专利名称：临床化学检验用液体质控血清的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于临床实验室常规化学部分检验项目的液体质控血清。具体涉及乙 二醇和丙二醇的组合在制备液体质控血清中的用途，使用乙二醇和丙二醇的组合来稳定液 体质控血清的方法，使用乙二醇和丙二醇的组合来稳定的液体质控血清，以及制备所述液 体质控血清的方法。
背景技术：
在临床实验室检验特别是化学检验工作中，多年以来为了使不同实验室、不同仪 器、不同方法学的化验结果能在可靠、一致的基础上有可比性，正确地评价实验室间的工作 质量以及实验室内的质量控制，就必须有良好的质控血清。质控血清(即，质量控制血清) 一般分为两类一类有靶值，一类无靶值。在每次的常规检验中加入一份或数份，与患者标 本同时测定，通过所得结果来了解本次检验的情况。质控血清检验的结果如能控制其误差 在一定范围内，就说明该检验没有发生不允许的误差。如果出现超过允许误差范围的异常 结果，提示该检验不合格，应寻找原因，纠正后，重检待测标本。因此质控血清在质控工作中 起重要作用。目前，国内临床生化学室间评价和室内质控中大多使用冻干质控血清，而且大部 分是进口的。由于冻干质控血清在制作和使用过程中，因分装、冻干及复溶时都会产生误 差，而使整个质量质控和质量评价过程产生偏差。而由于液体质控血清避免了分装、冻干和 复溶等操作过程所引起的误差，所以在质量质控和质量评价过程中各项检测指标的变异均 较小。因此，近年来国内外均对液体质控血清替代冻干血清的问题进行了研究。液体质控 血清由于其中加入了特定的成分，使血清的冰点大大降低，即使在-20C下也不会结冰，而 且在此低温下血清中的成分特别是酶类成分比较稳定，从而使得质控血清在制备、保存、使 用过程中不必经历分装、冷冻干燥、复溶等可能引起误差的操作过程，因此液体质控血清有 其独特的优点。液体质控血清通常采用人或动物血清，经反复冻融后抽滤或透析等方法去 掉约1/3的水份，然后再加入约1/3的乙二醇作稳定剂补足水份来制备的(例如，参 见，林增文，等.陕西医学检验.2000，15⑵47-48;滑艳，等.陕西医学检验.2000， 15(3) 42 ；以及 P. Premachandra, et, al. Preparation and Stability of Low-cost LiquidQuality-control Serum Stabilized with Ethanediol. Clin. Chem. 1987,33(6) 851-852)。此外，CN1149772A(中国专利申请号95117435. 5，申请日:1995年11月9日，公 开日1997年5月4日)公开了一种多项液体质量控制猪血清及其制备方法，该血清选用新 鲜猪血为原料，经分离、冰冻、调整成分，加入乙二醇作为稳定剂，据说该发明的产品含有质 控血清所需的多项成分，克服了冻干猪血清分装和复溶时的误差，适用于医学检验的需要。 另有文献(CN1316521A，中国专利申请号=01107739. 5，申请日2001年1月11日，
公开日
2001年10月10日)报道了一种保护临床化学用质量控制血清中酶活性的方法，该方法包 括以动物血清为原料制备所述血清的常规工艺步骤，在制备过程中液体血清冷冻或脱水之前加入海藻糖作为血清酶的稳定剂，按每升液体血清计，海藻糖的加入量为0. 10-0. 25mol, 由此得到的质控血清可作为血清成分例如血清酶的质量控制物，据该发明人说该质控血清 在血清酶检验结果的质量控制中使用效果良好，但是这种以海藻糖为保护剂的液体质控血 清产品并未见实际使用。虽然液体质控血清可以避免冻干质控血清的诸多缺点，但当前市场上液体质控血 清的商品并不多，目前国内市场仅能买到伯乐(BIO-RAD)公司生产的液体质控血清进口 品，该进口品价格昂贵，许多基层实验室难以承受，因而影响了室内质控持续有效的开展。此外，本发明人发现，以乙二醇为保护剂制备的液体质控血清对于某些检测项目 的稳定性并不理想，特别在是用于制备检测ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA 等12项目的液体质控血清中，某些项目的稳定性在期望的有效期内仍存在波动。因此，提 供一种稳定的液体质控血清仍然是本领域技术人员所期盼的。
发明内容
本发明所要解决的问题是提供一种稳定的液体质控血清。本发明人令人惊奇地发 现，使用乙二醇和丙二醇组合作为保护剂来制备液体质控血清，通过一年的观察，包括ALT、 AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA 等 12 项生化常规项目在 _20°C和 2 8°C下存 放，使用，其稳定性能完全可以满足临床要求，并且在某些项目的稳定性方面优于现有的液 体质控血清，本发明基于此发现而得以完成。为此，本发明第一方面提供了乙二醇和丙二醇的组合在制备液体质控血清中的用 途。根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为 约1 1.5 约1 2. 5(v/v，体积/体积，下文如未特别说明，均为ν/ν)。根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为 约 1 1. 8 约 1 2. 2 (ν/ν)。根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为 约 1 2 (ν/ν)。根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约30% 约40% (ν/ν，体积/体积，下文如未特别说明，均为ν/ν)。根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约30% 约38% (ν/ν) 0根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约32% 约36% (ν/ν) 0根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约32% 约35% (ν/ν) 0根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约33% 约35% (ν/ν) 0根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述液体质控血清的被检测项目包 括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、 TCJP TBA。
根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述液体质控血清的被检测项目包 括下列生化常规检测项目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA0根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述液体质控血清是包括，但不限 于，下列生化常规检测项目的至少一种的高值质量控制血清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、 P、K、ΝΑ、TC、禾口 TBA0根据本发明第一方面任一项所述的用途，其中所述液体质控血清的血清原料对于 ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性HBsAg、HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-AbdP RPR。本发明第二方面提供了使用乙二醇和丙二醇的组合来稳定液体质控血清的方法。根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为 约 1 1. 5 约 1 2. 5 (ν/ν)。根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为 约 1 1. 8 约 1 2. 2 (ν/ν)。根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为 约 1 2 (ν/ν)。根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约30% 约40% (ν/ν)。根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约30% 约38% (ν/ν) 0根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约32% 约36% (ν/ν) 0根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约32% 约35% (ν/ν) 0根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约33% 约35% (ν/ν) 0根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的被检测项目包 括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、 TCJP TBA。根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的被检测项目包 括下列生化常规检测项目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA0根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清是包括，但不限 于，下列生化常规检测项目的至少一种的高值质控血清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、 K、NAU TBA。根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的血清原料对于 ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性HBsAg、HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-AbJn RPR。根据本发明第二方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清在制备过程中使 用蔗糖透析脱水。本发明第三方面提供一种液体质控血清，其中包含乙二醇和丙二醇。其中所述的乙二醇和丙二醇可以作为保护剂存在于该液体质控血清中。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述的乙二醇和丙二醇的 用量比为约1 1.5 约1 2. 5(v/v)。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述的乙二醇和丙二醇的 用量比为约1 1.8 约1 2. 2(v/v)。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述的乙二醇和丙二醇的 用量比为约1 2 (ν/ν) 0根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总 量占所述液体质控血清的约30% 约40% (ν/ν)。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总 量占所述液体质控血清的约30% 约38% (ν/ν)。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总 量占所述液体质控血清的约32% 约36% (ν/ν)。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总 量占所述液体质控血清的约32% 约35% (ν/ν)。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的总 量占所述液体质控血清的约33% 约35% (ν/ν)。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述液体质控血清的被检 测项目包括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、 P、K、NAU TBA0根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述液体质控血清的被检 测项目包括下列生化常规检测项目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其中所述液体质控血清是包 括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种的高值质量控制血清ALT、AST、CK、Glu、 BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、禾口 TBA。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其对于ALT指标显示正常并且 对于以下指标呈阴性HBsAg、HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-Ab、和 RPR。根据本发明第三方面任一项所述的液体质控血清，其在制备过程中使用蔗糖透析 脱水。进一步的，本发明第四方面提供制备本发明第三方面任一项所述液体质控血清的 方法，其包括在血清脱水之后加入保护剂的乙二醇和丙二醇的步骤。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为 约 1 1. 5 约 1 2. 5 (ν/ν)。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为 约 1 1. 8 约 1 2. 2 (ν/ν)。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为 约 1 2 (ν/ν)。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的 约 30% 约 40% (ν/ν)。
根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的 约 30% 约 38% (ν/ν)。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的 约 32% 约 36% (ν/ν)。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的 约 32% 约 35% (ν/ν)。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述的血清脱水量为原血清总量的 约 33% 约 35% (ν/ν)。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约30% 约40% (ν/ν)。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约30% 约38% (ν/ν) 0根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约32% 约36% (ν/ν) 0根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约32% 约35% (ν/ν) 0根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述 液体质控血清的约33% 约35% (ν/ν) 0根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的被检测项目包 括，但不限于，下列生化常规检测项目的至少一种ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、 TC、和 TBA。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清的被检测项目包 括下列生化常规检测项目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其中所述液体质控血清是包括，但不限 于，下列生化常规检测项目的至少一种的高值质量控制血清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、 P、K、NA、TC、禾口 TBA。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其对于ALT指标显示正常并且对于以下 指标呈阴性HBsAg、HBsAb、HBeAg, HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其在制备过程中使用蔗糖透析脱水。根据本发明第四方面任一项所述的方法，其包括以下步骤a)取ALT指标显示正常并且以下指标呈阴性的动物(特别是人)的血清HBsAg、 HBsAb、HBeAg, HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR，备用；b)对透析袋按常规方法进行预处理，将血清装入透析袋中，捆紧，记录血清初始体 积(Vo，ml)；c)将蔗糖放入器皿中，然后将装有混合血清的透析袋放在蔗糖中进行脱水；d)待血清脱去约30% 约40% (ν/ν)(例如，约30% 约38%、约32% 约36%、 约32% 约35%、约33% 约35% )的水分时，取出，计算脱水量(Vw，ml)；e)向以上脱水血清中加入与步骤d)所述脱水量(Vw，ml)相当的乙二醇和丙二醇 或其混合物(V印，ml)，混勻，任选加入有效量的防腐剂叠氮化钠，分装，即得。
下面对本发明作进一步的描述。本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文 献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和 短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和 短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表 述的含义为准。本文中使用的术语“丙二醇”是指1，2_丙二醇。根据本发明，其中所述的乙二醇和丙二醇可以是以任意的先后次序加至脱水血清 中的，也可以是以此二者的混合物加至脱水血清中的。本文中使用的术语“约”，例如在修饰乙二醇和丙二醇的用量比为时，例如在短语 “约1 1.5 约1 2. 5(v/v)”中使用的，是指本领域允许的误差范围，例如士 10%，例如 士5%，例如 士2%。本文中使用的术语“质控血清”，具有本领域技术人员公知的含义，该术语有时亦 称为“质量控制血清”。此外，本文中使用的术语“液体质控血清”，具有本领域技术人员公 知的含义，其是相对于“冻干质控血清”，其在制备、保存、使用过程中呈液态，特别是由于其 中加入了保护剂而使其熔点大大降低，在长时间(例如1年)保存条件(例如，"20 0C )下 仍然呈液态，从而避免冷冻干燥、复溶等操作对质控血清的检测稳定性造成影响。本文中使用的短语“乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30% 约 40%",是指所在本发明终产品液体质控血清中，所加入的乙二醇和丙二醇二者量之和占本 发明终产品液体质控血清的体积百分数。本文中使用的术语“保护剂”，例如在指代乙二醇和丙二醇时所使用的，是指使血 清特别是本发明液体质控血清保持稳定的物质，特别是使本发明液体质控血清中的待检测 成分保持稳定的物质，所述的待检测物质包括但不限于ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、 NA、TC、和TBA。该术语“保护剂”有时也可称为“稳定剂”。本发明液体质控血清可以用于检测包括(但不限于)下列生化常规检测项目的至 少一种ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。尤其是可以用于检测包括下列 生化常规检测项目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、禾口 TBA。根据本发明的液体质控血清，其还可以用于例如但不限于下列指标的高值质控血 清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、禾口 TBA。本文中使用的术语“高值质控血清”，是指病理状态下血清中被检测项目的浓度， 例如ALT高值质控血清一般情况下是正常参考范围上限的2 3倍。在本发明中，制备所述液体质控血清的血清原料，该血清原料对于ALT指标显示 为本领域技术人员公知的正常范围(例如在定量时大于40U/L)；并且该血清原料对于以下 指标呈阴性HBsAg、HBsAb、HBeAg, HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR。此外，该血清原 料的其它质量标准也是优选需要控制的，例如该原料血清采自排除了传染病、常见病的健 康人，并且无溶血、无黄疸等，外观清澈透明。本发明的目的是提供临床化学常规检测项目使用的液体质控血清，其检测项目包 括ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA等12项。针对反复冻融血清进行脱水 方法易使血清中酶活性失活的问题，本发明人选用了非渗透性冷冻保护剂-蔗糖脱去收集的正常人血清(也可以是动物例如猪的血清)中约30% 约40% (ν/ν)(例如，约30% 约38 %、约32 % 约36 %、约32 % 约35 %、约33 % 约35 % )的水分，此方法脱水简单、 快速、稳定。此外，本发明人发现采用乙二醇和丙二醇组合用作保护剂可以有效地提供液体 质控血清。乙二醇和丙二醇同属低分子中性物质，是一种渗透性冷冻保护剂，目前国内外尚 未见将这两种保护剂组合使用于液体质控血清。本发明人将乙二醇和丙二醇结合起来补充 脱去的水份，并与乙二醇单独使用以及市售品的稳定性做了对比研究，发现本发明乙二醇 和丙二醇组合使用作保护剂可以获得更好的稳定效果。本发明的研究结果表明，根据本发 明制备的液体质控血清在_20°C下保存稳定性可达至少1年，在2 8°C下保存使用稳定性 至少达2周，在室温存放下能稳定4小时。此外，根据本发明制备的液体质控血清，其中的 某些质控指标优于现有技术制备的或者市售的液体质控血清。在本发明中使用的缩写具有下面
ALT丙氨酸氨基转移酶
AST天门冬氨酸氨基转移酶
CK肌酸激酶
Glu葡萄糖
BUN尿素氮
CR肌酐
CA钙
P无机磷
K钾
NA钠
TC总胆固醇
TBA总胆汁酸
HBsAg乙型肝炎表面抗原
HBsAb乙型肝炎表面抗体
HBeAg乙型肝炎e抗原
HBeAb乙型肝炎e抗体
HBcAb乙型肝炎核心抗体
HCV-Ab丙型肝炎抗体
HIV-Ab艾滋病病毒抗体
RPR梅毒反应素试验
具体实施例方式下面通过具体的实施例和实验例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施 例和实验例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发 明。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽 然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此 作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。实施例1、液体质控血清的制备a)取血清原料1000ml，该血清原料来自健康人志愿者，其ALT指标显示正常(40U/ L 以下)，并且以下指标呈阴性HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR， 这些血清均是用带分离胶的真空采血管取血离心后取得，将这些血清充分混勻，将此混合 血清置-20°C冰箱保存，使用之前将-20°C存放的混合血清置2 8°C冰箱过夜融化后，在室 温中充分混勻，备用；b)对透析袋按常规方法进行预处理，将2 3cm宽的透析袋放入烧杯，用无离子水 浸泡约半小时，然后将烧杯置电磁炉上煮沸10分钟，用无离子水清洗3次，再煮10分钟，再 清洗3次后备用；将血清装入透析袋中，捆紧，记录血清初始体积(Vo，ml)；c)将蔗糖放入搪瓷盘中，然后将装有混合血清的透析袋放在蔗糖中进行脱水；d)待血清原料脱去约34%水分时，取出，将袋中血清倒入量筒，记下体积，计算脱 去的水分量(Vw，ml)；e)向以上脱水血清中加入与步骤d)所述脱水量(Vw，ml)相当的乙二醇和丙二醇 的混合物(其中乙二醇为1/3，1，2_丙二醇为2/3)，混勻，加入0. 的防腐剂叠氮化钠；f)使步骤e)的混合物置室温混勻2小时，置2 8°C冰箱平衡3天，每天混勻数 次；再将该混合物分装成Iml/管，即得本发明的液体质控血清。将由此制得的液体质控血清置-20°C冰箱保存。实施例2、液体质控血清的制备参考实施例1的方法制备本实施例的液体质控血清，但不同的以以下操作过程中 采用以下参数1)步骤d)中血清原料脱去约30%水分；2)步骤e)使用与步骤d)所述脱水量相当的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二 醇丙二醇=1 1.5 (ν/ν)。将由此制得的液体质控血清置-20°C冰箱保存。实施例3、液体质控血清的制备参考实施例1的方法制备本实施例的液体质控血清，但不同的以以下操作过程中 采用以下参数1)步骤d)中血清原料脱去约35%水分；2)步骤e)使用与步骤d)所述脱水量相当的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二 醇丙二醇=1 1.8 (ν/ν)。将由此制得的液体质控血清置-20°C冰箱保存。实施例4、液体质控血清的制备参考实施例1的方法制备本实施例的液体质控血清，但不同的以以下操作过程中 采用以下参数1)步骤d)中血清原料脱去约38%水分；2)步骤e)使用与步骤d)所述脱水量相当的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二 醇丙二醇=1 2. 2 (ν/ν)。将由此制得的液体质控血清置-20°C冰箱保存。
实施例5、液体质控血清的制备参考实施例1的方法制备本实施例的液体质控血清，但不同的以以下操作过程中 采用以下参数1)步骤d)中血清原料脱去约40%水分；2)步骤e)使用与步骤d)所述脱水量相当的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二 醇丙二醇=1 2. 5 (ν/ν)。将由此制得的液体质控血清置-20°C冰箱保存。试验例1、液体质控血清的稳定件考察1、测试样品a)不同保存条件下、不同保存时间的实施例1的液体质控血清b)参照实施例1方法，仅用乙二醇作为保护剂制备的液体质控血清；c)市售品液体质控血清(BIO-RAD)产品，进口品，商品名为Liquichek Unassayed Chemistry Control(Human)JlI^S 10mL，批号为 16390)。2、样品保存条件和取样时间点参见下文各试验结果表。3、测试方法使用OLYMPUS 2700自动生化分析仪测定各测试样品的以下生化项目ALT、AST、 CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA04、测试结果使实施例1制备的液体制控血清分别与乙二醇法和进口的BIO-RAD液体质控血清 稳定性进行了比对试验，结果分别见表1至表5。5、稳定性统计方法采用SPSS 11. 0软件(例如，参见《统计基础和SPSS 11. 0入门与提高》，清华大学 出版社，东方人华等编，2004年11月出版，ISBN7-302-09645-7/TP. 6688)统计，以测定浓度 (Y)相对测定时间(X)进行直线回归分析，当斜率的95%可信区间包括“0”时，认为该分析 物的浓度随时间没有发生变化。说明该质控血清项目是稳定的。斜率为正数，表明分析物 浓度随时间增高，斜率为负数，表明分析物浓度随时间下降。6、结论本发明实施例1的12项检测指标在一年内稳定，乙二醇补充水份的液体质控血清 在一年内alt、BUN、TBA升高，BIO-RAD液体质控血清在一年内Glu、P下降。此外，本发明人还发现，根据以上试验例1的液体质控血清的稳定性考察方法，本 发明其它实施例制备的液体质控血清(包括实施例2至5的样品)的稳定性结果与实施例 1的结果相同或相类。本发明不仅仅局限于以上实施例，本发明也可以根据本发明的精神和范围获得本 发明的其它变型实施方案中，而不会脱离本发明的精神和范围。表1 本发明液体质控血清室温稳定性
1权利要求
1.乙二醇和丙二醇的组合在制备液体质控血清中的用途。
2.根据权利要求1的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1 1.5 约 1 2. 5，优选为约 1 1.8 约 1 2. 2 (ν/ν)，优选为约 1 2 (ν/ν)。
3.根据权利要求1或2的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清 的约30% 约40% (ν/ν)，优选为约30% 约38% (ν/ν)，优选为约32% 约36% (ν/ν), 优选为约32% 约35% (ν/ν)，优选为约33% 约35% (ν/ν)。
4.根据权利要求3的用途，其中所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检 测项目的至少一种ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA，优选的，其中所述液 体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、 ΝΑ、TC、禾口 TBA。
5.根据权利要求3的用途，其中所述液体质控血清是包括下列生化常规检测项目的至 少一种的高值质量控制血清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA。
6.使用乙二醇和丙二醇的组合来稳定液体质控血清的方法。
7.根据权利要求6的方法，其特征在于以下一项或任意多项所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1 1.5 约1 2. 5 (ν/ν)，优选为约1 1.8 约 1 2. 2 (ν/ν)，优选为约 1 2 (ν/ν)；所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30% 约40% (ν/ν)，优选为约 30% 约38% (ν/ν)，优选为约32% 约36% (ν/ν)，优选为约32% 约35% (ν/ν)，优选 为约33% 约35% (ν/ν)；所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目的至少一种ALT、AST、 CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA，优选其中所述液体质控血清的被检测项目包括下 列生化常规检测项目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA ；所述液体质控血清的血清原料对于ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性 HBsAg, HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-AbjP RPR ；禾口 其中所述液体质控血清在制备过程中使用蔗糖透析脱水。
8.一种液体质控血清，其中包含乙二醇和丙二醇。
9.根据权利要求8的液体质控血清，其特征在于以下一项或任意多项所述的乙二醇和丙二醇的用量比为约1 1.5 约1 2. 5 (ν/ν)，优选为约1 1.8 约 1 2. 2 (ν/ν)，优选为约 1 2 (ν/ν)；所述乙二醇和丙二醇的总量占所述液体质控血清的约30% 约40% (ν/ν)，优选为约 30% 约38% (ν/ν)，优选为约32% 约36% (ν/ν)，优选为约32% 约35% (ν/ν)，优选 为约33% 约35% (ν/ν)；所述液体质控血清的被检测项目包括下列生化常规检测项目的至少一种ALT、AST、 CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA，优选其中所述液体质控血清的被检测项目包括下 列生化常规检测项目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA ；所述液体质控血清是包括下列生化常规检测项目的至少一种的高值质量控制血清 ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、禾口 TBA ；所述液体质控血清对于ALT指标显示正常并且对于以下指标呈阴性HBsAg、HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-Ab、和 RPR ；禾口所述液体质控血清在制备过程中使用蔗糖透析脱水。
10.制备权利要求8或9所述液体质控血清的方法，该方法包括在血清脱水之后加入保 护剂的乙二醇和丙二醇的步骤；优选地，该方法包括以下步骤a)取ALT指标显示正常并且以下指标呈阴性的动物(特别是人)的血清HBsAg、 HBsAb、HBeAg, HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR，备用；b)对透析袋按常规方法进行预处理，将血清装入透析袋中，捆紧，记录血清初始体积 (Vo, ml)；c)将蔗糖放入器皿中，然后将装有混合血清的透析袋放在蔗糖中进行脱水；d)待血清脱去约30% 约40%(ν/ν)(例如，约30% 约38%、约32% 约36%、约 32% 约35%、约33% 约35%)的水分时，取出，计算脱水量(Vw，ml)；e)向以上脱水血清中加入与步骤d)所述脱水量(Vw，ml)相当的乙二醇和丙二醇或其 混合物(V印，ml)，混勻，任选加入有效量的防腐剂叠氮化钠，分装，即得。
全文摘要
本发明涉及临床化学检验用液体质控血清。具体地说，本发明涉及乙二醇和丙二醇的组合在制备液体质控血清中的用途，使用乙二醇和丙二醇的组合来稳定液体质控血清的方法，包含作为保护剂的乙二醇和丙二醇的液体质控血清，以及制备所述液体质控血清的方法。根据本发明制备的液体质控血清在-20℃下保存稳定性可达至少1年，在2～8℃下保存使用稳定性至少达2周，在室温存放下能稳定4小时并且某些质控指标优于现有技术制备的或者市售的液体质控血清。
文档编号G01N33/96GK101995476SQ20091016574
公开日2011年3月30日 申请日期2009年8月10日 优先权日2009年8月10日
发明者宋耀虹, 齐志宏 申请人:中国医学科学院北京协和医院