本发明涉及化学分析，具体而言，本发明涉及一种分离多巴胺及其有关物质 的方法。
背景技术：
1、为了提高多巴胺药品生产的质量，按照药品生产规范及产品标准，如中国药典(chp) 的规定，需要对多巴胺的质量进行有效的分析和控制，分析多巴胺的工艺路线，多巴胺粗 品中可能存在的几种杂质组分为：肾上腺素、腺酮盐酸盐。而目前，暂未发现比较成熟的 关于hplc分析和检测多巴胺粗品中肾上腺素、盐酸肾上腺酮的相关报道。
2、hplc法测定盐酸多巴胺的有关物质[j].欧嘉娜.北方药学.2013,10(05).公开了一种 hplc法测定盐酸多巴胺的有关物质的方法，在该文献中，采用nucleosil c18柱(100mm×4.6mm,5μm)进行检测，流动相：0.005mol/l十二烷基硫酸钠-乙腈-冰醋酸-0.1mol/l乙二胺四醋酸二钠(700∶300∶10∶2)；检测波长：280nm，虽然该方法能够检 测多巴胺粗品，但是峰形较差，分离时间较长，分离度也不够理想。
3、因此，亟需开发一种简单、快速且高效地分离多巴胺及其有关物质的方法，从而实现 以多巴胺为原料的药品的质量控制。
技术实现思路
1、本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个 目的在于提供一种分离多巴胺及其有关物质的方法，利用高效液相色谱分析方法，对多巴 胺及其有关物质进行有效分离，从而实现以多巴胺为原料的药品的质量控制。
2、为此，本发明第一方面提供了一种分离多巴胺及其有关物质的方法，其特征在于，利 用高效液相色谱法对待测样品进行检测，以获得色谱图；
3、其中，所述高效液相色谱法的色谱条件如下：
4、色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
5、流动相包括流动相a和流动相b，以所述流动相a、所述流动相b进行梯度洗脱，
6、所述梯度洗脱的条件为：
7、
8、其中，所述流动相a为辛烷磺酸钠溶液、乙酸、乙二胺四乙酸二钠溶液和乙腈的混合溶液，所述流动相b为乙腈。
9、溶于流动相中的各组分经过固定相时，由于与固定相发生作用(吸附、分配、离子吸 引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。高效液相色谱便是基于此原理实现物质分析和物质分离的。本发明的发明人创造性的发现，采用本发明的分离方法可将多巴胺粗品中存在的肾上腺素、盐酸肾上腺酮进行有效分离，以实现以多巴胺为原料的药品的质量控制。并且，只有在本发明特定的洗脱条件下，才能使得色谱图中多巴胺与肾上腺素、腺酮的峰型良好，分离度达到预期标准，各相邻峰的分离度均≥1.5。
10、根据本发明实施例的分离多巴胺及其有关物质的方法，还可以具有以下附加技术特征 的至少之一：
11、根据本发明的实施例，所述梯度洗脱的条件为：
12、
13、根据本发明的实施例，所述流动相a中，辛烷磺酸钠溶液的浓度为0.01～0.05mol//l， 乙二胺四乙酸二钠溶液的浓度为0.05～0.15mol/l，辛烷磺酸钠溶液、乙酸、乙二胺四乙酸 二钠溶液的体积比为(650～750)：(3～8)：(1～3)。发明人发现，如果流动相a中，辛烷 磺酸钠溶液、乙酸、乙二胺四乙酸二钠溶液的体积比不在上述范围内，会影响色谱图中多 巴胺、肾上腺素与腺酮的峰型，进而使得分离度达不到预期标准，各相邻峰的分离度不会 均≥1.5。
14、根据本发明的实施例，所述流动相a中，辛烷磺酸钠溶液、乙酸、乙二胺四乙酸二钠溶液的体积之和与乙腈的体积比为(5～10)：(0.5～1)。发明人发现，如果辛烷磺酸钠溶液、乙酸、乙二胺四乙酸二钠溶液的体积之和与乙腈的体积比不在上述范围内，容易影响分离度，使得分离度达不到预期标准，各相邻峰的分离度不会均≥1.5，且出峰时间会过早或过晚。
15、根据本发明的实施例，所述高效液相色谱法中色谱柱为omni orca c18。
16、根据本发明的实施例，所述色谱柱的柱温为30～50℃。
17、根据本发明的实施例，所述流动相的流速为0.8～1.2ml/min。
18、根据本发明的实施例，所述高效液相色谱法中，检测波长为265～295nm。
19、根据本发明的实施例，所述方法还包括如下步骤：
20、(1)取含多巴胺的样品，加入流动相溶解，配制多巴胺浓度为2mg/ml的混合溶液；
21、(2)取10μl所述样品溶液注入高效液相色谱仪中，进行高效液相色谱分析并记录色 谱图，完成所述含多巴胺的样品的分离检测。
22、本发明的第二方面提供第一方面所述的方法在以多巴胺为原料的药品的质量控制中的 应用。
23、利用本发明的方法可以简便、快速、高效的分离检测多巴胺粗品中的多巴胺、肾上腺 素、腺酮等成分，可以有效实现以多巴胺为原料的药品的质量控制。
24、本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明 显，或通过本发明的实践了解到。
1.一种分离多巴胺及其有关物质的方法，其特征在于，利用高效液相色谱法对待测样品进行检测，以获得色谱图；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的条件为：
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述流动相a中，辛烷磺酸钠溶液的浓度为0.01～0.05mol//l，乙二胺四乙酸二钠溶液的浓度为0.05～0.15mol/l，辛烷磺酸钠溶液、乙酸、乙二胺四乙酸二钠溶液的体积比为(650～750)：(3～8)：(1～3)。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述流动相a中，辛烷磺酸钠溶液、乙酸、乙二胺四乙酸二钠溶液的体积之和与乙腈的体积比为(5～10)：(0.5～1)。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法中色谱柱为omniorca c18。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的柱温为30～50℃。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.8～1.2ml/min。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法中，检测波长为265～295nm。
9.根据权利要求1～8中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：
10.权利要求1～9中任一项所述的方法在以多巴胺为原料的药品的质量控制中的应用。