专利名称：测定固态发酵黄水色度的方法
技术领域：
本发明涉及一种测定固态发酵黄水色度的方法，属于酿酒技术领域。
背景技术：
黄水是固态酿造生产白酒过程中，逐渐渗于窖底部的棕黄色液体，又称黄浆水。黄水好坏基本上能反映出窖池发酵是否正常，配料是否合理，操作是否细致，出酒率和优质酒率的高低等。因此， 对黄水的品质进行评判，可以为下排配料以及制定技术措施提供依据。目前分析黄水品质的判断多采用感官评价，主要指标是黄水的色泽。一般正常黄水的颜色为黑褐色、菜油色、樱桃色或金黄色。然而感官评价主要是依靠专业人士的感觉器官和经验进行质量的评价或判断，需要经验非常丰富的技术人员才能做出判断，且结果因人而异，容易受主观性影响，缺乏科学性和准确性。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种检测结果准确的测定固态发酵黄水色度的方法。本发明的技术方案是测定固态发酵黄水色度的方法，包括如下步骤取黄水，加入乙醇浸提15飞Omin，离心，取上清液，稀释，在250 290nm处测吸光度，通过标准曲线换算为黄水色度；其中，乙醇的浓度> 95%。优选的，所述检测波长为26(T280nm。最优选的，所述检测波长为260nm。进一步的，黄水乙醇体积比为I :广4。优选的，黄水乙醇体积比为I : 2。进一步的，浸提时间为30min。进一步的，浸提温度为2(T50°C。优选的，浸提温度为30°C。进一步的,所述的离心速度为3000 6000r/min,离心时间为5 20min。优选的，所述的离心速度为5000r/min。优选的，所述的离心时间为lOmin。本发明的有益效果本发明方法提供了一种黄水色度检测方法，填补了酿酒领域黄水色度检测的技术空白。本发明方法操作简单，科学可靠，重复性好，检测结果准确、可
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图1标准色度液全波长扫描2不同色度标准液25(T350nm波长扫描图1和图2中的曲线，从下往上依次为色度为10、20、30、40、50、100、200、300、400度的标准液的扫描结果。图3、色度标准曲线，横坐标代表的是标准色度溶液的色度，单位是度。
具体实施例方式本发明的技术方案是测定固态发酵黄水色度的方法，包括如下步骤取黄水，加入乙醇浸提15飞Omin，离心，取上清液，稀释，在250 290nm处测吸光度，通过标准曲线换算为黄水色度；其中，乙醇的浓度> 95%。优选的，所述检测波长为26(T280nm。最优选的，所述检测波长为260nm。进一步的，黄水乙醇体积比为I :广4。·优选的，黄水乙醇体积比为I : 2。进一步的，浸提时间为30min。进一步的，浸提温度为2(T50°C。优选的，浸提温度为30°C。进一步的,所述的离心速度为3000 6000r/min,离心时间为5 20min。优选的，所述的离心速度为5000r/min。优选的，所述的离心时间为lOmin。黄水成分复杂，其中含有可溶性淀粉、还原糖、微生物和其他多种成分，这些成分都会干扰黄水色度的测定，因此不能直接用分光光度法进行测定，必须先提取黄水中的色素。为了使色素的提取效果好，发明人选用了多种的溶液来进行浸提实验。结果显示，采用乙醇的浸提效果好，且能排除其它杂质的干扰。经分析，主要原因在于色素易溶于乙醇，且乙醇能使黄水中的其它成分沉淀，因此选择乙醇溶液作为溶剂进行黄水色素的提取。此外，乙醇价廉易得且危害性小，提取色素的效果也较好。发明人经试验发现使用95%的乙醇已经能达到较好的色素提取效果，能使黄水中的蛋白质等成分很快变性沉淀，利于后面的分离步骤。乙醇提取后的上清液需要进行稀释，以免待测样品色度太高，使得检测结果不够精确。本方法测定色度的最适范围为100度以内，然而黄水来源不同(如发酵期或者配料不同的黄水)，色度相差比较大，可在检测前进行预实验，以确定合适的稀释倍数。根据标准曲线回归方程计算得到的色度还应乘以稀释倍数，最终得到样品的色度。在进行浸提条件的优化时，发明人对各个因素进行了多次实验，以获得优选的浸提条件。由于优化过程较长，因此，仅在实施例I中出示了最终优化的过程和结果。实施例I浸提条件的优化a、浸提时间的确定分别吸取5mL同样的黄水样品于4个25mL比色管中，加入20mL95%乙醇。分别浸提15min、30min、45min、60min后，吸取上清液采用紫外/可见分光光度计进行全波长扫描，结果显示，浸提15飞Omin时，样品的最大吸光度比较接近，即说明样品中的色素已基本全部浸提出来了。特别在浸提30min后最大吸光度值最高，即说明浸提30min已将黄水中的色素物质全部浸提出来了。b、浸提乙醇用量的确定分别吸取5mL同样的黄水样品于4个25mL比色管中，分别按照I : 1、1 : 2、1 3、1 4的比例加入95%乙醇。浸提30min后，吸取上清液采用紫外/可见分光光度计进行全波长扫描，结果表明黄水乙醇体积比为I :广4时，黄水样品的最大吸光度的值比较接近，且在黄水乙醇体积比为I : 2时最大吸光度的值为最大。由此说明，黄水乙醇体积比为I :广4时，浸提效果好，尤其以黄水乙醇体积比为I :
2时达到最佳。C、浸提温度的确定分别吸取5mL同样的黄水样品于4个25mL比色管中，各加入10mL95%乙醇，分别在20°C、30°C、4(TC、5(rC的水浴锅中浸提30min后，吸取上清液采用紫外/可见分光光度计进行全波长扫描，结果表明浸提温度为2(T60°C时，黄水样品的最大吸光度的值比较接近，且在浸提温度为30°C时后最大吸光度值达最大。由此说明浸提温度以2(T60°C为宜，优选 30°C。d、离心条件的确定吸取5mL黄水，加入95%乙醇10mL，30°C浸提30min后，吸取
上清液进行全波长扫描，将剩余的浸提液离心处理后全波长扫描，比较离心前后最大吸收 波长，发现离心后更接近标准液的最大吸收波长，因此表明离心处理后有利于杂质沉淀，测定结果更能真实反应浸提液吸光度值。吸取5mL黄水，加入95%乙醇IOmL, 30°C浸提30min后，在4000r/min分别离心5min、lOmin、15min、20min,取上清液进行全波长扫描,结果表明离心IOmin效果最佳。吸取5mL 黄水，加入 95% 乙醇 10mL，30°C浸提 30min 后，分别在 3000r/min、4000r/min、5000r/min、6000r/min离心IOmin后取上清液进行全波长扫描，结果表明离心速度为5000r/min效果最佳。实施例2检测波长的选择色度标准液精称确取I. 246g六氯钼酸钾(K2PtCl6)和I. OOOg六水氯化钴(CoCl2 ·6Η20)，溶于约500mL水中，加入IOOmL浓盐酸(Ρ=1· 18g/mL)后定容至IOOOmL,此
溶液色度相当于500度。将上述色度标准液依次稀释是色度为10、20、30、40、50、100、200、300、400度，进
行全波长扫描，结果见图I和图2。由图I可知，标准液的吸收波长主要集中在25(T350nm ；由图2可知，色度在100度以内时，最大吸收波长约为260nm，当色度大于100度时，最大吸收波长发生较大偏移，因此在测定样品色度时，最好能将样品进行稀释至色度在100度以内。实施例3标准曲线的绘制色度标准储备液精称确取I. 246g六氯钼酸钾(K2PtCl6)和I. OOOg六水氯化钴(CoCl2 ·6Η20)，溶于约500mL水中，加入IOOmL浓盐酸(Ρ=1· 18g/mL)后定容至IOOOmL,此
溶液色度相当于500度。色度标准溶液分别吸取0mL、0. 5mL、L OmLU. 5mL,2. OmL,2. 5mL标准液于25mL比色管中并用水定容至刻度，混合均匀，此时溶液的色度分别为O度、10度、20度、30度、40度、50度。建立标准曲线将上述色度标准溶液进行全波长扫描以确定最大吸收波长，在最大吸收波长260nm下测定色度标准溶液的最大吸光度。以色度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到色度的标准曲线，回归方程为y=0. 0239x+0. 0626，R2=O. 9846。则色度=(吸光度-0. 0626)/0. 0239，R2=O. 9846。实施例4采用本发明方法测定黄水色度取发酵35天、45天、55天的黄水，置于取样瓶中，各吸取5mL于25mL比色管中，力口Λ 10mL95%乙醇，混合后盖上塞子，30°C浸提30min,上清液5000r/min离心lOmin,由于色度最大吸收波长随着色度增大发生偏移，标准曲线适合于测定色度在100度以内的样品。故取离心后上清液稀释到70度(共稀释约30倍)以内，在260nm处测定吸光度值，测定结果% =A1 (35 天)=0·919，Α2 (45 天)=1·057，Α3 (55 天)=1. 117，经计算，对应的色度分别 35. 83度、41. 61度、44. 12度，乘以稀释倍数得到的黄水平均色度分别为C1 (35天)=1075. OO度，C2 (45 天)=1248. 20 度，C3 (55 天)=1323. 51 度。实施例5采用本发明方法测定黄水色度浓香型白酒采用的是续糟发酵，每甑糟醅都要加入新的粮食和糠后，进行混合蒸馏，投粮量就是加入粮食的重量，一般粮糟比为1:Γ :5. 5。取正常发酵，糠壳用量不同(糠用量分别为投粮量的22%、24%、26%)的三种黄水。置于取样瓶中，各吸取5mL于25mL比色管中，加入10mL95%乙醇,混合后盖上塞子,30°C浸提30min,上清液5000r/min离心IOmin后取上清液稀释到100度(稀释30倍)以内，在260nm处测定吸光度值，测定结果为=A1 (22%)=1.038，A2 (24%) =1. 109，A3 (26%) =1. 126，根据计算，对应的色度为 40. 81 度、43. 78 度、44. 49度，乘以稀释倍数得到的对应的黄水平均色度分别为Cl=1224. 35度，C2=1313. 47度， C3=1334. 81 度。试验例I验证本发明方法测定结果的准确性平行实验随机取一种黄水按照本发明提取、稀释后检测色度，目的是验证本方法测定结果的准确性，结果见表I。从表中的数据可以看出，本发明方法的测定结果准确性高。表I平行实验结果
权利要求
1.测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于包括如下步骤取黄水，加入乙醇浸提15飞Omin，离心，取上清液，稀释，在250 290nm处测吸光度，通过标准曲线换算为黄水色度；其中，乙醇的浓度 彡95%。
2.根据权利要求I所述的测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于所述检测波长为 260 280nm。
3.根据权利要求I或2所述的测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于所述的黄水乙醇体积比为I :广4。
4.根据权利要求3所述的测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于所述黄水乙醇体积比为1:2。
5.根据权利要求Γ4任一项所述的测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于所述的浸提时间为30min。
6.根据权利要求Γ5任一项所述的测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于所述的浸提温度为2(T50°C。
7.根据权利要求6所述的测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于所述的浸提温度为30°C。
8.根据权利要求6或7所述的测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于所述的离心速度为300(T6000r/min，离心时间为5 20min。
9.根据权利要求8所述的测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于所述的离心时间为IOmin。
10.根据权利要求9所述的测定固态发酵黄水色度的方法，其特征在于所述的离心速度为 5000r/min。
全文摘要
本发明涉及一种测定固态发酵黄水色度的方法，属于酿酒技术领域。本发明要解决的技术问题是提供一种测定固态发酵黄水色度的方法。本发明的技术方案是测定固态发酵黄水色度的方法，包括如下步骤取黄水，加入乙醇浸提15~60min，离心，取上清液，稀释，在250～280nm处测吸光度，通过标准曲线换算为黄水色度；其中，乙醇的浓度≥95%。本发明方法可用于黄水色度的检测，填补了酿酒领域黄水色度检测的技术空白。
文档编号G01N21/33GK102890068SQ20121041045
公开日2013年1月23日 申请日期2012年10月24日 优先权日2012年10月24日
发明者尹小满, 张宿义, 敖宗华, 税梁扬, 刘向阳 申请人:泸州品创科技有限公司