专利名称：一种检测虾类产品新鲜度的表征方法
技术领域：
本发明涉及一种新鲜度的检测方法，特别是一种检测虾类产品新鲜度的表征方法。
背景技术：
近年来，随着我国加入WT0，我国渔业以更加开放的姿态融入世界渔业发展格局。随着国家减船转产计划和发展远洋渔业的优惠政策的实施，远洋渔业特别是大洋性公海渔业得到较快的发展。我国水产品对外贸易也蓬勃发展。1999年进出口贸易总量达265.32万吨，贸易总额44.3亿美元；2000年，进出口贸易量405万吨，贸易额达到56.8亿美元；2010年进出口贸易量716.06万吨，贸易总额203.64亿美元。自2002年起，中国水产品出口量位居全球第一。现在，中国不仅是全球最大的水产养殖国，也是全世界唯一的水产品养殖产量超过捕捞产量的国家。我国原有的水产品的质量安全标准存在明显的缺陷和不足，急需修改完善，以提高国人对进口水产品的鉴别能力，保护国人的生命安全。因此，开展水产品的质量安全研究，提升我国水产品质量安全水平，无论是对促进中国水产品产业发展，还是保护百姓的身体健康都是有意义和必需的。虾类等水产品的质量和新鲜程度评价，一直是人们高度关注。由于传统评价水产品质量和新鲜程度基本上沿用感官目测，化学检测，物理测定，微生物检测等进行。其中，感官法主要通过外观(肉质组织、体表色泽等)、气味、虾肉的紧松程度(触觉)等进行。感官法过于简单而不具备足够的说服力。化学法则通过检测挥发性盐基态氮(TVBN)、组胺、生物胺、三甲胺、K值、酸价、过氧化值、硫代巴比妥酸值等进行。物理法通过测定僵硬指数(R I值)、电导度、氧化还原电位等进行。微生物法通过检测普通细菌数、腐败细菌数、病原细菌数等进行。国内许多学者也对水产品的新鲜度的评价方法作过一些研究，如电子鼻技术、液相色谱法、气相色-质谱联用技术、生物阻抗法、近红外光谱法等，申请了一些相关专利如公开号为 CN101825594、CN101915815、CN1760665、CN101012477、CN101592624 等专利。以上检测，事项繁多，程序烦琐，难以应用到实际，且检测不灵敏，检测不出新鲜度的等级，只能检测出腐败程度。
发明内容
本发明要解决的技术问题是:提供一种准确、有效、简便的检测虾类产品新鲜度的表征方法，以改善当前传统检测方法存在的主观性、复杂性、准确性低等缺点，显著提高了水产检测方法的准确性和客观性。解决上述技术问题的技术方案是:一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，采用苦味酸比色法同时测定出虾类产品样品中的三甲胺和氧化三甲胺的含量，并通过数据处理得到三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值，然后将测得的虾类产品样品的挥发性盐基氮的值与三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值进行相关性分析，得到相关方程，再将评定新鲜等级的挥发性盐基氮标准值代入到相关方程中，可得到评定虾类产品样品新鲜程度的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值，将测得的虾类产品样品中三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值与三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值进行对比，得到虾类产品样品的新鲜度。本发明的进一步技术方案是:该方法具体包括下述步骤:
A.对虾类产品样品进行处理:将虾类产品样品浙干、碾碎；
B.获取数据:
B1.用还原剂Fe-EDTA将虾类产品样品中的TMAO全部还原成TMA，将虾类产品样品中原有的TMA和还原后虾类产品样品中的总TMA分别抽提于无水甲苯中，与苦味酸作用，形成黄色的苦味酸三甲胺，比色，获取吸光度；
B2.将三甲胺配制成三甲胺标准溶液，用多波长薄层扫描仪分别获取三甲胺标准溶液的吸光度，根据吸光度与三甲胺浓度的关系得到吸光度与三甲胺浓度的线性关系，得到吸光度与三甲胺质量的线性方程，将步骤BI中得到的吸光度分别代入吸光度与三甲胺质量的线性方程中，获取还原后虾类产品样品中总TMA的质量和虾类产品样品中原TMA的质量;
B3.根据步骤B2中得到的数据，获取虾类产品样品中TMAO的含量m(TMAO)和虾类产品样品中TMA的含量m(TM)；
B4.根据步骤B3中得到的数据，通过下列公式得到三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值:
权利要求
1.一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于:采用苦味酸比色法同时测定出虾类产品样品中的三甲胺和氧化三甲胺的含量，并通过数据处理得到三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值，然后将测得的虾类产品样品的挥发性盐基氮的值与三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值进行相关性分析，得到相关方程，再将评定新鲜等级的挥发性盐基氮标准值代入到相关方程中，可得到评定虾类产品样品新鲜程度的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值，将测得的虾类产品样品中三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值与三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值进行对比，得到虾类产品样品的新鲜度。
2.根据权利要求1所述的一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于:该方法具体包括下述步骤: A.对虾类产品样品进行处理:将虾类产品样品浙干、碾碎； B.获取数据: B1.用还原剂Fe-EDTA将虾类产品样品中的TMAO全部还原成TMA，将虾类产品样品中原有的TMA和还原后虾类产品样品中的总TMA分别抽提于无水甲苯中，与苦味酸作用，形成黄色的苦味酸三甲胺，比色，获取吸光度； B2.将三甲胺配制成三甲胺标准溶液，用多波长薄层扫描仪分别获取三甲胺标准溶液的吸光度，根据吸光度与三甲胺浓度的关系得到吸光度与三甲胺浓度的线性关系，得到吸光度与三甲胺质量的线性方程，将步骤BI中得到的吸光度分别代入吸光度与三甲胺质量的线性方程中，获取还原后虾类产品样品中总TMA的质量和虾类产品样品中原TMA的质量; B3.根据步骤B2中得到的数据，获取虾类产品样品中TMAO的含量m(TMAO)和虾类产品样品中TMA的含量m(TM)； B4.根据步骤B3中得 到 的数据，通过下列公式得到三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值:
3.根据权利要求2所述的一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于:步骤A所述的对虾类产品样品进行处理包括下述步骤:Al.所述的虾类产品样品为鲜虾时:将鲜虾用清水冲洗后，剔除死亡与损伤个体，保留鲜活、大小均一的个体，用碎冰使虾休眠，去除虾头、虾皮并剔除虾线，然后把虾肉浙干、碾碎； A2.所述的虾类产品样品为冻虾时:用温度小于30°C的流水对冻虾进行解冻，解冻至无硬块和冰晶为止，然后去除虾头、虾皮并剔除虾线，然后把虾肉浙干、碾碎； A3.所述的虾类产品样品为虾肉制品时:用温度小于30°C的流水对虾肉制品进行解冻，解冻至无硬块和冰晶为止，然后把虾肉制品浙干、碾碎；所述的虾肉制品为虾丸。
4.根据权利要求2或3所述的一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于:所述步骤BI的具体步骤为:取经过步骤A处理过的虾类产品样品于容器中，按Ig样品加入2 4ml质量浓度3 8%三氯乙酸溶液计加入提取液三氯乙酸溶液,充分研磨至肌肉组织破碎后，于转速为3000 5000r/min离心10 30min，得到样品液，分别提取样品液于2只试管，向其中一只试管加入提取样品液体积I 2倍的还原剂Fe-EDTA，将加有Fe-EDTA的试管于50 70°C水浴中10 20min，分别向2只试管中依次加入提取样品液体积0.3 0.5倍的甲醛溶液、3 5倍的甲苯、I 2倍的饱和K2CO3溶液，振荡I 3min，静置3 7min，将上层甲苯层除水后，加入除水后甲苯层体积I 3倍的苦味酸-甲苯溶液，充分振荡混匀，比色，获取吸光度。
5.根据权利要求4所述的一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于:步骤B3中所述的虾类产品样品中TMAO的含量m(TMAO)和虾类产品样品中TMA的含量m(TMA)按以下公式计算得到:
全文摘要
一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，涉及一种新鲜度的检测方法，采用苦味酸比色法同时测定出虾类产品中的TMA和TMAO，并通过数据处理得到TMA/TMAO摩尔比值，然后将测得的虾类产品的挥发性盐基氮的值与TMA/TMAO摩尔比值进行相关性分析，得到相关方程，再将评定新鲜等级的挥发性盐基氮标准值代入到相关方程中，可得到评定虾类产品新鲜程度的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值。本发明方法可以改善当前传统检测方法存在的主观性、复杂性、准确性低等缺点，显著提高了水产检测方法的准确性和客观性，具有降低成本、检测灵敏、测定效果好的优点。
文档编号G01N21/25GK103163084SQ20131008101
公开日2013年6月19日 申请日期2013年3月14日 优先权日2013年3月14日
发明者李军生, 胡金鑫, 阎柳娟, 黄国霞 申请人:广西工学院