专利名称：一种过氧化物酶电极的制备及其使用方法
技术领域：
本发明一种过氧化物酶电极的制备及其使用方法，属于化学分析、环境监测和环境保护领域范畴，具体来讲涉及一种用于测定水中酚类化合物含量的过氧化物酶电极的制备及其使用方法。
背景技术：
酚类化合物在生活污水、工业废水、天然水及饮用水中普遍存在，对生物体具有一定的毒性，是环境的主要污染物。国内外对水中酚的检测非常重视，严格控制各种水中的酚类化合物的含量。目前环境监测部门测定水中挥发酚的标准方法主要有4-氨基安替比林分光光度法和萃取光度法，已经报道的酚类化合物测定方法有多种，主要是紫外-可见分光光度法、原子吸收法、高效液相色谱法、气相/液相色谱法等，这些测定方法需要对水样进行预处理，消除干扰，操作费时费力；在各种测定方法中，生物酶传感器具有高的选择性和高的灵敏度，并且可以在线分析。因此生物酶传感器法快速检测酚类化合物含量在工业控制、环境保护研究中有着广泛的应用前景。过氧化物酶是一种由单一肽链与卟啉构成的血红色蛋白，可以作为以H2O2为电子受体氧化酚类化合物反应的生物催化剂，由于酶作为催化剂具有高效性和专一性等特点， 可以制备一种良好的酶电极，由于酶电极容易受各条件的影响寿命短，稳定性较差，为了提高酶的利用率，目前大多采用电化学聚合导电高聚物膜的方法固定生物酶技术，这种固定化技术不仅具有重复性好、便于控制和微加工等特点，薄膜具有优良的生物相容性，过氧化物酶固定在电极上应用于测定H2A和有机氢过氧化物的分析，也可以用来鉴定葡萄糖、乙醇、谷氨酸和维生素等物质；报道有以固定在玻碳电极上的多壁纳米碳管为基底吸附辣根过氧化物酶；也有利用壳聚糖作为载体固定，再固定纳米金粉，进行过氧化氢生物传感器的研究；其实也可以用于酚类化合物的分析，目前报道的有将辣根过氧化物酶包埋于二氧化硅多孔材料薄膜中构建酶传感器，但该法需要联合紫外-可见分光光度计法用于苯酚类化合物的测定。尽管制备的酶电极提高酶的利用率，但需要进一步提高酶的活力和稳定性，可以直接利用制备的电极进行测定酚类化合物。
发明内容
本发明一种过氧化物酶电极的制备及其使用方法，目的在于为了克服上述现有技术中存在的问题，我们研究发现干红辣椒中富含过氧化物酶，纤维素是最丰富的天然高分子有机物是固定化酶的良好载体，循环伏安法扫描技术能在很短的时间内观察到一个相对较宽的电位范围内电极的变化，通过电流-电势(CV)曲线形状可以判断电极的稳定性， 根据同一扫描速度下不同底物浓度的CV曲线中峰电流大小直接判断底物浓度变化，所以本发明为提高酶的活力和电极的稳定性，提供一种以干红辣椒为原料提取辣椒过氧化物酶，以钼片为基体，碳粉纳米管为电子载体，N, N-二甲基甲酰胺作为分散剂，微晶纤维素作为包埋辣椒过氧化物酶的网格载体，加入效应物D-山梨醇，制备一种用于检测水样中的酚类化合物含量的辣椒过氧化物酶的固定化电极的方法。本发明一种过氧化物酶电极的制备方法，其特征在于是一种以干红辣椒为原料提取辣椒过氧化物酶，碳粉纳米管为电子载体，微晶纤维素作为固定化网格载体，加入效应物 D-山梨醇制成一种用于检测水样中的酚类化合物的含量的辣椒过氧化物酶固定化电极的方法，其具体制备方法步骤为I、辣椒过氧化物酶的制备以市场销售的干红辣椒为原料经粉碎过80 100目，称取粉碎过80 100目的20 50g干红辣椒粉，加入200 500mL的蒸馏水于0°C下超声波超声20 40min，抽滤，离心后得粗提液，先用饱和度为0. 4的硫酸铵溶液对提取的粗提液进行透析，离心后得上清液，再用饱和度为0. 8硫酸铵溶液对上清液进行透析，离心后的沉淀，将所得沉淀加入 1 2倍体积-14 _16°C丙酮分级分离进行透析，透析后的溶液利用截留分子量为5000 10000的超滤膜过滤得到辣椒过氧化物酶，在4 6°C保存。II、过氧化物酶电极的制备将0. 5 1. 5cm2大小钼片进行预处理在ImoL/LNaOH溶液中浸泡0. 5 lh，然后取出用棉球蘸取蒸馏水擦洗表面，在ImoL/L H2SO4溶液中，在-0. 675 1. 675V的电极电位范围内以40 60mV/s的扫描速度，循环40 50次后，取出再用水冲洗干净晾干待用，取 5 IOmL N，N- 二甲基甲酰胺为溶剂加入20 40mg微晶纤维素和20 40mg碳粉纳米管超声10 20min混合均勻，取预处理过的钼片，以其对角线为分界线，均勻涂抹一层微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜，自然干燥40 50h备用，将上述制备的50 150 μ L的辣椒过氧化物酶和10 50 μ L D-山梨醇均勻地滴在干燥的微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜表面，使其缓慢地完全渗入，后置于4 6°C冰箱中20 24h凉干，得到本发明的辣椒过氧化物酶电极，用蒸馏水反复冲洗数次备用。上述一种过氧化物酶电极的使用方法，其特征在于使用时取上述方法所制备的辣椒过氧化物酶电极作为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，钼电极为对电极构成三电极体系，以TriS-HCl缓冲溶液调节酚类化合物的溶液PH为5 8. 0，加入0. 5 1 % (ν/ν) 双氧水，采用I^rinceton VMP3电化学系统进行CV曲线测定，扫描速度为50 100mV/S，电极电位在-0. 2 0. 6V范围内扫描40 60圈，CV曲线随着扫描次数的增加，峰电流几乎不变，表明该电极的稳定性较好，将该电极在4 6°C冰箱中放置5 7d，放置期间间歇性使用，其响应信号的变化量没有超过初始信号的3 5%，说明该辣椒过氧化物酶电极具有良好的稳定性，测量同一扫描速度下不同酚类化合物浓度的CV曲线，获得峰电流大小与酚类化合物浓度的关系，用于直接分析待测水溶液中酚类化合物浓度。本发明一种过氧化物酶电极的制备及其使用方法，优点在于利用易得的富含过氧化物酶的干红辣椒为原料提取过氧化物酶，利用有较强的成膜能力、高渗透性、机械强度高、无毒性、生物相容性大的微晶纤维素和碳粉纳米管为载体，加入效应物D-山梨醇能将酶的活力提高3 4倍且阳极峰电流增大0. 1 0. 3mA,由于酶催化的专一性、高效性和条件温和等特点，所以本发明制备的电极具有抗干扰、使用寿命长、活力高，稳定性强的优点， 测量同一扫描速度下不同酚类化合物浓度的CV曲线，获得阳极峰电流大小与苯酚类化合物浓度的关系，优点是可直接测定水溶液中酚类化合物浓度，该法具有快速、准确、重复性好等优点。
图1是本发明辣椒抗氧化物酶提取工艺流程图。图2是本发明制备的辣椒过氧化物酶电极示意图。图中c表示电极的涂抹区图3是本发明微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜固定辣椒过氧化物酶示意图。图中·表示碳粉纳米管〇表示辣椒过氧化物酶图4是本发明制备的电极在显微镜下(160X)形态比较图。图中_:碳粉纳米管微晶纤维素·:辣椒过氧化物酶图5是本发明制备的电极与裸电极的循环伏安图。图中a 是本发明电极的循环伏安曲线b 是裸电极的循环伏安曲线图6是本发明制备的电极与无效应物电极循环伏安图。图中a 是无效应物电极的循环伏安曲线b 是本发明电极循环伏安曲线图7是本发明苯酚浓度与阳极峰电流的标准曲线图。
具体实施例方式实施方式1以市售干红辣椒为原料经粉碎过80目，称取20. Og辣椒粉，加入200mL的蒸馏的水于低温下(0°c )超声波处理20min抽滤，以4000r/min速度离心15min，得上清液。对上述提取的上清液在0°C不断搅拌下慢慢加入饱和度为0. 4硫酸铵(每IOOOmL滤液中加入226. Og硫酸铵)，置冰箱中Mh。将上清液吸出，对下面的混浊液以3000r/min的离心速度离心15min，弃去沉淀合并上清液。在上清液中边加0°C时饱和度为0.8硫酸铵(每 IOOOmL上清液加入258g硫酸铵)边搅拌直至全部溶解，置冰箱中Mh。吸取上清液，将沉淀于13000r/min离心速度下离心20min后，弃去上清液，收集沉淀；然后将沉淀悬浮于 50mL蒸馏水中，分装于透析袋，置于流动自来水下进行透析Mh以除去硫酸铵。为避免水中氯离子对提取的过氧化酶产生干扰，需用蒸馏水继续透析Mh，期间更换2次蒸馏水，直至用0. lmol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止，合并透析液。对合并后的透析液以4000r/min离心速度离心15min，弃去沉淀，计量上清液体积。将上述提取的最终上清液倒入烧杯置于冰盐浴中，在不断搅拌下加入预冷至_14°C体积的3倍的丙酮，以4000r/min 离心速度离心15min，弃去沉淀；再在上清液中加入_14°C丙酮，其量为原上清液体积的0. 8 倍后继续离心收集沉淀；蒸馏水溶解装于透析袋中透析以除去丙酮，5000 10000的超滤膜超滤后将提取物置冰箱4°C保存，测得辣椒过氧化物酶浓度为8. 32g/L，活力为16. 77u/ go为了使提取物辣椒过氧化物酶有效发挥活力，使用时需要加入效应物D-山梨醇可以提高酶活力3倍。将0. 5cm2大小钼片在ImoL/L NaOH溶液中浸泡0.证，然后取出用棉球蘸取蒸馏水擦洗表面，在ImoL/L 溶液中，在-0. 675 1.675V的电极电位范围内以40mV/ s的扫描速度，循环40次后，取出再用水冲洗干净晾干待用，取5mLN，N- 二甲基甲酰胺为溶剂加入20mg微晶纤维素和20mg碳粉纳米管超声IOmin混合均勻，取预处理过的钼片，以其对角线为分界线，均勻涂抹一层微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜，自然干燥40h备用，将上述制备的50 μ L的辣椒过氧化物酶和10 μ L D-山梨醇均勻地滴在干燥的微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜表面，使其缓慢地完全渗入，后置于4°C冰箱中20h凉干，得到本发明的辣椒过氧化物酶电极，用蒸馏水反复冲洗数次备用。微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜固定辣椒过氧化物酶示意图如图3所示。显微镜(160x)观察电极形态如图4(a，b)所示，图a是裸电极形态，图b是本发明的电极，从图a与图b对比中看到，辣椒过氧化物酶能较好的固载于电极表面，从而保证酶电极的正常使用。本发明制备的电极为工作电极，以钼电极为对电极， 甘汞电极为参比电极，采用I^rincetonVMPS电化学系统进行测定。取含有苯酚类化合物的溶液，以Tris-HCl缓冲溶液调节pH值为5. 0，加入体积比为0. 5%的双氧水，在室温下可以在辣椒过氧化物酶催下发生氧化还原反应，取苯酚，用Tris-HCl缓冲液调节pH到7. 0，按体积比加入0. 5% H2O2，以扫描速度为50mV/s，电极电位在一0. 2 0. 6V范围内扫描，同时与裸电极进行对照，循环伏安图如图5所示。图5中出现了一对氧化还原峰，阴极峰电势和阳极峰电势在-0. 025V和0. 2V左右，这是辣椒过氧化物酶氧化还原中心产生的氧化还原特征峰。对上述电极均循环40圈，随着扫描次数的增加，峰电流几乎不变，表明该电极的稳定性较好。将该电极在4°C冰箱中放置5d，放置期间间歇性使用，其响应信号的变化量没有超过初始信号的3%，说明本发明电极具有较好的稳定性。为了证实加入效应物D-山梨醇的电极的效果，有效应物与本发明电极循环伏安曲线进行比较，结果如图6所示其中a为无效应物电极，b为本发明电极。从图6可以看出加入效应物D-山梨醇后电极出峰情况都比不加效应物时好，阳极峰电流增大了 0. 3mA。采用本发明电极体系，改变苯酚的浓度，以 Tris-HCl缓冲液调节pH为7. 0，按比例加入0. 5% (v/v)H2O2，扫描速度为50mV/s，电极电位在-0. 2 0. 6V范围内扫描，CV曲线中的阳极峰电流与苯酚的浓度关系如图7所示。从图 7中可以看出在浓度为2mmol/L内呈线性关系，通过拟合阳极峰电流值I (mA)与苯酚浓度 C(mmol/L)符合关系式I (mA) = 0. 101369+0. 01505C, r2 = 0. 985 检测限为 22mmol/L。取处理后排放的污水25mL，Tris-HCl缓冲液调节pH为5，4°C下保存5天，按比例加入0. 5% (ν/ν)双氧水，利用本发明电极体系进行测定。在扫描速度为50mV/s，电极电位在-0. 2 0. 6V范围内，进行三次平行扫描测定CV曲线，读取阳极峰电流值，通过阳极峰电流值与苯酚浓度的拟合关系式计算出排放污水中苯酚类化合物的浓度。实施方式2.以市场销售的干红辣椒为原料经粉碎过85目，称取粉碎过85目的25g干红辣椒粉，加入250mL的蒸馏水于0°C下超声波超声30min，抽滤，离心后得粗提液，先用饱和度为 0. 4的硫酸铵溶液对提取的粗提液进行透析，离心后得上清液，再用饱和度为0. 8硫酸铵溶液对上清液进行透析，离心后的沉淀，将所得沉淀加入1倍体积的_15°C丙酮分级分离进行透析，透析后的溶液利用截留分子量为5000 10000的超滤膜过滤，4°C下得到的辣椒过氧化物酶；测得辣椒过氧化物酶浓度为8. 56g/L，活力为15. 53u/g。将1. Ocm2大小钼片在 ImoL/LNaOH溶液中浸泡0. 5h,然后取出用棉球蘸取蒸馏水擦洗表面，在ImoL/L H2SO4溶液中，在-0. 675 1. 675V的电极电位范围内以40mv/s的扫描速度，循环40次后，取出再用水冲洗干净晾干待用，取5mLN，N-二甲基甲酰胺为溶剂加入20mg微晶纤维素和20mg碳粉纳米管超声IOmin混合均勻，取预处理过的钼片，以其对角线为分界线，均勻涂抹一层微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜，自然干燥40h备用，将上述制备的50 μ L的辣椒过氧化物酶和 10 μ L D-山梨醇均勻地滴在干燥的微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜表面，使其缓慢地完全渗入，后置于4°C冰箱中20h凉干，得到本发明的辣椒过氧化物酶电极，用蒸馏水反复冲洗数次备用。采集污水厂1处理后排放的污水25mL，Tris-HCl缓冲液调节pH为5. 0于4°C下保存5天，测定时加入体积比为0. 5%的双氧水，利用本发明电极体系进行测定。在扫描速度为50mV/s，电极电位在-0. 2 0. 6V范围内，进行三次平行扫描测定CV曲线，读取阳极峰电流值，通过阳极峰电流值与苯酚浓度的拟合关系式计算出污水厂1排放的污水中酚类化合物含量为15. 4士0. 23mmol/L。其它同实施方式1。实施方式3.以市场销售的干红辣椒为原料经粉碎过100目，称取粉碎过100目的50g干红辣椒粉，加入500mL的蒸馏水于0°C下超声波超声40min，抽滤，离心后得粗提液，先用饱和度为0. 4的硫酸铵溶液对提取的粗提液进行透析，离心后得上清液，再用饱和度为0. 8硫酸铵溶液对上清液进行透析，离心后的沉淀，将所得沉淀加入2倍体积_16°C丙酮分级分离进行透析，透析后的溶液利用截留分子量为10000的超滤膜过滤，6°C下得到的辣椒过氧化物酶，测得浓度为10. 25g/L，活力为23. 3u/g。将1. 5cm2大小钼片在ImoL/LNaOH溶液中浸泡Ih，然后取出用棉球蘸取蒸馏水擦洗表面，在ImoL/L 溶液中，在-0. 675 1. 675V 的电极电位范围内以60mV/s的扫描速度，循环50次后，取出再用水冲洗干净晾干待用，取 IOmLN, N- 二甲基甲酰胺为溶剂加入40mg微晶纤维素和40mg碳粉纳米管超声20min混合均勻，取预处理过的钼片，以其对角线为分界线，均勻涂抹一层微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜，自然干燥50h备用，将上述制备的150 μ L的辣椒过氧化物酶和50 μ L D-山梨醇均勻地滴在干燥的微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜表面，使其缓慢地完全渗入，后置于6°C冰箱中 24h凉干，得到本发明的辣椒过氧化物酶电极，用蒸馏水反复冲洗数次备用。采集污水厂2 排放的污水25mL，Tris-HCl缓冲液调节pH为8. 0，6°C下保存5天，加入体积比为1. 0%双氧水，利用本发明电极体系进行测定。在扫描速度为100mV/S，电极电位在-0. 2 0. 6V范围内，进行三次平行扫描测定CV曲线，读取阳极峰电流值，通过阳极峰电流值与苯酚浓度的拟合关系式计算出污水厂2排放的污水中酚类化合物含量为14. 5士0. 12mmol/L。其它同实施方式1。实施方式4.以市场销售的干红辣椒为原料经粉碎过90目，称取粉碎过90目的35g干红辣椒粉，加入350mL的蒸馏水于0°C下超声波超声30min，抽滤，离心后得粗提液，先用饱和度为 0. 4的硫酸铵溶液对提取的粗提液进行透析，离心后得上清液，再用饱和度为0. 8硫酸铵溶液对上清液进行透析，离心后的沉淀，将所得沉淀加入1. 5倍体积_15°C丙酮分级分离进行透析，透析后的溶液利用截留分子量为5000的超滤膜过滤，5°C下得到的辣椒过氧化物酶， 测得其浓度为21. 5g/L，活力为20. 53u/g。将0. 5cm2大小钼片在ImoL/LNaOH溶液中浸泡 0. 1，然后取出用棉球蘸取蒸馏水擦洗表面，在ImoL/L H2SO4溶液中，在-0. 675 1. 675V 的电极电位范围内以50mV/s的扫描速度，循环50次后，取出再用水冲洗干净晾干待用，取 8mLN, N- 二甲基甲酰胺为溶剂加入32mg微晶纤维素和32mg碳粉纳米管超声15min混合均勻，取预处理过的钼片，以其对角线为分界线，均勻涂抹一层微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜，自然干燥4 备用，将上述制备的100 μ L的辣椒过氧化物酶和40 μ LD-山梨醇均勻地滴在干燥的微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜表面，使其缓慢地完全渗入，后置于5°C冰箱中 24h凉干，得到本发明的辣椒过氧化物酶电极，用蒸馏水反复冲洗数次备用。采集污水厂3 排放的污水25mL，Tris-HCl缓冲液调节pH为7. 0，5°C下保存5天，加入体积比为0. 8%的双氧水，利用本发明电极体系进行测定。在扫描速度为60mV/s，电极电位在-0. 2 0. 6V范围内，进行三次平行扫描测定CV曲线，读取阳极峰电流值，通过阳极峰电流值与苯酚浓度的拟合关系式计算出污水厂3排放的污水中酚类化合物含量为16. 8士0. 31mmol/L。其它同实施方式1。实施方式5.以市场销售的干红辣椒为原料经粉碎过95目，称取粉碎过95目的40g干红辣椒粉，加入400mL的蒸馏水于0°C下超声波超声35min，抽滤，离心后得粗提液，先用饱和度为 0. 4的硫酸铵溶液对提取的粗提液进行透析，离心后得上清液，再用饱和度为0. 8硫酸铵溶液对上清液进行透析，离心后的沉淀，将所得沉淀加入1倍体积_16°C丙酮分级分离进行透析，透析后的溶液利用截留分子量为5000 10000的超滤膜过滤，4°C下得到的辣椒过氧化物酶，测得其浓度为30. 23g/L，活力为25. 53u/g。将Icm2大小钼片在ImoL/L NaOH溶液中浸泡lh，然后取出用棉球蘸取蒸馏水擦洗表面，在ImoIVLH2SO4溶液中，在-0. 675 1. 675V 的电压范围内以50mv/s的扫描速度，循环48次后，取出再用水冲洗干净晾干待用，取6mLN， N- 二甲基甲酰胺为溶剂加入微晶纤维素和碳粉纳米管超声15min混合均勻，取预处理过的钼片，以其对角线为分界线，均勻涂抹一层微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜，自然干燥40h备用，将上述制备的100 μ L的辣椒过氧化物酶和30 μ L D-山梨醇均勻地滴在干燥的微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜表面，使其缓慢地完全渗入，后置于4°C冰箱中20h凉干，得到本发明的辣椒过氧化物酶电极，用蒸馏水反复冲洗数次备用。采集污水厂4的污水25mL， Tris-HCl缓冲液调节pH为5. 0，4°C下保存5天，加入体积比为0. 9%双氧水，利用本发明电极体系进行测定。在扫描速度为70mV/s，电极电位在-0. 2 0. 6V范围内，进行三次平行扫描测定CV曲线，读取阳极峰电流值，通过阳极峰电流值与苯酚浓度的拟合关系式计算出污水厂4排放的污水中酚类化合物含量为14. 8士0. 14mmol/L。其它同实施方式1。
权利要求
1. 一种过氧化物酶电极的制备方法，其特征在于是一种以干红辣椒为原料提取辣椒过氧化物酶，钼片为基体，碳粉纳米管为电子载体，微晶纤维素作为固定化网格载体，加入效应物D-山梨醇制成一种用于检测水样中的酚类化合物的含量的辣椒过氧化物酶固定化电极的方法，其具体制备方法步骤为1、辣椒过氧化物酶的制备以市场销售的干红辣椒为原料经粉碎过80 100目，称取粉碎过80 100目的20 50g干红辣椒粉，加入200 500mL的蒸馏水于0°C下超声波超声20 40min，抽滤，离心后得粗提液，先用饱和度为0. 4的硫酸铵溶液对提取的粗提液进行透析，离心后得上清液，再用饱和度为0. 8硫酸铵溶液对上清液进行透析，离心后的沉淀，将所得沉淀加入1 2倍体积-14 _16°C丙酮分级分离进行透析，透析后的溶液利用截留分子量为5000 10000的超滤膜过滤得到辣椒过氧化物酶，在4 6°C保存。II、过氧化物酶电极的制备将0. 5 1. 5cm2大小钼片进行预处理在ImoL/L NaOH溶液中浸泡0. 5 lh，然后取出用棉球蘸取蒸馏水擦洗表面，在ImoL/L 溶液中，在-0. 675 1. 675V的电极电位范围内以40 60mV/s的扫描速度，循环40 50次后，取出再用水冲洗干净晾干待用，取 5 IOmL N，N- 二甲基甲酰胺为溶剂加入20 40mg微晶纤维素和20 40mg碳粉纳米管超声10 20min混合均勻，取预处理过的钼片，以其对角线为分界线，均勻涂抹一层微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜，自然干燥40 50h备用，将上述制备的50 150 μ L的辣椒过氧化物酶和10 50 μ L D-山梨醇均勻地滴在干燥的微晶纤维素-碳粉纳米管薄膜表面，使其缓慢地完全渗入，后置于4 6°C冰箱中20 24h凉干，得到本发明的辣椒过氧化物酶电极，用蒸馏水反复冲洗数次备用。
2.用权利要求1的方法制备的一种过氧化物酶电极的使用方法，其特征在于使用时取上述方法所制备的辣椒过氧化物酶电极作为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，钼电极为对电极构成三电极体系，以Tris-HCl缓冲溶液调节酚类化合物的溶液pH为5. 0 8. 0， 加入0. 5 (ν/ν)双氧水，采用I^rinceton VMP3电化学系统进行CV曲线测定，扫描速度为50 100mV/s，电极电位在-0. 2 0. 6V范围内扫描40 60圈，CV曲线随着扫描次数的增加，峰电流几乎不变，表明该电极的稳定性较好，将该电极在4 6°C冰箱中放置5 7d，放置期间间歇性使用，其响应信号的变化量没有超过初始信号的3 5%，说明该辣椒过氧化物酶电极具有良好的稳定性，测量同一扫描速度下不同酚类化合物浓度的CV曲线， 获得峰电流大小与酚类化合物浓度的关系，用于直接分析待测水溶液中酚类化合物浓度。
全文摘要
一种过氧化物酶电极的制备及其使用方法，属于化学分析、环境监测和环境保护领域范畴，具体来讲涉及一种用于测定水中酚类化合物含量的过氧化物酶电极的制备及其使用方法。其特征在于是一种以干红辣椒为原料提取辣椒过氧化物酶，铂片为基体，碳粉纳米管为电子载体，微晶纤维素作为固定化网格载体，加入效应物D-山梨醇制成一种用于检测水样中的酚类化合物的含量的辣椒过氧化物酶固定化电极的方法，本发明制备的电极具有抗干扰、使用寿命长、活力高，稳定性强的优点，测量同一扫描速度下不同酚类化合物浓度的循环伏安曲线，获得阳极峰电流大小与酚类化合物浓度的关系，优点是可直接测定水溶液中酚类化合物浓度，该法具有快速、准确、重复性好等优点。
文档编号G01N27/327GK102183560SQ20111002005
公开日2011年9月14日 申请日期2011年1月14日 优先权日2011年1月14日
发明者吕永康, 庞国忠, 曹青, 武爱莲, 靳利娥 申请人:太原理工大学