专利名称：定性半定量两用检测女性排卵激素试纸及比色卡的制作方法
技术领域：
本发明涉及本发明涉及一种半定量检测女性排卵激素水平的试纸及使用该试纸检测排卵，确定排卵日期或检测激素性不孕的方法。
背景技术：
促黄体生成素(LH)由腺垂体嗜碱粒细胞分泌。在女性(LH)协同FSH (促卵泡激素)共同作用维持卵巢的月经周期，导致排卵与黄体形成。LH的产生受下丘脑促性腺释放激素的控制，同时受卵巢的正、负反馈调控。促使排卵在FSH协同作用下，形成黄体并分泌孕激素，可以预测排卵。当卵泡成熟时，分泌大量雌激素，使垂体释放大量促黄体生成素，形成促黄体生成素高峰，大量的促黄体生成素能使成熟的卵泡破裂、排卵。在月经周期LH的释放高峰与卵巢排卵有着密切关系，LH高峰一经出现，预示1-2 天内卵巢排卵，因此可以在月经周期中监测血清或尿液中LH峰值，以确定最佳受孕时间， 或需要采取避孕措施的时间。该检测结果为大于25毫国际单位/毫升(MIU/ML)表示。本发明可提供与生育受孕有紧密相关的可靠信息，使用者在需要给出生理周期内生育期起始的充分的预测资料，从而预测夫妻生活能否妊娠或是否需要采取避孕措施。或检测女性的激素水平能否达到妊娠水平。如果激素水平过低，如低于5 miu/ml，则说明女性有由于激素水平过低而患有不孕症。目前国内外医院利用胶体金免疫层析试纸检测促黄体生成激素水平，主要利用胶体金定性检测为主。检测结果只能判断激素水平的有无，高低，而不能判断激素水平的具体含量，而具体临床实践的检验上，确定激素水平的具体含量更具有参考价值。目前国内外医院都是用LH放免试剂盒，LH酶免试剂盒和定性胶体金试纸，这有的需要医院专业人员，专业设备才能检测，而且需要的时间比较长也很复杂，不能用于家庭自测，有的只能定性，不能起到指导性作用。昆明云大的CN00112779. 9专利披露了一种不孕症检测试纸及其检测方法，其在硝酸纤维膜上只有一条抗体线，没有质控线，在实际操作时，容易因为试纸条的失效而误判不孕或激素水平低下。甘肃兰州大学的CN200610200333的专利披露了一种胶体金半定量法的快速免疫诊断试纸条，检测线与定量线左右排列，在同一水平线上，中间又加一条窄的线缝，不便于批量化生产。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服上述技术的缺点，提供一种女性在家中就能自行完成检测是否排卵，以及可以自我检测具体排卵LH激素水平的定性半定量两用检测试纸。为解决上述技术问题，本发明定性半定量两用检测女性排卵的试纸，主要由PVC 或PS材质的底板，硝酸纤维素膜，吸水垫，聚酯膜，玻璃纤维膜相互交叠连接而成，其特征在于，所述底板的中部粘硝酸纤维膜，硝酸纤维膜上划有两条抗体线，一条为一抗LH单克隆抗体包被的检测线，另一条为羊抗鼠IgG抗体包被的质控线；在硝酸纤维膜的上部边沿位置粘吸水垫，硝酸纤维膜下部边沿位置粘结合了标记胶体金或彩色乳胶的另一抗LH单克隆抗体的结合垫，结合垫的下部边沿位置粘样品垫。所述硝酸纤维膜与上部的吸水垫，硝酸纤维膜与下端的结合垫，结合垫与下部的样品垫之间交接的部分相互重叠l--4mm。所述胶体金或彩色乳胶标记抗LH单克隆抗体的金颗粒或乳胶大小在 20nm—120nm 之间。作为优选方案，对质控线中羊抗鼠IgG抗体浓度，检测线中抗LH单克隆抗体浓度， 金标LH单克隆抗体浓度，进行调整，使在检测样品时，样品中LH激素浓度为25 Miu/ml时， 质控线和检测线红颜色深浅相同。样品中LH激素浓度低于25miu/ml时，检测线的红色浅于质控线的红色，样品中LH激素浓度高于25MIU/ml时，检测线的红色深于质控线的红色。 当样品中激素浓度低于5miu/ml时，质控线红色，而检测线无色。一种与定性半定量两用检测女性排卵的试纸配合使用的比色卡，比色卡中含有多种红色梯度的红色块，每种深浅的红色块，对应用排卵试纸检测不同浓度LH抗原检测所显示的红色。通过对照比色卡，可以找出检测样品中的LH的浓度。本发明的检测原理为将尿液或血液滴4-5滴到样品垫上，或把样品垫的下端浸到尿液或血液中，尿液或血液中的LH抗原通过样品垫的毛细作用，向硝酸纤维膜方向移动，经过金标结合垫时，与金标结合垫上的抗LH单克隆抗体特异性结合，并使结合物一起向硝酸纤维膜移动，当到达硝酸纤维膜上包被有抗LH单克隆抗体的检测线时，发生双抗夹心特异性结合，样品中的抗原和金标的抗LH单克隆抗体被包被在硝酸纤维膜的抗LH单克隆抗体固定，从而使检测线显示胶体金的红色，其检测线的红色深浅与样品中的LH抗原浓度程正比。未被检测线固定的金标LH单抗和LH激素抗原结合物或金标LH单抗继续沿硝酸纤维膜上移，达到质控线时，金标LH单抗将被质控线上的羊抗鼠IgG抗体结合固定，从而使质控线，显示红色，无论样品中是否含有LH抗原，质控线始终显色，如果质控线不显色， 说明试纸条无效。本发明采用胶体金免疫层析一步法，既可定性又可半定量检测女性尿液或血液中 LH促黄体生产激素含量，女性在家中使用本发明的试纸，就可知道体内LH激素分泌情况， 可预知自己排卵日期。从而决定受孕时机或选择是否需要采取避孕措施。不孕女性也可通过本发明的试纸条，检测了解自己是否患有激素性不孕症。
下面结合附图和具体实施方式
对本发明的技术方案作进一步具体说明。图1为定性半定量两用检测女性排卵激素试纸的主视图。图2为定性半定量两用检测女性排卵激素试纸的侧视图。图3为配合定性半定量两用检测女性排卵激素试纸使用的比色卡主视图。
具体实施例方式结合图1、2所示，定性半定量两用检测女性排卵激素试纸主要由玻璃纤维膜材质的样品垫01，聚酯膜或玻璃纤维膜材质的结合垫02，吸水垫06，底板07，硝酸纤维膜04五部分组成，硝酸纤维膜04上分别划有两条平行的抗体捕获线，靠近结合垫的一条抗LH单克隆抗体，作为检测线03，另一条含有经确定了浓度的羊抗鼠IgG抗体，作为标准浓度显色对照线05，也称为质控线，两条线相距4-7mm ；结合垫02上喷有胶体金或彩色乳胶标记的另一抗LH单克隆抗体。硝酸纤维膜04与上部的吸水垫06，硝酸纤维膜04与下端的结合垫 02，结合垫02与下部的样品垫06之间分别部分重叠交接，重叠宽度分别为l-4mm。所用的胶体金或彩色乳胶标记的另一抗LH单克隆抗体的金颗粒或乳胶大小在20nm--120nm之间。对质控线中羊抗鼠IgG抗体浓度，检测线中抗LH单克隆抗体浓度，金标LH单克隆抗体浓度，进行调整，使在检测样品时，样品中LH激素浓度为25 Miu/ml时，质控线和检测线红颜色深浅相同。样品中LH激素浓度低于25miu/ml时，检测线的红色浅于质控线的红色，样品中LH激素浓度高于25MIU/ml时，检测线的红色深于质控线的红色。当样品中激素浓度低于5miu/ml时，质控线红色，而检测线无色。本发明的使用方法为选定开始检测的时间，第一次检测选择女性月经后1周开始。在每天相对固定的时间，如早晨等，取一条试纸，把尿液或血液滴4-5滴到样品垫上，或把样品垫的下端浸到尿液或血液中，在5分钟内，质控线应显示红色；如果质控线不显色， 说明本条试纸为无效。观察检测线，并将检测线的颜色与质控线对比，检测线的红色深浅与样品中的LH抗原浓度程正比。对照色卡，记录每天检测的结果。连续检测10天为一个检测周期。如果在一个周期内的某次检测中，检测线红色突然加深，并超过质控线，则说明女性两天内即将排卵。这两天将是受孕最好时机，如果不想受孕，则需要采取相应的避孕措施。如果女性在一个检测周期内，检测线红色一直低于色卡lOmiu/ml的色值，则说明被检测者体内LH激素水平过低，可能患有脑垂体机能减退导致的不孕症。如果一个检测周期内，检测线红色一直低于质控线的红色，则说明被检测者体内 LH激素水平低于25miu/ml，可能患有因不能正常排卵而导致的不孕症。如果在一个检测周期内，检测线红色一直高于质控线红色，并大于色卡60miu/ml 色值，则说明被检测者体内LH激素水平过高，激素分泌异常，可能患有某种急需救治的疾病。本发明制备的定性半定量两用检测女性排卵的试纸和与ELISA试剂盒，对选取 200份武汉市内六家医院的确诊的孕妇晨尿样本和50阴性尿样本进行了检测，结果如下
定性半定量两用检测女性排卵的试纸 200份阳性，50阴性。ELISA试剂盒200份阳性，50份阴性。定性半定量两用检测女性排卵的试纸检测结果与ELISA试剂盒检测结果总符合率为100%。最后所应说明的是，以上具体实施方式
仅用以说明本发明的技术方案而非限制， 尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
权利要求
1.一种定性半定量两用检测女性排卵激素试纸，主要由底板，硝酸纤维素膜，吸水垫， 聚酯膜，玻璃纤维膜相互交叠连接而成，其特征在于，所述底板的中部粘硝酸纤维膜，硝酸纤维膜上划有两条抗体线，一条为一抗LH单克隆抗体包被的检测线，另一条为羊抗鼠IgG 单克隆抗体包被的质控线；在硝酸纤维膜的上部边沿位置粘吸水垫，硝酸纤维膜下部边沿位置粘结合了标记胶体金或彩色乳胶的另一抗LH单克隆抗体的结合垫，结合垫的下部边沿位置粘样品垫。
2.根据权利要求1所述的定性半定量两用检测女性排卵激素试纸，其特征在于，所述硝酸纤维膜与上部的吸水垫，硝酸纤维膜与下端的结合垫，结合垫与下部的样品垫之间交接的部分相互重叠l-4mm。
3.根据权利要求1或2所述的定性半定量两用检测女性排卵激素试纸，其特征在于，所述胶体金或彩色乳胶标记抗LH单克隆抗体的金颗粒或乳胶大小在20nm--120nm之间。
4.根据权利要求3所述的定性半定量两用检测女性排卵激素试纸，其特征在于，对质控线中的羊抗鼠IgG抗体浓度、检测线中抗LH单克隆抗体浓度以及金标LH单克隆抗体浓度进行调整，使在检测样品时，样品中LH激素浓度为25 Miu/ml时，质控线和检测线红颜色深浅相同；当样品中LH激素浓度低于25miu/ml时，检测线的红色浅于质控线的红色，样品中LH激素浓度高于25MIU/ml时，检测线的红色深于质控线的红色；当样品中激素浓度低于 5miu/ml时，质控线红色，而检测线无色。
5.一种配合权利要求4所述的定性半定量两用检测女性排卵激素试纸检测使用的比色卡，其特征在于，所述比色卡中含有多种红色梯度的红色块，每种深浅的红色块，对应用排卵试纸检测不同浓度LH抗原检测所显示的红色。
全文摘要
本发明披露了一种定性半定量两用检测女性排卵的试纸，主要由底板，硝酸纤维素膜，吸水垫，聚酯膜，玻璃纤维膜相互交叠连接而成，底板的中部粘硝酸纤维膜，硝酸纤维膜上划有两条抗体线，一条为第一抗LH单克隆抗体包被的检测线，另一条为羊抗鼠IgG单克隆抗体包被的质控线；在硝酸纤维膜的上部边沿位置粘吸水垫，硝酸纤维膜下部边沿位置粘结合了标记胶体金或彩色乳胶的另一抗LH单克隆抗体的结合垫，结合垫的下部边沿位置粘样品垫。女性在家中使用本发明的试纸，能够定性和半定量检测女性尿液或血液中LH促黄体生产激素含量，预知自己排卵日期，或了解自己是否患有激素性不孕症。
文档编号G01N33/74GK102183663SQ201110072240
公开日2011年9月14日 申请日期2011年3月24日 优先权日2011年3月24日
发明者周军, 王健斌, 龚贻洲 申请人:武汉璟泓万方堂医药科技有限公司