专利名称：一种用于固肠止泻丸药品的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，涉及一种中药的质量检测方法，特别是一种 用于固肠止泻丸药品的质量检测方法。
背景技术：
肝脾不和，泻痢腹痛，慢性非特异性溃疡性结肠炎是消化道常见的疾病， 以经常性腹泻、腹痛、脓血便、里急后重为主要症状，易反复发作，久治不 愈，如果长期罹患此病，影响全结肠时，有癌变的倾向。据世界卫生组织调査显示，该病的发病率达10.1%，并以每年1.2%的速度上升，肠道健康不 容忽视。而且该病变率在5%-10%，我国的情况更不容乐观，其病变率在10°/。 以上，该病种已是严重影响人们生活质量，威胁人类健康的一大杀手。随着中药事业的发展，中药制剂已经被人们普遍接受，固肠止泻丸(批 准文号国药准字Z61020796)是一种纯中药药物，它是由乌梅肉、黄连、 干姜、木香、罂粟壳、延胡索为原料，按照比例，根据每味中药的不同特性， 经粉碎、制丸、干燥制得。该药物在治疗肝脾不和、泻痢腹痛，慢性非特异 性溃疡性结肠炎症方面，疗效显著，毒副作用小，用药安全，可以长期服用， 其制备方法科学、质量可控、服用方便。但是，在该中药的生产过程中，原有的质量检测方法简单，不能有效地 控制其内在质量，使得各生产厂生产的固肠止泻丸质量差异较大， 一定程度 的影响了产品的性能。发明内容本发明的目的在于，提供一种用于固肠止泻丸药品的质量检测方法，该 方法对制得的固肠止泻丸药品中的有效成分分别进行质量控制，保证了固肠止泻丸药品的质量。为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案 一种用于固肠止泻丸药品的质量检测方法，其特征在于，具体包括下列步骤步骤一，固肠止泻丸的制备-按照处方取黄连，乌梅肉，罂粟壳，干姜，延胡索，木香，粉碎成细 粉，过筛，混匀，用水泛丸，干燥，即得固肠止泻丸。 步骤二，鉴别(1) 取固肠止泻丸药品，研成细粉，置显微镜下观察；纤维束鲜黄色， 壁稍厚，微孔明显；淀粉粒长卵形、广卵形或不规则状，有的较小端略尖凸， 直径25-32 um，长约50Pm;脐点点状，位于较小端；纤维细长，微弯曲， 壁稍厚，非木化；厚壁组织碎片绿黄色，细胞类多角形或略延长，壁稍弯曲， 有的连珠状增厚，微孔细密；菊糖团块不规则，有时可见微细放射状纹理， 加热后溶解。(2) 取固肠止泻丸药品，研细，取粉末10g，加甲醇50ml，超声处理 30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调至PH=9-10， 用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，低温挥干，残渣加甲醇lml 使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶 液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每lm含0.5mg的溶液，作为对照 品溶液；按照《中国药典》2005年版一部附录VIB的薄层色谱法进行试验， 吸取上述三种溶液各2 3ul，分别点于同一 用1%氢氧化钠溶液制备的硅 胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸 中约3min，取出挥去板上吸附的碘后置UV (365nm波段紫光)下检视。 供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同 颜色的荧光斑点。(3) 取固肠止泻丸药品研细后的粉末3g，加乙醚15ml，置水浴上加热 回流30分钟，滤过，滤液低温挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供 试品溶液；另取木香对照药材0.3g，同法制成对照药材溶液。按照《中国药 典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法进行试验，吸取上述二种溶液各2 lU 3ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已垸-三氯甲垸(1:5)为展 开剂，取出，晾干，喷以1%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰展开。 供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(4) 取固肠止泻丸药品研细后的粉末15g，加甲醇50ml，加热回流l 小时，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加1%盐酸30ml使溶解，静置、滤过， 滤液加浓氨试液调节pH: 9-10，用三氯甲烷提取两次，每次20ml，合并提 取液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取罂粟壳对照药 材2g，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；再取吗啡对照品、磷酸可待 因对照品和盐酸罂粟碱对照品，加甲醇分别制成每lml各含lmg的溶液， 做为对照品溶液，按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法进 行试验，吸取上述五种溶液各5"1，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备 的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(20:20:3:1)为展开剂，展 开，取出，晾干，依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠试液，日光下检视。供 试品溶液色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点。(5) 取固肠止泻丸药品研细后的粉末10g，加乙醇50ml，超声处理20 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取干 姜对照药材2g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液，按照《中国药典》 2005年版一部附录VIB薄层色谱法进行试验，吸取上述二种溶液各5lU， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以环已烷-乙 醚(1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%香草醛试液，105。C加热至斑点显色清晰，供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相 同颜色的斑点。(6)取固肠止泻丸药品研细后的粉末0g，加甲醇50ml，超声处理30 分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，移至分液漏斗中， 加乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣用石油醚在30 'C一60'C温度下浸泡两次，每次15ml，浸泡2分钟，倾去石油醚，残渣加 无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取乌梅对照药材2g，加甲醇30 ml， 同法制成对照药材溶液；再取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每lm含0.2mg 的溶液，作为对照品溶液；按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层 色谱法进行试验，吸取上述三种溶液各2"1，分别点于同一硅胶G薄层板 上，以环已烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(20:5:8:0.1)为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中， 在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。步骤三，固肠止泻丸药品检查，应符合《中国药典》2005年版一部附录 I A丸剂项下有关规定。步骤四，含量测定按照中国药典2000年版一部附录VI D高效液相色 谱法测定，包括以下各项试验色谱条件及系统适应性试验用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂； 0.05mol/L三乙胺(用磷酸调pH3.0)-乙腈(70: 30)为流动相；检测波长 为265nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5500;对照品溶液的制备精密称取105'C干燥4小时的盐酸小檗碱对照品适 量，加流动相制成每lml含15ug的溶液，摇匀，既得；供试品溶液的制备精密称取过3号筛的固肠止泻丸药品粉末0.1g，置 50ml量瓶中，加入流动相40ml，超声处理40分钟，取出，放凉，加流动 相至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液；取续滤液，以0.45 U m的微孔滤膜滤过，取续滤液既得；测定法分别精密吸取上述两种溶液各IOUI，注入液相色谱仪，测定， 测得固肠止泻丸药品每g含黄连以盐酸小檗碱C2QHI8C1N04计，不少于 5mg，即可满足要求。本发明对制得的固肠止泻丸药品分别对其中的乌梅肉、干姜、木香、延 胡索、罂粟壳有效成分进行薄层色谱鉴别，黄连进行盐酸小檗碱含量测定检 查，能够保证产品的质量，使得其中的有效成分充分发挥中药毒副作用小的 优势，可长期服用，且疗效显著。
具体实施方式
一种用于固肠止泻丸药品的质量检测方法，其特征在于，具体包括下列 步骤步骤一，固肠止泻丸的制备按照处方取黄连182g，乌梅肉228g，罂粟壳136g，干姜182g，延胡索 136g，木香136g，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水泛丸，干燥，即得固肠 止泻丸，制得的固肠止泻丸为黄褐色的水丸；味苦、微辣。步骤二，鉴别(1) 取固肠止泻丸药品，研成细粉，置显微镜下观察；纤维束鲜黄色， 壁稍厚，微孔明显；淀粉粒长卵形、广卵形或不规则状，有的较小端略尖凸， 直径25-32"m，长约50um;脐点点状，位于较小端；纤维细长，微弯曲， 壁稍厚，非木化；厚壁组织碎片绿黄色，细胞类多角形或略延长，壁稍弯曲， 有的连珠状增厚，微孔细密；菊糖团块不规则，有时可见微细放射状纹理， 加热后溶解。(2) 取固肠止泻丸药品，研细，取粉末10g，加甲醇50ml，超声处理 30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调至PH=9-10， 用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，低温挥干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶 液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每lm含0.5mg的溶液，作为对照 品溶液；按照《中国药典》2005年版一部附录VJB的薄层色谱法进行试验， 吸取上述三种溶液各2~3ul，分别点于同一 用1°/。氢氧化钠溶液制备的硅 胶G薄层板上，以甲苯丙酮=9:2为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸 中约3min，取出挥去板上吸附的碘后置UV (365nm波段紫光)下检视。 供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同 颜色的荧光斑点。(3) 取固肠止泻丸药品研细后的粉末3g，加乙醚15ml，置水浴上加 热回流30分钟，滤过，滤液低温挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为 供试品溶液；另取木香对照药材0.3g，同法制成对照药材溶液。按照《中国 药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法进行试验，吸取上述二种溶液各2 iU 3ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷三氯甲垸=1:5为展 开剂，取出，晾干，喷以1%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰展开。 供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(4) 取固肠止泻丸药品研细后的粉末15g，加甲醇50ml，加热回流l 小时，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加1%盐酸30ml使溶解，静置、滤过， 滤液加浓氨试液调节pH: 9-10，用三氯甲烷提取两次，每次20ml，合并提 取液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取罂粟壳对照药 材2g，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；再取吗啡对照品、磷酸可待 因对照品和盐酸罂粟碱对照品，加甲醇分别制成每lml各含lmg的溶液， 做为对照品溶液，按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法进 行试验，吸取上述五种溶液各5ul，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备 的硅胶G薄层板上，以甲苯丙酮乙醇浓氨=20:20:3:1为展开剂，展 开，取出，晾干，依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠试液，日光下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点。(5) 取固肠止泻丸药品研细后的粉末10g，加乙醇50 ml，超声处理20 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取干 姜对照药材2g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液，按照《中国药典》 2005年版一部附录VIB薄层色谱法进行试验，吸取上述二种溶液各5tU， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以环已烷 乙醚=1:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%香草醛试液，105。C加热至、斑点显色清晰，供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相 同颜色的斑点。(6) 取固肠止泻丸药品研细后的粉末10g，加甲醇50 ml，超声处理30 分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，移至分液漏斗中， 加乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣用石油醚在30 'C一6(TC温度下浸泡两次，每次15ml，浸泡2分钟，倾去石油醚，残渣加 无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取乌梅对照药材2g，加甲醇30 ml， 同法制成对照药材溶液;再取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每lm含0.2mg 的溶液，作为对照品溶液；按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层 色谱法进行试验，吸取上述三种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板 上，以环已烷三氯甲垸乙酸乙酯甲酸=20:5:8:0.1为展开剂，展开， 取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品溶液色 谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。步骤三，固肠止泻丸药品检査，应符合《中国药典》2005年版一部附录 IA丸剂项下有关规定。步骤四，含量测定按照中国药典2000年版一部附录VI D高效液相色 谱法测定，包括以下各项试验色谱条件及系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
0.05mol/L三乙胺(用磷酸调pH3.0):乙腈=70: 30为流动相；检测波长为 265nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5500;
对照品溶液的制备精密称取105'C干燥4小时的盐酸小檗碱对照品适 量，加流动相制成每lml含15ug的溶液，摇匀，既得；
供试品溶液的制备精密称取过3号筛的固肠止泻丸药品粉末0.1g，置 50ml量瓶中，加入流动相40ml，超声处理40分钟，取出，放凉，加流动 相至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液；取续滤液，以0.45 n m的微孔滤膜滤 过，取续滤液既得；
测定法分别精密吸取上述两种溶液各10lU，注入液相色谱仪，测定， 测得固肠止泻丸药品每lg含黄连以盐酸小檗碱C2QH18C1N04计，不少于 5mg，即可满足要求。
按照本发明的质量检测方法制得的固肠止泻丸药品，保证了产品的质 量，包装上注明以下信息-:调和肝脾，涩肠止痛。用于肝脾不和，泻痢腹痛，慢性 非特异性溃疡性结肠炎见上述症候者。:口服， 一次5g， 一日3次。:每12粒重lg。:忌食生冷、辛辣、油腻等刺激性食物。 [贮藏]:密封，防潮。
权利要求
1.一种用于固肠止泻丸药品的质量检测方法，其特征在于，具体包括下列步骤步骤一，固肠止泻丸的制备按照处方量取黄连，乌梅肉，罂粟壳，干姜，延胡索，木香，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水泛丸，干燥，即得固肠止泻丸；步骤二，鉴别(1)取固肠止泻丸药品，研成细粉，置显微镜下观察；纤维束鲜黄色，壁稍厚，微孔明显；淀粉粒长卵形、广卵形或不规则状，有的较小端略尖凸，直径25-32μm，长约50μm；脐点点状，位于较小端；纤维细长，微弯曲，壁稍厚，非木化；厚壁组织碎片绿黄色，细胞类多角形或略延长，壁稍弯曲，有的连珠状增厚，微孔细密；菊糖团块不规则，有时可见微细放射状纹理，加热后溶解；(2)取固肠止泻丸药品，研细，取粉末10g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调至PH＝9-10，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，低温挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1m含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；按照《中国药典》2005年版一部附录VIB的薄层色谱法进行试验，吸取上述三种溶液各2～3μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯∶丙酮＝9∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中3min，取出挥去板上吸附的碘后置365nm波段紫光下检视；供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取固肠止泻丸药品研细后的粉末3g，加乙醚15ml，置水浴上加热回流30分钟，滤过，滤液低温挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取木香对照药材0.3g，同法制成对照药材溶液；按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法进行试验，吸取上述二种溶液各2μl～3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶三氯甲烷＝1∶5为展开剂，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰展开；供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取固肠止泻丸药品研细后的粉末15g，加甲醇50ml，加热回流1小时，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加1％盐酸30ml使溶解，静置、滤过，滤液加浓氨试液调节pH至9～10，用三氯甲烷提取两次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取罂粟壳对照药材2g，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；再取吗啡对照品、磷酸可待因对照品和盐酸罂粟碱对照品，加甲醇分别制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液，按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法进行试验，吸取上述五种溶液各5μl，分别点于同一用2％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯∶丙酮∶乙醇∶浓氨＝20∶20∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干，依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠试液，日光下检视；供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)取固肠止泻丸药品研细后的粉末10g，加乙醇50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取干姜对照药材2g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液，按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法进行试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙醚＝1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷1％香草醛试液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(6)取固肠止泻丸药品研细后的粉末10g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，移至分液漏斗中，加乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣用石油醚在30℃～60℃温度下浸泡两次，每次15ml，浸泡2分钟，倾去石油醚，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取乌梅对照药材2g，加甲醇30ml，同法制成对照药材溶液；再取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每1m含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法进行试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝20∶5∶8∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品溶液色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；步骤三，固肠止泻丸药品检查，应符合《中国药典》2005年版一部附录IA丸剂项下有关规定；步骤四，含量测定按照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定，包括以下各项试验色谱条件及系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.05mol/L三乙胺，用pH3.0的磷酸调∶乙腈＝70∶30为流动相；检测波长为265nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算，不低于5500；对照品溶液的制备精密称取105℃干燥4小时的盐酸小檗碱对照品适量，加流动相制成每1ml含15μg的溶液，摇匀，既得；供试品溶液的制备精密称取过3号筛的固肠止泻丸药品粉末0.1g，置50ml量瓶中，加入流动相40ml，超声处理40分钟，取出，放凉，加流动相至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液；取续滤液，以0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液即得；测定法分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，测得固肠止泻丸药品每1g含黄连以盐酸小檗碱C20H18ClNO4计，不少于5mg，即可满足要求。
全文摘要
本发明公开了一种用于固肠止泻丸药品的质量检测方法，该方法对制得的固肠止泻丸药品分别对其中的乌梅肉、干姜、木香、延胡索、罂粟壳有效成分进行薄层色谱鉴别，黄连进行盐酸小檗碱含量测定检查，能够保证产品的质量，使得其中的有效成分充分发挥中药毒副作用小的优势，可长期服用，且疗效显著。
文档编号G01N21/84GK101226156SQ200810017338
公开日2008年7月23日 申请日期2008年1月18日 优先权日2008年1月18日
发明者曹林林, 娟 王, 王兴海, 陈亚龙, 陈金文, 韩志武 申请人:陕西中医学院制药厂