一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法
【专利摘要】本发明公开了一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法，该方法为采用高效液相色谱法，色谱柱为ＨｙｐｅｒｓｉｌＯＤＳ２-Ｃ１８柱，流动相为甲醇－水溶液，检测波长为２７５ｎｍ，流速为１.０ｍｌ／ｍｉｎ,本发明根据岩白菜素的性质，在甲醇中溶解，在乙醇或水中微溶，再结合制剂为水提取的水溶液，可用水、含水乙醇或含水甲醇作溶剂，考虑样品过滤等处理的操作容易进行，故采用５０％甲醇作为提取溶剂，经过超声及直接稀释溶解两种方法的对比，两种方法效果基本一样，故采用直接稀释至刻度即,本方法稳定性、精密度、重复性均符合定量分析要求，操作简便，色谱分离良好，结果准确可靠，可有效进行该制剂的质量检测。
【专利说明】一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法，属于生物医药检测【技术领域】。
【背景技术】
[0002]开喉剑喷雾剂由八爪金龙、山豆根、蝉蜕、薄荷脑等四味药材组成，具有明显的抑制病毒作用，能显著抑制革兰阳性菌和革兰阴性菌的生长，具有清热解毒、消肿止痛的功效，八爪金龙是方中君药，岩白菜素是八爪金龙的主要成分之一，岩白菜素又称虎耳草素和矮地茶素，一般是从虎耳草科植物和紫金牛科植物中提取的有效成分，属于异香豆精类化合物，具有良好的止咳祛痰作用，此外，还具有良好的抗炎、抗心律失常、抗病毒和护肝作用，八爪金龙中化学成分的含量测定，文献报道较多的是岩白菜素的含量测定，测定的方法有薄层扫描法、高效液相色谱法(11& 11061 1 (? II 1 ￠1 0111-0111 & &]0等，目前已有多篇文献报道只？匕匚测定岩白菜素在片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂、糖浆剂等中的含量。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是:提供一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法，方法操作简便、快速、准确、重现性好，可用于开喉剑喷雾剂的质量控制，以克服现有技术的不足。
[0004]本发明的技术方案
一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法，该方法为采用采用高效液相色谱法，色谱柱为只7 ？ 6 1- 3 1 1 0 0 5 2 - 0: 8柱，流动相为甲醇一水溶液，检测波长为2 7 5 11 111,1.0 111 1 / 111 1 11。
[0005]前述的一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法中，所述II 7 ？ 6 1- 3 1 1
00 5 2 - (11 丨 8 柱的标准为 5 406111111。
[0006]前述的一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法中，所述的甲醇一水溶液中体积比为1 7:83。
[0007]由于采用上述技术方案，与现有技术相比，本发明根据岩白菜素的性质，在甲醇中溶解，在乙醇或水中微溶，再结合制剂为水提取的水溶液，可用水、含水乙醇或含水甲醇作溶剂，考虑样品过滤等处理的操作容易进行，故采用5 0 %甲醇作为提取溶剂，经过超声及直接稀释溶解两种方法的对比，两种方法效果基本一样，故采用直接稀释至刻度即可。根据相关文献资料选择2 7 5 11 0作为该实验的检测波长，岩白菜素的II？ 含量测定的流动相一般有甲醇一水系统、甲醇一冰醋酸系统、乙腈一磷酸系统等几种不同的系统，本实验试用了多种组成及比例的流动相，峰形及分离情况无差别，出于简捷考虑，采用了甲醇一水(17:8 3)的组成，本方法稳定性、精密度、重复性均符合定量分析要求，操作简便，色谱分离良好，结果准确可靠，可有效进行该制剂的质量检测。
【专利附图】
【附图说明】
[0008]附图1为开喉剑喷雾剂的II ？ 1.0色谱结果图；
附图2为开喉剑喷雾剂中岩白菜素的回收率示意图；
附图3为2 0批样品中岩白菜素测定结果示意图。
【具体实施方式】
[0009]下面结合附图对本发明作进一步的详细说明，但不作为对本发明的任何限制。
[0010]本发明的实施例:
1材料与方法
1.1 试剂和药品
甲醇为色谱纯、分析纯，水为纯净水，其余试剂均为分析纯；岩白菜素对照品(中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，批号1 5 3 2 - 2 0 0 2 0 2 ^样品和阴性样品由贵州三力制药有限责任公司生产企业提供，方法研宄所用样品为成人型。
[0011]1.2 仪器
岛津1 (3 - 2 0人高效液相色谱仪，包括3 ？ 0 - 2 0人紫外检测器、3 11-20入自动进样装置、1 ?: - 3 0 1 II〖丨0 11色谱工作站、1.0 - 2 0人丁输液泵和7 09-25 0超声波清洗器(北京医疗设备二厂X
[0012]1.3 色谱条件
色谱柱为大连依利特只 71361*3 丨 10032-(^8^(54 111,200 111111 X
4.6检测波长 2 7 5 11111，流速为 1.0^1/
爪1 11，进样量1 0^1，本实验条件下岩白菜素与其他组分分离完全(分离度? 1，5),理论板数以岩白菜素峰计算为3 0 0 0，阴性对照品溶液无干扰，见附图1。
[0013]1.4 溶液的制备
1.4.1 对照品溶液的制备
精密称取岩白菜素对照品10.1108，置5001量瓶中，加5 0 %甲醇溶解并稀释至刻度，得对照品贮备液，精密量取5 111 1贮备液置2 0 0 1量瓶中，加5 0 %甲醇稀释至刻度，制成每1爪1含岩白菜素0.0 5 0 5 5 02的对照品溶液。
[0014]1.4.2 供试品溶液的制备
取本品5瓶，倾出药液、搅匀，精密量取5 0 1，置5 0 111 1量瓶中，加5 0 %甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液5 0 1，置2 5 0 1量瓶中，加5 0 %甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0015]1.4.3 阴性样品溶液的制备
参照“ 1.4.2 ”项方法制得缺八爪金龙药材阴性样品溶液。
[0016]2 结果
2.1线性关系考察
精密吸取对照品贮备液5 0 1置2 0 111 1量瓶中，加5 0 %甲醇稀释至刻度，精密吸取该对照品溶液1、3、9、15、21、27^ 1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积人对质量数5)进行线性回归计算，得线性回归方程为:人= 1 3 0 2 2 2 5.8
0- 3 4 9 5.7,1- = 0.9 9 9 9，岩白菜素在 0.05055^1.365“ 5 线性关系良好。
[0017]2.2 精密度试验
取岩白菜素对照品溶液，重复进样6次，测定峰面积，结果为岩白菜素的平均峰面积为663824，只30 为 0.24%。
[0018]2.3 重复性试验
取本品(成人型，批号2 0 1 0 0 9 0 5 ),按“ 1.4.2 ”项供试品溶液的制备方法，平行制备6份供试溶液，分别进样1 0 V 1，测定峰面积，计算结果为岩白菜素的平均含量为 2.32561115/5,1130 为 1.1%。
[0019]2.4 稳定性试验
取重复性试验中的第一份供试液，分别于0、1、2、4、6、8 进样测定岩白菜素峰面积，结果为岩白菜素平均峰面积为606706，1130为0.7 7 %，说明供试液在8内稳定性良好。
[0020]2.5 加样回收率试验
分别精密称取6份已测定含量的样品(批号2 0 1 0 0 9 0 5，岩白菜素含量
2.3 1 2 7 2丨1.) 2.501，置于5 001量瓶中，精密加入岩白菜素溶液(0.5 7 2 3 5/1)
对照品混合溶液1 0 0 1，加5 0 %甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液5 0 1，置2 5爪1量瓶中，加5 0 %甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，制得供试品溶液，精密吸取1 0^ 1，测定峰面积，计算结果见附图2，岩白菜素的平均回收率为9 9.5%，1130为2.1
[0021]2.6 样品的含量测定
按照“1.4.1”、“1丨4.2”项方法分别制备对照品和供试品溶液，进样各1 0 V1，测定峰面积，计算样品中岩白菜素的含量，2 0批样品结果见附图3。
[0022]3 讨论
根据岩白菜素的性质，在甲醇中溶解，在乙醇或水中微溶，再结合制剂为水提取的水溶液，可用水、含水乙醇或含水甲醇作溶剂，考虑样品过滤等处理的操作容易进行，故采用
50 %甲醇作为提取溶剂，经过超声及直接稀释溶解两种方法的对比，两种方法效果基本一样，故采用直接稀释至刻度即可，根据相关文献资料选择2 7 5 110作为该实验的检测波长，岩白菜素的只？ 1 0含量测定的流动相一般有甲醇一水系统、甲醇一冰醋酸系统、乙腈一磷酸系统等几种不同的系统。本实验试用了多种组成及比例的流动相，峰形及分离情况无差别，出于简捷考虑，采用了甲醇一水(1 7: 8 3)的组成，本方法稳定性、精密度、重复性均符合定量分析要求，操作简便，色谱分离良好，结果准确可靠，可有效进行该制剂的质量检测。
【权利要求】
1.一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法，其特征在于:该方法为采用采用高效液相色谱法，色谱柱为H y p e r s i 10DS2 - C i 8柱，流动相为甲醇一水溶液，检测波长为2 7 5 n m，流速为1.0 m 1 / m i η。
2.根据权利要求1所述的一种开喉剑喷雾剂中岩白菜素的含量测定方法，其特征在于:所述 Hypers i 10032-(1；18柱的标准为 5 μ m，2 Ο 0 mm X 4.6mm。
3.根据权利要求1所述的一种归芍胶囊中白芍的鉴别和芍药苷含量，其特征在于:所述的甲醇一水溶液中体积比为1 7:83。
【文档编号】G01N30/02GK104483404SQ201410739797
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年12月8日 优先权日:2014年12月8日
【发明者】敖云霞 申请人:敖云霞