专利名称：第四纪沉积物中的孢粉的无乙酸酐的醋解分析方法
技术领域：
本发明涉及一种古生物学化石孢粉的实验技术，具体涉及一种改进的第四纪沉积物中的孢粉的醋解分析方法。
背景技术：
孢粉分析是科研人员研究地层中保存的植物孢子和花粉的应用性工作，对于研究地质历史时期的植被演变和气候变迁具有重大意义，同时在地质勘探、寻找煤炭、石油、能源及其它矿藏上起着重要作用。而作为孢粉研究的前提，是怎样利用化学、物理的方法从岩石中提取化石孢粉，并制成能永久保存的薄片，即通常所说的孢粉分析。这是一种专门的技术，是孢粉学重要组成部分。同样，化石孢粉也是第四纪地层研究的重要内容，具有重要的科学与应用价值。孢粉分析的通常方法是用盐酸与氢氟酸去除无机物质，而得到耐酸的有机壁化石。而第四纪孢粉中具有大量未降解的植物碎屑和有机杂质，会大大影响分析处理的效果，因此首先要消除这些有机杂质的干扰。通常是通过醋解法，对第四纪沉积物及表土样品内的有机杂质净化处理。醋解法是1956年苏联的玻克罗斯卡娅就发明的方法(玻克罗斯卡娅1956年著《花粉分析》)样品经过脱水、醋洗法后，再配制9比1的乙酸酐、硫酸溶液加入试管中，然后加热。在配制中，对安全操作要求极高，不能有明火出现，因此操作非常危险，并很难掌握，因此不容易推广。其次，乙酸酐是国家指定的易燃品，属于国家管制，通常必须要单位介绍信并报公安局的批准，因此实验室手续购买极为烦琐，严重影响实验分析的时间与效率。因此，迫切需要有改进方法，而改进方法所用替代试剂必须安全可靠、容易购买。
发明内容
本发明的目的是对传统的醋解法进行改进，克服其使用危险药品乙酸酐的弊病，用安全的药品代替传统方法中的乙酸酐，以方便实验室的操作和药品的管理。
本方法的核心内容为用冰醋酸代替传统方法中的乙酸酐，方案是第四纪沉积物中的孢粉的无乙酸酐的醋解分析方法，具体步骤是，样品前处理孢粉样品用稀盐酸去除碳酸盐岩，用氢氟酸去除掉硅质成分，再用浓盐酸加热处理后，过滤集中；将经过上述处理的样品，离心脱水，再用醋酸洗一次，同样离心脱水去除醋酸；无乙酸酐的醋解法溶液的配制在冰醋酸内按比例加入硫酸，搅拌均匀，冰醋酸与硫酸的质量比是，冰醋酸75～85％，硫酸15～25％；将配制好的醋解法溶液加入完全脱水样品中，搅拌，加热10分钟左右，使纤维素、原生质、腐殖质及一些杂质充分溶解，样品与醋解法溶液的质量比为1∶2～3；将冷却后的样品加水稀释，离心，将酸液倒掉，再加水稀释并离心，反复2-3次，去除酸液；将样品中加少量水，在超声波清洗机中清洗，再倒入10微米筛子里进行过筛。目的经过醋解法的处理后的样品，有一些细小的碎屑及灰粉，这时用适当孔径的筛子将杂质过滤，剩下的就是化石孢粉；
将过筛得到的样品，集中再次离心脱水后就可以制片永久保存。
以上方案中的冰醋酸与硫酸的最佳质量比，本申请推荐冰醋酸80％，硫酸20％。
通过试验发现用冰醋酸代替乙酸酐的方法完全可行，因为冰醋酸和乙酸酐都是弱酸，而硫酸是一种强酸能和任何一种乙酸混合而形成溶液，根据它们的特征两种弱酸都有净化样品的功能；而冰醋酸不是易燃品，并且在配制过程中即安全又可靠。通过反复实验，在试验中得出冰醋酸+硫酸＝8比2的最佳试剂比，可以除去样品中的原生质、纤维素、腐殖质及其它杂质。样品再结合超声波清洗，清洗之后用筛子过筛处理，处理出来的化石孢粉无论从内部结构、表面纹饰上都非常清晰而无杂质沾染，尤其是依附在化石孢粉壁上的杂质都能完全除去，得到的孢粉化石形态清楚、并无细小杂质沾染，非常利于化石鉴定和统计，大大降低了科研工作者的劳动量，并提高了研究的准确性。因此本项发明在第四纪研究中有着广泛的用途，是沿用50年的第四纪传统的醋解法的重大突破，因此具有极为重要的科学与生产价值。同时克服了使用危险药品乙酸酐的弊病，方便了实验室的操作和药品的管理。
具体实施例方式实施例1，第四纪沉积物中的孢粉的无乙酸酐的醋解分析方法，每处理一批化石样品时，都有要经过化学和物理及清洁处理样品后集中到小离心管中，然后制成永久保存的薄片。一般来讲，对于胶结不太紧的洞穴、湖泊沉积物或者没有成岩的表土样，它们中含较多的原生质、纤维素、腐殖质等及其它杂质。这种样品用常规的方法处理后，必须用醋解法，特别是分析现代花粉，必须用此方法进行，才能达到化石孢粉清晰度的效果。步骤如下1.样品前处理孢粉样品通常用10％的稀盐酸去除碳酸盐岩，用42％的氢氟酸去除掉硅质成分，再用浓盐酸36-38％加热处理后，经过10微米筛子(尼龙)过滤集中。得到的剩余样品中含有腐殖质、纤维素、原生质及其它有机杂质，以上的化学药品对其无法去除。因此要用醋解法去除。
2.改良的醋解法溶液的配制冰醋酸(C4H6O2化学纯；浓度99％)+硫酸(H2SO4化学纯；浓度98％)＝8比2把准备好的量筒内倒入8份冰醋酸，然后再加入需要的2份硫酸，再用玻璃棒搅拌一下却可。
3.将经过盐酸和氢氟酸去除无机物后的处理好的样品，放入10亳升小离心管中，直接离心脱水，离心时间3分钟(2000转/分钟)。脱水之后再用醋酸洗一次样品，同样离心脱水去除醋酸。
4.将配制好的醋解法溶液用滴管吸入完全脱水样品的10亳升小离心管中，吸入样品的2-3倍的溶液，用小玻璃棒搅拌，使小管里的样品得到反应后，电炉加热10分钟左右，使纤维素、原生质、腐殖质及一些杂质充分溶解于样品之中。
5.将冷却后的10毫升小离心管中的样品直接加水稀释酸液，离心3分钟(2000转/分钟)，将酸液倒掉，再加水稀释并离心，反复2-3即可去除酸液。
6.将10毫升小离心管里的样品，倒入200毫升的小烧杯中，加少量水，在超声波清洗机中清洗20秒，再倒入10微米筛子里进行过筛。目的经过醋解法的处理后的样品，有一些细小的碎屑及灰粉，这时用适当孔径的筛子将杂质过滤，剩下的就是化石孢粉。将过筛得到的样品，再集中并放入10毫升离心管中，再次离心脱水后就可以制片永久保存。得到的孢粉化石形态清楚、并无细小杂质沾染，非常利于化石鉴定和统计，大大降低了科研工作者的劳动量，并提高了研究的准确性。因此本项发明在第四纪研究中有着广泛的用途，是沿用50年的第四纪传统的醋解法的重大突破，因此具有极为重要的科学与生产价值。
实施例2，与实施例1基本相同，但的冰醋酸与硫酸的质量比为冰醋酸85％，硫酸15％。
实施例3，与实施例1基本相同，但的冰醋酸与硫酸的质量比为冰醋酸75％，硫酸25％。
权利要求
1.一种第四纪沉积物中的孢粉的无乙酸酐的醋解分析方法，具体步骤是，样品前处理孢粉样品用稀盐酸去除碳酸盐岩，用氢氟酸去除掉硅质成分，再用浓盐酸加热处理后，过滤集中；将经过上述处理的样品，离心脱水，再用醋酸洗一次，同样离心脱水去除醋酸；无乙酸酐的醋解法溶液的配制在冰醋酸内按比例加入硫酸，搅拌均匀，冰醋酸与硫酸的质量比是，冰醋酸75～85％，硫酸15～25％；将配制好的醋解法溶液加入完全脱水样品中，搅拌，加热，使纤维素、原生质、腐殖质及一些杂质充分溶解，样品与醋解法溶液的质量比为1∶2～3；将冷却后的样品加水稀释，离心，将酸液倒掉，再加水稀释并离心，反复2～3次，去除酸液；将样品中加少量水，在超声波清洗机中清洗，再倒入10微米筛子里进行过筛；将过筛得到的样品，集中再次离心脱水后制片保存。
2.按照权利要求1所述的第四纪沉积物中的孢粉的无乙酸酐的醋解分析方法，其特征在于，所述的冰醋酸与硫酸的质量比为冰醋酸80％，硫酸20％。
全文摘要
第四纪沉积物中的孢粉的无乙酸酐的醋解分析方法，样品前处理样品用稀盐酸、氢氟酸去除碳酸盐岩和硅质，再用浓盐酸加热，过滤集中；离心脱水；无乙酸酐的醋解法溶液的配制冰醋酸与硫酸的质量比是，冰醋酸75～85％，硫酸15～25％；将醋解法溶液加入样品中，搅拌，加热，样品与醋解法溶液的质量比为1∶2～3；将冷却后的样品加水稀释，离心，将酸液倒掉，再加水稀释并离心，反复2－3次，去除酸液；将样品中加少量水，在超声波清洗机中清洗，再过筛；将过筛得到的样品，集中再次离心脱水后制片保存。优化方案冰醋酸与硫酸的质量比为，80％∶20％。本发明克服了使用危险药品乙酸酐的弊病，方便了实验室的操作和药品的管理。
文档编号G01N1/34GK1825086SQ20061003806
公开日2006年8月30日 申请日期2006年1月26日 优先权日2006年1月26日
发明者何翠玲 申请人:中国科学院南京地质古生物研究所