专利名称：锁阳补肾胶囊的综合检测方法
锁阳补肾胶囊的综合检测方法技术领域
本发明属于中药现代化领域，具体涉及一种锁阳补肾胶囊的检测方法。
背景技术：
中药成分复杂，特别是中药复方往往含多类、多种成分，构成了一个非常复杂的系 统。目前，新的有效部位中药制剂和现代复方中药制剂的研发不断增多，新的工艺及多种不 同提取方式并用于药品的研究及生产。
随着现代分析测试技术、设备仪器的迅猛发展，中药的含量测定、色谱鉴别成为检 测的重要手段。但目前一般只建立某一指标化学成分的含量测定或鉴别，针对上述多种新 工艺同时应用的情况，仅建立某单一成分的含量测定或鉴别在很大程度上带有较大的片面 性。
锁阳补肾胶囊具有补肾壮阳，填精固真功效，用于肾阳虚或肾阴虚引起的阳萎、遗 精、早泄等症。
锁阳补肾胶囊为胶囊剂，内容物为黄棕色至棕褐色的颗粒和粉末；气微香，味苦、 辛、微酸。
其处方是锁阳31g、仙茅31g、巴戟天31g、当归31g、蛇床子31g、肉灰蓉(蒸) 31g、韭菜子47g、五味子(蒸)20g、红参16g、牛鞭(制)16g、狗肾(制)16g、鹿茸10g、 黑顺片10g、肉桂10g、小茴香10g、阳起石(煅)10g、花椒10g、英丝子31g、杜仲(盐炒) 31g、沙苑子(盐炒)31g、党参(蜜炙)31g、山茱萸(蒸)31g、淫羊藿31g、黄芪(蜜炙)31g、 山药31g、熟地黄31g、补骨脂(盐炒)20g、枸杞子20g、覆盆子20g、远志20g、莲须20g、金樱 子20g、泽泻10g、甘草(蜜炙)10g、茯苓10g。
制法以上三十五味，锁阳、仙茅、巴戟天、当归、蛇床子、肉苁蓉、韭菜子、五味子、 红参、牛鞭、狗肾、鹿茸、黑顺片、肉桂、小茴香、阳起石、花椒十七味，粉碎成细粉，过筛，混 匀；其余菟丝子等十八味，加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏状， 加入上述细粉，混匀，制成颗粒，干燥，装入胶囊，制成1000粒，即得。口服，一次3 5粒，一日2 3次。
方中采用淫羊藿、鹿茸、阳起石、花椒、菟丝子、杜仲、沙苑子、补骨脂等滋补肾阳 药，达到了滋补肝肾，强筋缩尿之功效。君药锁阳、臣药巴戟天、肉苁蓉、淫羊藿、韭菜子补 肾壮阳；佐药中的莲须益肾固精，山药、获苓、泽泻健脾宁心，渗湿利水，除肾经湿热，同时采 用党参、枸杞子、熟地黄、杜仲等滋阴药，补益肝肾，配合当归、蛇床子、五味子、肉桂等药味 的滋补、缓泻作用，达到药性温和；用甘草以调合方中诸药药性，为使药也。依中医理论，本 品既滋肾阴，又补肾阳，阴阳双补，温和而持久，调节阴阳平衡，使人达到“阴平阳秘，精神乃 治”的状态。
锁阳补肾胶囊原来检测方法中只有显微鉴别，是利用显微技术对中药进行显微分 析，以确定其品种和质量的一种鉴定方法。显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定，利用显 微镜来观察药材的组织构造、细胞形状及内含物的特征、矿物的光学特性，和用显微化学方法，确定细胞壁及细胞内含物的性质或某些品种有效成分在组织中的分布等，用以鉴别药材的真伪与纯度甚至品质。这样的测检方法在很大程度上带有较大的片面性，需配合现代其它检测方法才能更全面的反映锁阳补肾胶囊重要成份的含量。发明内容
本发明提供一种锁阳补肾胶囊的检测方法，以解决目前显微鉴别存在的检测不够全面的问题。
本发明采取的技术方案是，包括如下鉴别方法和含量测定方法(一)鉴别方法(1)取本品，置显微镜下观察草酸钙针晶纤细，成束，不规则地存在于薄壁细胞中；草酸钙针晶束整齐或交错排列，长40 150 μ m,直径约4 μ m，存在于粘液细胞中；内果皮细胞黄色，作镶嵌状排列，壁呈连珠状增厚。胚乳细胞壁不均匀增厚，有较大的圆形纹孔；种皮表皮石细胞淡黄棕色，表面观类多角形，壁较厚，孔沟细密，胞腔含暗棕色物；草酸钙簇晶直径 20 68 μ m,棱角锐尖；石细胞类方形或类圆形，壁一面菲薄；无色的结晶呈柱状或块状； 内果皮细胞短纤维状，作镶嵌状排列或上下层垂直相交；(2)取本品锁阳补肾胶囊内容物6g，加乙醚40ml，超声处理10分钟，功率250W，频率 40KHz，放冷，滤过，滤液置60°C水浴上挥去醚，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材O. 5g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B 薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷乙酸乙酯=7 1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取本品锁阳补肾胶囊内容物6g，加乙醇80ml，超声处理30分钟，功率250W，频率 40KHz，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml，加热使溶解，放冷，用乙醚提取2次，每次20 ml，合并乙醚液，置60°C水浴上挥干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60 90°C 石油醚乙酸乙酯=4:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(二)含量测定方法(1)照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈水=45 55为流动相；检测波长为324nm ;柱温30°C，理论板数按蛇床子素峰计算应不低于7000 ；对照品溶液的制备精密称取蛇床子素对照品适量，加甲醇制成每Iml含4(^g的溶液， 即得；供试品溶液的制备取本品锁阳补肾胶囊装量差异项下的内容物lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，放置2小时，超声处理30分钟，功率 250W,频率40KHz，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得;(2)照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水=50 50 为流动相；检测波长为250nm，理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于10000 ；对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20μ g 的溶液，即得；供试品溶液的制备取锁阳补肾胶囊装量差异项下的内容物，研细，取lg，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，功率为250W，频率为30kHz，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得;(3)照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水=33 67 为流动相；检测波长为290nm，理论板数按桂皮醛峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备精密称取桂皮醛对照品适量，加甲醇制成每Iml含10μ g的溶液， 即得；供试品溶液的制备取锁阳补肾胶囊装量差异项下的内容物，研细，取2g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，加三氯甲烷50ml，超声提取30分钟，滤过，弃去滤液；药渣连同滤纸挥干溶剂，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理10分钟，功率为250W，频率为40kHz，放置过夜，同法再超声处理I次，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，精密吸取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。;(4)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈甲醇 1%醋酸10:9:81为流动相；检测波长为334nm，理论塔板数按松果菊苷峰计算应不低于 3000 ；照品溶液的制备取松果菊苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含O.1mg 的溶液，即得；供试品溶液的制备取重量差异项下的本品锁阳补肾胶囊内容物，取5. 0g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，浸泡30分钟，超声处理30分钟，功率250W，频率40kHz，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚提取2次，每次 30ml,弃去乙醚液，然后再用水饱和正丁醇洗2次，每次20 ml,合并正丁醇液，蒸干，残渣加 50%甲醇使溶解，转移到IOml量瓶中，加50%甲醇至刻度，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶`液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；(5)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0. 05% 磷酸=28:72为流动相；检测波长为270nm，理论塔板数按淫羊藿苷峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含40 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取重量差异项下的本品锁阳补肾胶囊内容物，取2. 5g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入20%乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，功率250W，频率33kHz，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得;(6)照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇0. 2mol/L 醋酸铵溶液冰醋酸=65 33 2为流动相；检测波长为250nm ;理论板数按甘草酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取甘草酸铵对照品10mg，精密称定，加O. 5%氨溶液甲醇=1:1的混合溶液制成每Iml含O. 2mg的溶液，相当于每Iml含甘草酸O. 1959mg,即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本品锁阳补肾胶囊内容物，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入O. 5%氨溶液甲醇=1:1的混合溶液50ml，密塞，称定重量， 超声处理30分钟，功率为250W，频率为20kHz，放冷，再称定重量，用上述混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明方中的药物众多达三十五味，且大量采用淫羊藿、鹿茸、阳起石、花椒、菟丝子、杜仲、沙苑子、补骨脂等滋补肾阳药，如何调节各药物之间的平衡，至关重要，使其能达到既滋肾阴，又补肾阳则是更加难得，方中的臣药肉苁蓉、淫羊藿等与君药配伍起主要作用，佐药蛇床子、五味子、肉桂等对君药、臣药有监制作用，以缓和药性，却又不影响君臣药等发挥疗效，用使药甘草以调合方中诸药药性，上述各药各司其职，本发明正是本着上述观点，结合现有的显微鉴别方法，在中医理论指导下，根据现在中药检测方法，经过大量实验得出本发明的技术方案。
本发明优点是规范了锁阳补肾胶囊的检测方法，解决原来只有显微鉴别存在的检查不全面的问题，通过对肉苁蓉、淫羊藿、当归、蛇床子、五味子、肉桂、甘草综合进行鉴别及含量测定，能更全面的检测佐药的成分，了解其含量和稳定性，也有助于说明药物的药用物质基础。
具体实施方式
锁阳补肾胶囊由吉林紫鑫药业股份有限公司按背景技术中处方和工艺生产提供。
包括如下鉴别方法和含量测定方法(一)鉴别方法(I)取本品，置显微镜下 观察草酸钙针晶纤细，成束，不规则地存在于薄壁细胞中；草酸钙针晶束整齐或交错排列，长40 150 μ m,直径约4 μ m，存在于粘液细胞中；内果皮细胞黄色，作镶嵌状排列，壁呈连珠状增厚。胚乳细胞壁不均匀增厚，有较大的圆形纹孔；种皮表皮石细胞淡黄棕色，表面观类多角形，壁较厚，孔沟细密，胞腔含暗棕色物；草酸钙簇晶直径 20 68 μ m,棱角锐尖；石细胞类方形或类圆形，壁一面菲薄；无色的结晶呈柱状或块状； 内果皮细胞短纤维状，作镶嵌状排列或上下层垂直相交；(2)取本品锁阳补肾胶囊内容物6g，加乙醚40ml，超声处理10分钟，功率250W，频率 40KHz，放冷，滤过，滤液置60°C水浴上挥去醚，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材O. 5g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B 薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷乙酸乙酯=7 1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取本品锁阳补肾胶囊内容物6g，加乙醇80ml，超声处理30分钟，功率250W，频率 40KHz，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml，加热使溶解，放冷，用乙醚提取2次，每次20 ml，合并乙醚液，置60°C水浴上挥干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60 90°C 石油醚乙酸乙酯=4:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(二)含量测定方法(O照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈水=45 55为流动相；检测波长为324nm ;柱温30°C，理论板数按蛇床子素峰计算应不低于7000 ；对照品溶液的制备精密称取蛇床子素对照品适量，加甲醇制成每Iml含4(^g的溶液， 即得；供试品溶液的制备取本品锁阳补肾胶囊装量差异项下的内容物lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，放置2小时，超声处理30分钟，功率 250W,频率40KHz，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得;(2)照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水=50 50 为流动相；检测波长为250nm，理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于10000 ；对照品溶液的制备取五味子醇 甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20μ g 的溶液，即得；供试品溶液的制备取锁阳补肾胶囊装量差异项下的内容物，研细，取lg，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，功率为250W，频率为30kHz，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得;(3)照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水=33 67 为流动相；检测波长为290nm，理论板数按桂皮醛峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备精密称取桂皮醛对照品适量，加甲醇制成每Iml含10μ g的溶液， 即得；供试品溶液的制备取锁阳补肾胶囊装量差异项下的内容物，研细，取2g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，加三氯甲烷50ml，超声提取30分钟，滤过，弃去滤液；药渣连同滤纸挥干溶剂，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理10分钟，功率为250W，频率为40kHz，放置过夜，同法再超声处理I次，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，精密吸取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。;(4)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈甲醇1%醋酸10:9:81为流动相；检测波长为334nm，理论塔板数按松果菊苷峰计算应不低于 3000 ；照品溶液的制备取松果菊苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含O.1mg 的溶液，即得；供试品溶液的制备取重量差异项下的本品锁阳补肾胶囊内容物，取5. 0g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，浸泡30分钟，超声处理30分钟，功率250W，频率40kHz，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚提取2次，每次 30ml,弃去乙醚液，然后再用水饱和正丁醇洗2次，每次20 ml,合并正丁醇液，蒸干，残渣加 50%甲醇使溶解，转移到IOml量瓶中，加50%甲醇至刻度，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；(5)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.05% 磷酸=28:72为流动相；检测波长为270nm，理论塔板数按淫羊藿苷峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含40yg的溶液，即得；供试品溶液的制备取重量差异项下的本品锁阳补肾胶囊内容物，取2. 5g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入20%乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，功率250W，频率33kHz，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得; (6)照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇0. 2mol/L 醋酸铵溶液冰醋酸=65 33 2为流动相；检测波长为250nm ;理论板数按甘草酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取甘草酸铵对照品10mg，精密称定，加O. 5%氨溶液甲醇=1:1的混合溶液制成每Iml含O. 2mg的溶液，相当于每Iml含甘草酸O. 1959mg,即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本品锁阳补肾胶囊内容物，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入O. 5%氨溶液甲醇=1:1的混合溶液50ml，密塞，称定重量， 超声处理30分钟，功率为250W，频率为20kHz，放冷，再称定重量，用上述混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取 对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
权利要求
1. 一种锁阳补肾胶囊的综合检测方法，包括如下鉴别方法取本品锁阳补肾胶囊内容物，置显微镜下观察草酸钙针晶纤细，成束，不规则地存在于薄壁细胞中；草酸钙针晶束整齐或交错排列，长40 150 μ m,直径约4 μ m，存在于粘液细胞中；内果皮细胞黄色，作镶嵌状排列，壁呈连珠状增厚；胚乳细胞壁不均匀增厚，有较大的圆形纹孔；种皮表皮石细胞淡黄棕色，表面观类多角形，壁较厚，孔沟细密，胞腔含暗棕色物；草酸钙簇晶直径20 68 μ m,棱角锐尖；石细胞类方形或类圆形，壁一面菲薄；无色的结晶呈柱状或块状；内果皮细胞短纤维状，作镶嵌状排列或上下层垂直相交；其特征在于还包括如下鉴别方法和含量测定方法·(1)取本品锁阳补肾胶囊内容物6g，加乙醚40ml，超声处理10分钟，功率250W，频率40KHz，放冷，滤过，滤液置60°C水浴上挥去醚，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材O. 5g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷乙酸乙酯=7 1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取本品锁阳补肾胶囊内容物6g，加乙醇80ml，超声处理30分钟，功率250W，频率40KHz，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml，加热使溶解，放冷，用乙醚提取2次，每次20 ml，合并乙醚液，置60°C水浴上挥干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60 90°C石油醚乙酸乙酯=4:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(二)含量测定方法(O照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈水=45 55为流动相；检测波长为324nm ;柱温30°C，理论板数按蛇床子素峰计算应不低于7000 ；对照品溶液的制备精密称取蛇床子素对照品适量，加甲醇制成每Iml含4(^g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品锁阳补肾胶囊装量差异项下的内容物lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，放置2小时，超声处理30分钟，功率250W,频率40KHz，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得;(2)照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水=50 50为流动相；检测波长为250nm，理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于10000 ；对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取锁阳补肾胶囊装量差异项下的内容物，研细，取lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，功率为250W，频率为30kHz，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得; (3)照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水=33 67为流动相；检测波长为290nm，理论板数按桂皮醛峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备精密称取桂皮醛对照品适量，加甲醇制成每Iml含10μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取锁阳补肾胶囊装量差异项下的内容物，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加三氯甲烷50ml，超声提取30分钟，滤过，弃去滤液；药渣连同滤纸挥干溶剂，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理10分钟，功率为250W，频率为40kHz，放置过夜，同法再超声处理I次，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，精密吸取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得; (4)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈甲醇1%醋酸10:9:81为流动相；检测波长为334nm，理论塔板数按松果菊苷峰计算应不低于·3000 ；照品溶液的制备取松果菊苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含O.1mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取重量差异项下的本品锁阳补肾胶囊内容物，取5. 0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，浸泡30分钟，超声处理30分钟，功率250W，频率40kHz，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，转移至分液漏斗中，用乙醚提取2次，每次30ml,弃去乙醚液，然后再用水饱和正丁醇洗2次，每次20 ml,合并正丁醇液，蒸干，残渣加·50%甲醇使溶解，转移到IOml量瓶中，加50%甲醇至刻度，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；(5)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.05%磷酸=28:72为流动相；检测波长为270nm，理论塔板数按淫羊藿苷峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含40yg的溶液，即得；供试品溶液的制备取重量差异项下的本品锁阳补肾胶囊内容物，取2. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入20%乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，功率250W，频率33kHz，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得;(6)照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇0. 2mol/L醋酸铵溶液冰醋酸=65 33 2为流动相；检测波长为250nm ;理论板数按甘草酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取甘草酸铵对照品10mg，精密称定，加O. 5%氨溶液甲醇=1:1的混合溶液制成每Iml含O. 2mg的溶液，相当于每Iml含甘草酸O. 1959mg,即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本品锁阳补肾胶囊内容物，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入O. 5%氨溶液甲醇=1:1的混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处 理30分钟，功率为250W，频率为20kHz，放冷，再称定重量，用上述混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
全文摘要
本发明涉及一种锁阳补肾胶囊的检测方法，属于中药现代化领域。本发明通过对肉苁蓉、淫羊藿、当归、蛇床子、五味子、肉桂、甘草综合进行鉴别及含量测定，结合原有的显微鉴别，规范了锁阳补肾胶囊的检测方法，解决原来只有显微鉴别存在的检查不全面的问题，能更全面的检测该药的成分，了解其含量和稳定性，也有助于说明药物的药用物质基础。
文档编号G01N30/90GK103033588SQ20131000034
公开日2013年4月10日 申请日期2013年1月1日 优先权日2013年1月1日
发明者殷金龙, 高艳辉, 李坤, 徐德辉, 杨锡龙, 李雪, 马伟才, 李男男, 郭英侠, 白丽娜 申请人:吉林紫鑫药业股份有限公司