专利名称：基于琼脂糖凝胶的电泳方法
技术领域：
本发明涉及一种电泳方法，尤其涉及一种基于琼脂糖凝胶的电泳方法，属于生物化学实验技术领域。
背景技术：
随着基因组学和DNA组学的不断发展，DNA越来越成为人们日益研究的最多的物质。为了减轻工作量，減少实验操作步骤，降低实验成本，同时又能够有效地清晰地反应实验结果和鉴定DNA，琼脂糖凝胶电泳法就随之应运而生
发明内容
本发明的目的就是为了解决现有技术中存在的上述问题，提供一种基于琼脂糖凝胶的电泳方法。本发明的目的通过以下技术方案来实现基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其特征在于包括以下步骤步骤①，制备琼脂糖溶液并在电泳槽中凝固成胶状物，构成琼脂糖凝胶；步骤②，向琼脂糖凝胶的不同区域加入需要分离的物质；步骤③，插上电源进行电泳；步骤④，通过溴化こ锭进行染色；步骤⑤，通过紫外灯确认凝胶上DNA的分离状況。上述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其中步骤①所述的琼脂糖溶液通过微量移液枪加入到电泳槽中。进ー步地，上述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其中所述的琼脂糖凝胶是由半乳糖和3，6-脱水半乳糖交替组成的胶多糖。更进一歩地，上述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其中所述的琼脂糖凝胶的浓度为05 2%之间。更进一歩地，上述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其中步骤③所述的电泳时电压小于等于20V/cm，温度低于30°C。再进ー步地，上述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其中步骤④中以溴酚蓝跑至凝胶总长度的2/3或者离胶板下侧Icm处为结束点。本发明技术方案的优点主要体现在能够简单而清晰地鉴别出不同分子量的DNA，分离出不同分子量的核酸片段。并且，本方法所需样品少，減少了原料的浪费，特别适于实验室的学生实验。本发明的目的、优点和特点，将通过下面优选实施例的非限制性说明进行解释。这些实施例仅是应用本发明技术方案的典型范例，凡采取等同替换或者等效变换而形成的技术方案，均落在本发明要求保护的范围之内。
具体实施例方式基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其特征在于包括以下步骤步骤①，制备琼脂糖溶液并在电泳槽中凝固成一定形状的胶状物，构成琼脂糖凝胶。具体来说，琼脂糖溶液通过微量移液枪加入到电泳槽中。且，琼脂糖凝胶是由半乳糖和3，6-脱水半乳糖交替组成的胶多糖其浓度为05 2%之间。步骤②，向琼脂糖凝胶的不同区域加入需要分离的物质。步骤③，插上电源进行电泳。具体来说，其电压小于等于20V/cm，温度低于30°C。步骤④，通过溴化こ锭进行染色，以溴酚蓝跑至凝胶总长度的2/3或者离胶板下侧Icm处为结束点。步骤⑤，通过紫外灯确认凝胶上DNA的分离状況。就本发明ー较佳的实施方式来看，首先，将琼脂糖置于锥形瓶中，加入TAE缓冲液，微波炉加热煮沸至琼脂糖全部融化，摇匀，制成琼脂糖凝胶液。接着，取出电泳槽内的制胶槽放入制胶玻璃板，用透明胶带将玻璃板与内槽两端 边缘封好，将封好的内槽置于水平位置，并在固定位置放好梳子，将冷却到65°C左右的琼脂糖凝胶液小心地倒入内槽玻璃板上，直到整个玻璃板表面形成均匀胶层，在室温下静置直至凝胶完全凝固，垂直轻拔梳子，取下胶带，将凝胶及内槽放入电泳槽中，添加TAE电泳缓冲液至没过胶板为止。然后，用微量移液器分别将样品加入胶板的样品小槽内，每加完ー个样品，应更换ー个加样头，以防污染，加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面。之后，将加样后的凝胶板通电进行电泳，当溴酚蓝移动到距离胶板下沿约Icm处时，停止电泳，电泳完毕后，取出凝胶，用含有溴化こ锭TAE溶液染色约20分钟，再用清水漂洗10分钟。最后，观察照相，在紫外灯下观察，DNA存在则显示出红色荧光条带，采用凝胶成像系统拍照保存。结合本发明的实际使用情况来看，通过上述的文字表述可以看出，采用本发明后，能够简单而清晰地鉴别出不同分子量的DNA，分离出不同分子量的核酸片段。并且，本方法所需样品少，減少了原料的浪费，特别适于实验室的学生实验。
权利要求
1.基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其特征在于包括以下步骤 步骤①，制备琼脂糖溶液并在电泳槽中凝固成胶状物，构成琼脂糖凝胶； 步骤②，向琼脂糖凝胶的不同区域加入需要分离的物质； 步骤③，插上电源进行电泳； 步骤④，通过溴化こ锭进行染色； 步骤⑤，通过紫外灯确认凝胶上DNA的分离状況。
2.根据权利要求I所述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其特征在于步骤①所述的琼脂糖溶液通过微量移液枪加入到电泳槽中。
3.根据权利要求I所述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其特征在于所述的琼脂糖凝胶是由半乳糖和3，6-脱水半乳糖交替组成的胶多糖。
4.根据权利要求I所述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其特征在于所述的琼脂糖凝胶的浓度为05 2%之间。
5.根据权利要求I所述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其特征在于步骤③所述的电泳时电压小于等于20V/cm,温度低于30°C。
6.根据权利要求I所述的基于琼脂糖凝胶的电泳方法，其特征在于步骤④中以溴酚蓝跑至凝胶总长度的2/3或者离胶板下侧Icm处为结束点。
全文摘要
本发明涉及一种基于琼脂糖凝胶的电泳方法，特点是首先制备琼脂糖溶液并在电泳槽中凝固成一定形状的胶状物，然后向琼脂糖凝胶的不同区域加入需要分离的物质并插上电源进行电泳，最后通过溴化乙锭的染色，在紫外灯下可以清晰地观察到凝胶上DNA的分离。本发明借助了琼脂糖凝胶的分子筛作用，主要用于分离、鉴定和纯化DNA片段。同时，该方法操作简便，设备简单，需样品量少，分辨能力高，已成为基因工程研究中重要的实验方法之一。
文档编号G01N27/447GK102690880SQ20111007123
公开日2012年9月26日 申请日期2011年3月24日 优先权日2011年3月24日
发明者宦奕奕 申请人:苏州风采信息技术有限公司