发展30多年来，从最初的冷配母牛2万头到目前全部实现冷配。经历了从无到有、从少到多、从低到高的发展过程，尽管在实际生产中已推广应用，但仍有一些问题有待研究。而精子畸形率作为评价精子质量水平的一个重要指标，如何更加准确、简便地检测也开始为人们所重视。长期以来，我国一直采用传统的技术路线进行冷冻精液的质量检测，要经过抹片、固定、染色、镜检等程序；准备过程耗时长、需要试剂繁多，而制片过程中的抹片操作方法，也会因人为操作不当而造成畸形率的提高而影响质量检测的准确性。这些因素都导致以往的技术很难在基层家畜改良单位推广，在很大程度上限制了养殖户农民的利益。
发明内容
本发明的目的是要提供一种操作简便、省时且检测数据更加精确的牛冷冻精液畸形率检测的方法。
本发明的方法通过以下步骤来实现的a.配置P.B.S液分别称取磷酸二氢钠 0.24克磷酸氢二钠 0.652克氯化钠 0.45克用双蒸馏水定容至100ml；b.配置0.2％甲醛缓冲液先用0.5ml的甲醛液加4.5ml的P.B.S液配置出10％甲醛缓冲液，然后，再用0.4ml的10％甲醛缓冲液加P.B.S液，配置出0.2％甲醛缓冲液；c.将精液滴于载玻片上，再在精液上滴一滴0.2％甲醛缓冲液，加盖玻片，直接于显微镜下观察；并用计数器读出畸形精子数以及精子总数，从而计算出畸形精子率。
基于上述构思，本发明的方法与现有技术的方法相比，具有如下的优点(1)检测效果好，由于避免采用传统方法中抹片的步骤，也就避免了人为操作因素对检测精确度的影响，提高了检测数据的准确性和稳定性；(2)操作简便，本发明的方法无需抹片、染色、固定等步骤，只需将0.2％甲醛缓冲液配置好，即可随时进行检测；
(3)节省时间，因为本发明的方法明显简化了实际检测步骤，与传统方法相比可节省2小时左右。
因而本发明的牛冷冻精液畸形率检测的方法具有显著的创造性、经济性和实用性，是一种值得推广的检测方法。
具体实施例方式
下面结合典型实施例对本发明作进一步说明。
主要器材和原料显微镜、载玻片、计数器、蒸馏水、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、甲醛；然后，按照以下步骤操作a.配置P.B.S液分别称取磷酸二氢钠 0.24克磷酸氢二钠 0.652克氯化钠 0.45克用双蒸馏水定容至100ml；b.配置0.2％甲醛缓冲液先用0.5ml甲醛液加4.5mlP.B.S液配置10％甲醛缓冲液，然后，用0.4ml的10％甲醛缓冲液加P.B.S液，配置出0.2％甲醛缓冲液；c.将精液滴于载玻片上，再在精液上滴一滴0.2％甲醛缓冲液，加盖玻片，直接于显微镜下观察；并用计数器读出畸形精子数以及精子总数。
然后按以下公式计算畸形精子率
权利要求
1.一种牛冷冻精液畸形率检测的方法，主要包含下述步骤a.配置P.B.S液分别称取磷酸二氢钠 0.24克磷酸氢二钠 0.652克氯化钠 0.45克用双蒸馏水定容至100ml；b.配置0.2％甲醛缓冲液先用0.5ml甲醛液加4.5mlP.B.S液配置10％甲醛缓冲液，然后，用0.4ml的10％甲醛缓冲液加P.B.S液，配置出0.2％甲醛缓冲液；c.将精液滴于载玻片上，再在精液上滴一滴0.2％甲醛缓冲液，加盖玻片，直接于显微镜下观察，并用计数器读出畸形精子数以及精子总数，从而计算出畸形精子率。
全文摘要
本发明涉及一种牛冷冻精液畸形率的检测方法，主要包括以下步骤(a)按一定的质量比例配置P.B.S液；(b)配置0.2％甲醛缓冲液；(c)将精液滴于载玻片上，再在精液上滴一滴0.2％甲醛缓冲液，加盖玻片，然后直接于显微镜下观察，并用计数器读出畸形精子数以及精子总数，从而计算出畸形精子率。利用本发明的方法因为无需传统方法中的抹片、染色、固定等步骤，所以具有操作简便、省时且检测数据准确等诸多优点，是一种值得推广的检测方法。
文档编号G01N21/84GK1731179SQ200510028389
公开日2006年2月8日 申请日期2005年8月2日 优先权日2005年8月2日
发明者夏伟铭 申请人:上海金晖家畜遗传开发有限公司