专利名称：一种鱼体受镉污染的检测方法
技术领域：
本发明涉及化学领域，是一种鱼体在水体中对重金属镉的吸收及累积产生的综合 作用结果的评价技术。进一步说就是一种鱼体受镉污染新的评价技术。具体说就是鱼体在 超标水体中或在镉含量处在高限环境中长时间生存，有可能在鱼体内产生有毒有害物质， 针对这种情况发明的一种检测与评价方法。
背景技术：
通过食物链传递到人体的Cd主要来自土壤及水体污染。目前我国河流、湖泊等淡 水流域重金属污染严重，例如长江、湘江、北江等河流，山东南四湖、贵州红枫湖等湖泊，沈 阳张士污染灌区等水域。许多水域Cd含量超过我国渔业水质标准规定的限量值5yg厂1。 由于Cd亦被生物体吸收，且在生物体内不易转化而积累在生物体内，因而水环境中的Cd可 经食物链富集可达相当高的浓度，严重影响了淡水养殖业的可持续发展。污染淡水环境中 养殖的水产品可通过人体膳食摄入对人体产生危害。水产品中Cd的超标现象屡有发生，不 但威胁到人体健康，更成为制约我国水产品出口创汇等经济效益。水体中的Cd可以在各类 鱼体中中富集，且存在一定规律。食品Cd污染是环境保护和公共卫生中的一大问题，对普通人群来说，食物链是Cd 进入体内并在组织器官中积累的主要途径，食物链中的Cd主要来自土壤及水体污染。目前 水体重金属污染时有发生，因此鱼类等水产品中Cd超标现象严重，有必要对鱼体中Cd的超 标风险加以评价，为无公害水产养殖提供理论依据。
发明内容
本发明的目的是提供一种鱼体受镉污染的检测方法，通过检测鱼体中磷脂的总量 和各种磷脂成分的变化量，应用建立的统计模型，检测与评价鱼体受镉污染的情况，对食品 安全起到指示作用。包括如下步骤⑴鱼体样品的采集；⑵鱼体样品的处理；⑶样品的 分析；(4)结果的处理；(5)结果的评价。具体步骤为所述(1)鱼体样品的采集样品采集后应迅速处理，清除内脏，-30 -20°C冷冻保 存；所述⑵鱼体样品的处理称取80_150mg鱼肉样品，加入200-600 μ L甲醇/氯仿 (2 1, ν/ν)，涡旋1 3分钟，放置温度-30 -20°C，离心5 8分钟。重复提取2 3 次，将提取所得上清液合并；在上清液中首先加入氯仿+水=1 1 (ν/ν)，200-300 μ L，从 而形成两相体系；离心后，将磷脂所在的氯仿相与水相分离；氯仿相采用真空离心蒸发浓 缩器(Speed-Vac)干燥，温度设定于45°C，干燥后样品于_30°C保存备用；所述(3)样品的分析取出步骤(2)干燥后的磷脂粗提物，用1 l(v/v)甲醇/ 氯仿复溶；分别取5 μ L磷脂溶液与5 μ L基质溶液混合后，从中取1 μ L滴于样品探头靶心， 待溶剂挥发产生结晶后，将靶送入基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-T0F)离 子源，采用氮激光器，波长200-400nm，延时引出(delayed extraction)和直线型(linear)的工作方式，采集质谱数据；所述(4)结果的处理在磷脂质谱中提取如下27个质核比(m/z)谱峰的峰面积 732、734、740、742、756、758、760、762、764、766、780、782、784、786、796、798、804、806、808、 820、822、824、828、830、832、844、846，其中谱峰数(a)在20-27之间，将每一谱图中的所有 谱峰的峰面积值除以同一谱图中内标物谱峰的面积而获得相对峰面积，将其做为自变量 (Xi)，利用如下的模型，即可计算得到鱼体Cd的含量
权利要求
1.一种鱼体受镉污染的检测方法，其特征在于通过检测鱼体中磷脂的总量和各种磷 脂成分的变化量，应用建立的统计模型，评价鱼体受镉污染的情况，具体包括如下步骤(1) 鱼体样品的采集；⑵鱼体样品的处理；⑶样品的分析；⑷结果的处理；(5)结果的评价。
2.根据权利1所述的检测方法，其特征在于所述(1)鱼体样品的采集样品采集后应迅速处理，清除内脏，"30 -20°C冷冻保存；所述⑵鱼体样品的处理称取80-150mg鱼肉样品，加入200-600 μ L甲醇/氯仿 (2 1，ν/ν)，涡旋1 3分钟，放置温度-30 -20°C，离心5 &ι η。重复提取2 3次， 将提取所得上清液合并；在上清液中首先加入氯仿+水=1 1 (ν/ν)，200-300 μ L，从而形 成两相体系；离心后，将磷脂所在的氯仿相与水相分离；氯仿相采用真空离心蒸发浓缩器 (Speed-Vac)干燥，温度设定于45°C，干燥后样品于_30°C保存备用；所述C3)样品的分析取出步骤( 干燥后的磷脂粗提物，用1 l(v/v)甲醇/氯仿 复溶；分别取5 μ L磷脂溶液与5 μ L基质溶液混合后，从中取1 μ L滴于样品探头靶心，待 溶剂挥发产生结晶后，将靶送入基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-T0F)离子 源，采用氮激光器，波长200-400nm，延时引出(delayed extraction)和直线型(linear)的 工作方式，采集质谱数据；所述(4)结果的处理在磷脂质谱中提取如下27个质核比(m/z)谱峰的峰面积732、 734、740、742、756、758、760、762、764、766、780、782、784、786、796、798、804、806、808、820、 822、824、828、830、832、844、846，其中谱峰数(a)在20-27之间，将每一谱图中的所有谱峰 的峰面积值除以同一谱图中内标物谱峰的面积而获得相对峰面积，将其做为自变量(Xi)， 利用如下的模型，即可计算得到鱼体Cd的含量Y= ^(CixXi) (a 值为 20 27)/=I其中模型公式中的Ci为回归系数，其变化范围为1 士5%，Y值即样本中鱼体镉暴露量 或鱼体中Cd含量的估计值。
3.根据权利2所述的检测方法，其特征在于所述基质溶液为2，5_二羟基苯甲酸 +0. 三氟乙酸的甲醇溶液。
4.根据权利2所述的检测方法，其特征在于所述标的物为1，2_十四酰基磷脂酰胆碱 DMPC0
5.根据权利1所述的检测方法，其特征在于所述(1)鱼体样品的采集为采集两批平 行样。
全文摘要
本发明公开一种鱼体受镉污染的检测方法，通过检测鱼体中磷脂的总量和各种磷脂成分的变化量，应用建立的统计模型，检测与评价鱼体受镉污染的情况，对食品安全起到指示作用。包括如下步骤(1)鱼体样品的采集；(2)鱼体样品的处理；(3)样品的分析；(4)结果的处理；(5)结果的评价。本发明提供了一种关于鱼体受镉污染情况的新的检测与评价方法。
文档编号G01N27/64GK102043012SQ20091018785
公开日2011年5月4日 申请日期2009年10月13日 优先权日2009年10月13日
发明者李国琛, 王世成, 王姗姗, 王颜红 申请人:中国科学院沈阳应用生态研究所