快速检测水溶液中无机磷的方法

专利名称：快速检测水溶液中无机磷的方法
技术领域：
本发明涉及无机磷的检测技术，具体属于一种快速检测水溶液中无机磷的方法。
背景技术：
磷是生命体系中合成DNA和RNA、能量的积累和传导以及其它的生物反应最基本的要素，是人体中含量较多的元素之一，仅次于钙。百分之八十和钙结合并存于骨骼和牙齿中，剩余的百分之二十，作为磷酯、核酸、ATP等有机磷的形式存在于细胞内或者作为无机磷存在于细胞外。饮食中的磷被认为是损害患有慢性肾衰竭病人残余肾功能的一个因素。磷还参与各种重要的生物矿化过程，诸如骨骼的形成以及肾结石的起源等病理过程。据报道，尿液中无机磷异常会引起结石病、前列腺疾病、甲状旁腺机能减退或亢进、晚期慢性肾炎、多发性骨髓瘤、佝偻病或软骨病等，如果不及时治愈，甚至引起更大的其它疾病。在人体血清中，典型的磷酸根浓度范围为0.81-2. 26 mmol/L。个体中，反常高的磷酸根浓度被诊断为高磷酸盐过多，表现为急性的或慢性的肾衰竭，同时可能的情况是发生前列腺疾病、甲状旁腺机能减退、晚期慢性肾炎、维他命D摄取过多、多发性骨髓瘤。而血液中低磷酸根含量的个体将遭受血磷酸盐过少引起的多种疾病甲状旁腺机能亢进、肾小管变性病变、佝偻病或软骨病、继发性甲状旁腺增生、长期腹泻或吸收不良、范康尼氏综合症等疾病。因此个体维持一定浓度的无机磷很关键。并且我们可以通过定期监测无机磷的含量，了解生物体的代谢状况及有关病变状态。由此看来在食品、环境、临床上检测无机磷是必不可少的。
目前，关于测定无机磷，有离子色谱法、序列注射固定酶法、使用合成的受体去识别测定无机磷，还有许多比色法等等。需要指出，许多仪器在临床上测量无机磷由于窄的线性范围，需要很大程度的稀释待测样，才能去测量；使用合成的受体，需要大量的合成工作，而且受体的水溶性也会给测量工作带来不便；许多比色法检测无机磷，要么基于磷钼酸进一步还原为杂聚钼蓝，要么基于直接的测定亚钼和亚钒磷钼酸，或者基于磷钼酸和碱性染料的配合物。这些化学方法有严重的缺陷，即钼酸盐还原被轻微的pH变化影响、配合物形成的速率被蛋白的浓度严重影响、需要的pH酸度将导致有机磷的水解，这样都会导致测得的无机磷的浓度偏高。

发明内容
本发明的目的在于提供一种简单、灵敏、快速、直接测定水溶液中无机磷的方法。本发明提供一种简便快速检测水溶液中无机磷的方法，该方法总的构思是基于二价铅Pb2+
4离子、以4- (2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)为显色剂在pH为7. 0的HEPES缓冲溶液中直接定性定量地检测无机磷，其具体检测方法包括以下几种
一种快速检测水溶液中无机磷的方法(光谱法检测)，包括如下步骤
(1) 配制PH=6. 5-7. 5、浓度为1-100 mM的HEPES缓冲溶液，并配制2 mM、的二价铅Pb"溶液、2 mM的PAR乙醇溶液；
(2) 把2 ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为空白，用微量进样器吸取2mM的PAR溶液20 ul，加到上述比色皿中，此时溶液由无色变黄色，在紫外可见分光光度仪上检测，412 nm处有最大吸收；
(3) 在步骤(2)的比色皿中，加入与PAR等当量的Pb"溶液，此时溶液由黄色变紫色，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最大吸收峰由上述的412 nm变为520 nm，加入Pb"溶液体积记为VPb;
(4) 取待测无机磷水溶液，逐渐用微量进样器加到步骤(3)的比色皿中，边加样边在紫外可见分光光度仪上检测，随着无机磷水溶液的加入，最大吸收峰又由520nm逐渐向412nm变回，溶液的颜色也逐渐由紫色变回黄色，当吸收峰在412nm达到最大值时，停止加无机磷水溶液，此时加入无机磷水溶液体积计为Vs机s;
(5) 按[Pb鬥XV Pb /V规碟计算出中无机磷得含量。另一种快速检测溶液中无机磷的方法(试剂盒法)，包括如下步骤；
(1 )、配制pH=7. 0、浓度为10 mM的HEPES缓冲溶液，标记为R1; 2 mM的PAR乙醇溶液，标记为R2; 2 mM的Pb"溶液标记为R,;
(2) 、按照R。 R2、 &体积比为100:1:1，加入比色管中，此时溶液为紫色；
(3) 、取fc体积1/10的待测无机磷水溶液，用进样器加到上述比色管中，摇振20-30s后，与试剂盒标准色阶进行对照，得出待测样中无机磷浓度范围。
试剂盒标准色阶的制定在含有20 uM的PAR、 20 yM的二价铅Pb2+离子、pH=7.0且浓度为10函的HEPES缓冲溶液中，依次向五个比色管中分别加入磷酸根溶液，使磷酸根的浓度分别为O、 5、 10、 15、 20yM，得到试剂盒标准的色阶(见图3)， S卩从左到右的颜色依次为，紫色、紫红色、红黄色、茶色、黄色，代表相应的无机磷浓度0.0、 2.5、 5.0、 7.5、10. 0慮。
再一种快速检测水溶液中无机磷的方法(试纸比色法)，包括如下步骤
(1 )、配制pH=6. 5-7. 5、浓度为1-100福的服PES缓冲溶液，并配制2 mM的二价铅Pb2+溶液、2 mM的PAR乙醇溶液；
(2)将20 u 1的Pb'2+溶液与20 y 1的PAR乙醇溶液加入至2 ral的HEPES缓冲溶液中，搅拌均匀后，此时溶液呈紫色；
(3) 将大块滤纸浸入步骤(2)的紫色溶液中5-10秒，取出在空气中晾干，反复浸润l-3次，晾干后即成无机磷试纸，颜色呈紫色，将此试纸剪成条状备用；
(4) 取步骤(3)条状无机磷试纸浸润于待测无机磷水溶液中2-5秒取出，根据试纸颜色变化与无机磷试纸色阶对比，判定待测样无机磷的含量。
无机磷试纸色阶制定
取步骤(3)条状试纸5条，分别浸润于浓度为O.O、 2.5、 5.0、 7.5、 10. 0 raM的无机磷水溶液中2-5秒，取出，即得到从左到右的颜色依次为紫色、桃红色、土黄色、铜黄色和金黄色，代表无机磷浓度依次为0、 2.5、 5 、 7.5、 10 mM (见图4)。
所述的Pb2+离子溶液是铅离子所有可溶性二价铅盐溶液，如硝酸铅、醋酸铅、氯化铅等配制而成。
所述的HEPES缓冲溶液可以用醋酸一醋酸钠缓冲溶液、Tris-HCl、柠檬酸代替。
所述的无机磷水溶液可以是尿液、血液、乳液(如母乳、牛奶或羊奶)、饮料(如可乐、咖啡、茶)、啤酒或环境水源水样等。
与现有技术相比，本发明具有如下优点和效果1、检测体系成本低，易于广泛推广使用，有利于将无机磷检测成为一项常规检测，改善人民生活、饮食、医疗条件；2、可以在紫外可见分光光度仪上检测；也可以不需要任何仪器通过目视比色检测3可以制备成无机磷试纸直接检测；4、检测对象是未经处理的样品，省去以往繁琐的预处理程序，给临床、食品、环境上的应用带来极大方便；5、尽管检测样中含有许多其它成分，但该发明的检测方法对无机磷显示了很好的选择性，也就是说，其它成份的存在不干扰我们的检测结果；6、检测体系是在生理条件水溶液中进行，避免了使用有机溶剂可能带来的二次污染；显然此发明可以广泛应用到环境、食品、临床上检测无机磷。


图1是在含有20 uMPAR， pH7. 0HEPES(10raM)缓冲溶液中逐渐加入Pb" (0-20 u 1)的紫外可见吸收图2是在含有20 yM PAR和20 uM Pb2+， pH 7.0 HEPES(IO mM)缓冲溶液中逐渐加入磷酸根(0-20 yl)的紫外可见吸收图；图3是本发明试剂盒标准色阶；图4本发明无机磷试纸色阶；
图5在含有20 uM PAR和20 P M Pb2t， pH 7.0 HEPES(IO raM)缓冲溶液中加入各种阴离子的比色可视图。图6在含有20 uM PAR和20 uM Pb2+， pH 7.0 HEPES(IO慮)缓冲溶液中逐渐加入血清(0-18 ul)的紫外可见吸收图7试剂盒法检测血液中无机磷浓度的颜色图；图8试纸比色法检测血液中无机磷颜色图9在含有20 uM PAR和20 ii M Pb2+， pH 7.0服PES(IO mM)缓冲溶液中逐渐加入尿液(0-4 tU)的紫外可见吸收图10试剂盒法检测尿液中无机磷浓度的颜色图；图11试纸比色法检测尿液中无机磷颜色图12是在含有20 nM PAR和20 y M Pb2+， pH 7. 0 HEPES(IO raM)缓冲溶液中逐渐加入可乐(0-20 ul)的紫外可见吸收图13试剂盒法检测可乐中无机磷浓度的颜色图。
具体实施例方式
实施例l:光谱法快速检测水溶液中无机磷的方法
配制pH=7. 0的HEPES (10 mM)缓冲溶液，并配制2X 10—3 M的硝酸铅溶液、2X 10—3M的PAR乙醇溶液和2X10—3 M的磷酸钠溶液；把2 ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为空白，用微量进样器吸取2X1(T M的PAR乙醇溶液20 ul ，加到此比色皿中，此时溶液由无色变黄，在紫外可见分光光度仪上检测，412 nm有最大吸收；在上述的比色皿中，加入2X1(TM的硝酸铅20 yl ，此时溶液由黄色变紫色，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最大吸收峰由上述的412 nm变为520 nm,紫外可见吸收图见图1;取磷酸钠溶液，边加样边在HP8453紫外可见分光光度仪上检测，随着磷酸根的加入，最大吸收峰又由520 nm逐渐向412 nm变回，溶液的颜色也逐渐由紫色变回黄色，当吸收峰在412 nm达到最大，溶液的颜色完全变黄时，此时磷酸根加入量为V无机憐计算:20 H1X2X10—VV无歸nl,计算得出。紫外可见吸收图见图2。
实施例2:溶液比色法(试剂盒法)快速检测水溶液中无机磷的方法
试剂盒制备
配制pH=7, 0的HEPES (10 mM)缓冲溶液，并配制2X l(T M的硝酸铅溶液、2X10—3M的PAR乙醇溶液。取六个比色管，分别加入2 ml的pH=7. 0且浓度为10 mM的HEPES缓冲溶液、2X 10—3M的PAR溶液20ul，此时l-6号比色管溶液呈黄色；向2-6比色管中分别加入2X10—3M的硝酸铅溶液20 yl，此时2-6号比色管溶液颜色由黄色变为紫色；随后依次向2-6比色管中分别加入不同量磷酸根溶液，使得磷酸根的浓度分别为0、 5、 10、 15、 20 nM，得到标准的色阶图，S卩2-6比色管从左到右的颜色依次为，紫色、紫红色、红黄色、茶色、黄色，代表的相应待测样浓度范围为0、 2.5、 5.0、 7.5、 10 mM (见图3)。 未知浓度无机磷含量测定-
配制pH=7. 0的服PES (10 mM)缓冲溶液，并配制2 X l(T3 M硝酸铅溶液、2 X l(T3 M的PAR 乙醇溶液；取比色管，加入2 ml的HEPES缓冲溶液、20 u 1， 2X l(T M的PAR乙醇溶液， 此时溶液由无色变黄，加入2X10—3M的硝酸铅溶液20 ul ，此时溶液由黄色变紫色；在上 述的比色管中，取待测样2 "1，用微量进样器加到此比色管中，摇振后，观察溶液颜色变 化与标准的色阶对照，即可判定得知所测样品中无机磷浓度。
实施例3:试纸比色法快速检测水溶液中无机磷含量的方法
配制pH-7.0的HEPES (10 mM)缓冲水溶液，并配制2X 10—2 M的硝酸铅水溶液、2X10-2 M 的PAR乙醇溶液和浓度为0、 2.5、 5.0、 7.5、 10 mM的无机磷水溶液；将20 y 1的Pb"溶液 与20 " 1的PAR乙醇溶液加入至2 ml的HEPES(10 mM)缓冲溶液中，搅拌均匀后溶液呈紫色， 将大块滤纸浸入该紫红色溶液中30秒，取出在空气中晾干，再反复浸润晾干3次即成可用无 机磷试纸，将此试纸剪成条状待用；
取歩骤条状试纸5条，分别浸润于浓度为O、 2.5、 5.0、 7.5、 10 mM的无机磷水溶液中 5秒，取出，即得到紫色(空白)、桃红色(2.5 mM)、 土黄色(5 mM)、铜黄色(7.5 mM)和金 黄色(10 mM)的无机磷试纸浓度梯度色阶图见图4;
取无机磷试纸浸润于待测样中3秒取出，根据试纸颜色变化与无机磷浓度梯度色阶图对 比，即可判定待测样无机磷的含量
实施例4:其他阴离子不干扰无机磷含量测定
配制pH=7. 0的HEPES (10 mM)缓冲溶液，并配制2 X 10—3 M的硝酸铅溶液、2 X 10—3M的PAR 乙醇溶液和2X1(T3 M的磷酸钠；把2 ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为 空白，用微量进样器吸取2X1(T3 M的PAR溶液20 yl ,加到此比色皿中，此时溶液由无色 变黄，在紫外可见分光光度仪上检测，412 nm有最大吸收；在上述的比色皿中，加入2X10—3 M的硝酸铅溶液20 ul ,此时溶液由黄色变紫色，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最 大吸收峰由上述的412 nm变为520 nm，紫外可见吸收图见图1;上述的比色皿中，依次加入 10倍于无机磷量的醋酸根(AcO—)、硝酸根(N03—)、碳酸根(CO/—)、草酸根COOCCO(H、氟离 子(F-)、氯离子(Cr)、溴离子(BiO、硫酸根离子(SO/—)，在紫外可见分光光度仪上检测，上 述各种离子的加入不影响体系对磷酸根离子的检测，紫外光谱在520 nm最大吸收峰没有变化， 体系颜色亦无改变(图5)。
实施例5:血液中无机磷含量的测定
光谱法测定
8从健康人取血样，在TGL-16B型高速台式离心机上离心得上层淡黄清液放置2小时；配 制pH 7. 0的HEPES (10 niM)缓冲溶液，并配制2X 10—s M的硝酸铅溶液和2 X 10—3 M的PAR乙醇 溶液；把2 ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为空白，用微量进样器吸取 2X10—3 M的PAR溶液20 ul，加到此比色皿中，此时溶液由无色变黄色，在紫外可见分光光 度仪上检测，412ntn有最大吸收；在上述的比色皿中，加入2X l(TM的Pb"溶液20 p 1，此 时溶液由黄色变紫色，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最大吸收峰由上述的412nm变为 520 nm;取上述清亮液，逐渐用微量进样器加到此比色皿中，边加样边在HP8453紫外可见分 光光度仪上检测，随着清亮液的加入，最大吸收峰又由520 nm逐渐向412rmi变回，溶液的 颜色也逐渐由紫变回黄色，当吸收峰在412 nm达到最大，溶液的颜色完全变黄时，此时清 亮液加入量为18yl;计算20 ii 1X2X10—Vl8 u 1,得血液中无机磷含量为2. 22 mraol/L， 紫外可见吸收图见图6。
试剂盒法测定
取血液离心处理所得上层淡黄清液样2 yl，用微量进样器加到此比色管中，摇振后， 观察溶液颜色变化与实施例2中试剂盒标准色阶对照，发现此血样无机磷含量为2. 5 mM左右。 比色图见图7
无机磷试纸比色法测定
取志愿者血样，离心处理后，将实施例3中制备的无机磷试纸浸入到此血样中，发现试 纸颜色由紫色变为红黄色，判定此血样无机磷含量为2. 5 mM左右。比色图见图8 实施例6:尿液中无机磷含量的测定
光谱法测定
配制pH=7. 0的HEPES(10 mM)缓冲溶液，并配制2XKT3 M的硝酸铅溶液、2X10-3 M的 PAR乙醇溶液；把2 ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为空白，用微量进样 器吸取2X10—3 M的PAR溶液50 ul ，加到此比色皿中，此时溶液由无色变黄，在紫外可见 分光光度仪上检测，412nm有最大吸收；在上述的比色皿中，加入2X10—3 M的硝酸铅20 u 1， 此时溶液由黄色变紫色，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最大吸收峰由上述的412nm变 为520 nrn;取尿样，边加样边在HP8453紫外可见分光光度仪上检测，随着尿样的加入，最 大吸收峰又由520 nm逐渐向412 nm变回，溶液的颜色也逐渐由紫色变回黄色，当吸收峰在 412nm达到最大，溶液的颜色完全变黄时，此时尿样加入量为4 计算20 lilX2Xl[T/4 yl，得尿样中无机磷的含量为10X10" M。紫外可见吸收图见图9。 试剂盒法测定
取志愿者尿样2 yl，用微量进样器加到此比色管中，摇振后，观察溶液颜色变化与实施例2中试剂盒标准色阶对照，发现此尿样无机磷含量在7.5-10 mM之间。比色图见图10 无机磷试纸比色法测定
取志愿者尿样，将实施例3中制备的无机磷试纸浸入到此尿样中，发现试纸颜色由紫色 变为铜黄色，判定此尿样无机磷含量在7.5-10 mM之间。比色图见图ll。 实施例7:奶中无机磷含量的测定 光谱法测定
配制pH=7. 0的HEPES(IO mM)缓冲溶液，并配制2X 10—3 M的硝酸铅溶液、2X 10—3 M的 PAR乙醇溶液；把2 ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为空白，用微量进样 器吸取2X10—3 M的PAR溶液50 yl ，加到此比色皿中，此时溶液由无色变黄，在紫外可见 分光光度仪上检测，412nm有最大吸收；在上述的比色皿中，加入2X10—3 M的硝酸铅20 u 1, 此时溶液由黄色变紫色，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最大吸收峰由上述的412nm变 为520咖；取牛奶样，边加样边在HP8453紫外可见分光光度仪上检测，随着牛奶样的加入， 最大吸收峰又由520 nm逐渐向412 nm变回，溶液的颜色也逐渐由紫色变回黄色，当吸收峰 在412 nm达到最大，溶液的颜色完全变黄时，此时牛奶样加入量为4 n 1;计算20 ulX 2X10—V5iU，得牛奶样中无机磷的含量为8X10—3M。紫外可见吸收图如图9。
试剂盒法测定
取牛奶样2ul，用微量进样器加到此比色管中，摇振后，观察溶液颜色变化与实施例2 中试剂盒标准色阶对照，发现此牛奶样无机磷含量在7. 5-10 mM之间。无机磷试纸比色法 测定
取牛奶样，将实施例3中制备的无机磷试纸浸入到此牛奶样中，发现试纸颜色由紫色变 为铜黄色，判定此牛奶样无机磷含量在7.5-10 mM之间。 实施例8:可乐中无机磷含量的测定 光谱法测定
从市场上购买可乐；配制pH=7. 0的HEPES (10 mM)缓冲溶液，并配制2X 10—3 M的硝酸铅 溶液、2X10—、的PAR乙醇溶液；把2ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为 空白，用微量进样器吸取2X10—3M的PAR溶液20nl ，加到此比色皿中，此时溶液由无色变 黄，在紫外可见分光光度仪上检测，412nm有最大吸收；在上述的比色皿中，加入2X10—3的 硝酸铅20 ul，此时溶液由黄色变紫色，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最大吸收峰由 上述的412 nm变为520 nm;取可乐样，边加样边在HP8453紫外可见分光光度仪上检测，随 着可乐样的加入，最大吸收峰又由520 nm逐渐向412 mn变回，溶液的颜色也逐渐由紫色变 回黄色，当吸收峰在412 nm达到最大，溶液的颜色完全变黄色时，此时可口可乐加入量为
107.2 ul;计算20 u 1X2X10—V7.2 ul，得可口可乐中无机磷的含量为5.56X10—3M。紫 外可见吸收图见图12。
试剂盒法测定
取可乐样2wl，用微量进样器加到此比色管中，摇振后，观察溶液颜色变化与实施例2 中试剂盒标准色阶对照，发现此可乐样中无机磷含量在5 mM左右。比色图见图13 无机磷试纸比色法测定
取可乐样，将实施例3中制备的无机磷试纸浸入到此可乐样中，发现试纸颜色由紫色变 为铜黄色，判定此可乐样无机磷含量在5 mM左右。
实施例9:以醋酸一醋酸钠(pH 7.0)为缓冲溶液检测无机磷含量
配制pH7.0的醋酸一醋酸钠缓冲液，用其替代实施例1中的HEPES缓冲溶液，其他溶液 配制及检测步骤与实施例1，实施例2相同，光谱法检测紫外可见吸收光谱与图1、图2相同； 比色法检测过程同实施例2，比色图与图3相同。
实施例10:以醋酸铅配制溶液检测无机磷含量
配制2X10—3 M的醋酸铅溶液，用其替代实施例l中的硝酸铅溶液，其他溶液配制及检测 步骤与实施例l，实施例2、实施例3相同，光谱法检测紫外可见吸收光谱与图1、图2相同； 比色法检测过程同实施例2，比色图与图3相同。
1权利要求
1、一种快速检测水溶液中无机磷的方法，其特征在于，包括如下步骤(1)配制pH＝6. 5-7.5、浓度为1-100mM的HEPES缓冲溶液，并配制2mM、的二价铅Pb2+溶液、2mM的PAR乙醇溶液；(2)把2ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为空白，用微量进样器吸取2mM的PAR溶液20μl，加到上述比色皿中，此时溶液由无色变黄色，在紫外可见分光光度仪上检测，412nm处有最大吸收；(3)在步骤(2)的比色皿中，加入与PAR等当量的Pb2+溶液，此时溶液由黄色变紫色，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最大吸收峰由上述的412nm变为520nm，加入Pb2+溶液体积记为VPb；(4)取待测无机磷水溶液，逐渐用微量进样器加到步骤(3)的比色皿中，边加样边在紫外可见分光光度仪上检测，随着无机磷水溶液的加入，最大吸收峰又由520nm逐渐向412nm变回，溶液的颜色也逐渐由紫色变回黄色，当吸收峰在412nm达到最大值时，停止加无机磷水溶液，此时加入无机磷水溶液体积计为V无机磷；(5)按[Pb2+]×VPb/V无机磷计算出中无机磷得含量。
2、 一种快速检测溶液中无机磷的方法，其特征在于，包括如下步骤(1) 、配制pH:7.0、浓度为10 raM的HEPES缓冲溶液，标记为R1; 2 mM的PAR乙醇溶液， 标记为R2; 2 mM的Pb2+溶液标记为R3;(2) 、按照R,、 R2、 R:;体积比为100:1:1，加入比色管中，此时溶液为紫色；(3) 、取R:,体积1/10的待测无机磷水溶液，用进样器加到上述比色管中，摇振20-30s 后，与标准色阶进行对照，得出待测样中无机磷浓度。所述的标准色阶从左到右的颜色依次为，紫色、紫红色、红黄色、茶色、黄色，代表 相应的无机磷浓度0.0、 2.5、 5.0、 7.5、 10.0 mM。
3、 一种快速检测水溶液中无机磷的方法，其特征在于，包括如下步骤(1 )、配制pH=6. 5-7. 5、浓度为1-100 mM的HEPES缓冲溶液，并配制2 mM的二价铅Pb2+ 溶液、2 mM的PAR乙醇溶液；(2) 将20 u 1的Pb"溶液与20 li 1的PAR乙醇溶液加入至2 ml的HEPES缓冲溶液中， 搅拌均匀后，此时溶液呈紫色；.(3) 将滤纸浸入步骤(2)的紫色溶液中5-10秒，取出在空气中晾干，反复浸润1-3次， 晾干后即成颜色呈紫色的无机磷试纸；(4) 取步骤(3)条状无机磷试纸浸润于待测无机磷水溶液中2-5秒取出，根据试纸颜色变化与无机磷试纸色阶对比，判定待测样无机磷的含量。所述的无机磷试纸色阶从左到右的颜色依次为紫色、桃红色、土黄色、铜黄色和金黄色，代表无机磷浓度依次为0、 2. 5、 5 、 7. 5、 10 mM。
4、 如权利要求l、 2或3所述的一种快速检测水溶液中无机磷的方法，其特征在于，所 述的Pb2+离子溶液是可溶性二价铅盐溶液。
5、 如权利要求l、 2或3所述的一种快速检测水溶液中无机磷的方法，其特征在于，所 述的HEPES缓冲溶液用醋酸一醋酸钠缓冲溶液、Tris-HCl或柠檬酸代替。
6、 如权利要求l、 2或3所述的一种快速检测水溶液中无机磷的方法，其特征在于，所 述的无机磷水溶液是尿液、血液、乳液、饮料、啤酒或环境水源。
全文摘要
本发明提供了一种快速检测水溶液中无机磷的方法，该方法基于二价铅Pb²⁺离子、以4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)为显色剂在pH为7.0的缓冲溶液中直接定性定量地检测无机磷。具体包括光谱法、试剂盒法和试纸法。这些方法可直接用于环境水源、血液、尿液、奶、可乐、啤酒等中的无机磷的测定。该方法检测过程简单，判别直观方便，易于普及推广。该方法测量结果准确，灵敏度高，而且不受其它阴离子的干扰，可以推广应用于临床血样、尿样、环境水源以及食品中无机磷的测定。具有较大的市场开发价值及应用前景。
文档编号G01N21/77GK101477059SQ20091007364
公开日2009年7月8日 申请日期2009年1月9日 优先权日2009年1月9日
发明者孙远强, 阴彩霞, 霍方俊 申请人:山西大学