用于处理全血的自动采样方法与流程

1.本发明涉及用于处理非均质生物样本(例如全血)的自动采样方法。更具体地，本发明的自动采样方法允许对非均质化的生物样本进行采样，在生物样本被均质化以用于进一步分析之后，并以可重复的方式分配所述生物样本，从而在处理所述生物样本之前利用自动装置使样本状态和条件标准化。
2.根据本发明的自动采样方法可优选地在用于体外检测和/或在生物样本中定量至少一种分析物的装置中实施。本发明可用于临床领域的体外诊断的自动化装置中。
3.例如，本发明可应用于已知化验(干扰素γ(gamma)释放试验)，该化验包括通过将患者的全血细胞与模拟结核分枝杆菌的刺激肽接触的人工刺激阶段。在与病原体初步接触的情况下，在37℃下在16小时至24小时的潜伏期期间，患者的来自血液的白细胞将诱导分泌干扰素γ。在刺激的细胞沉降之后，化验的最后步骤包含测试释放的干扰素γ(ifn-γ)。
4.然而，本发明可应用于任何需要处理在进一步分析之前倾向于沉降并需要被均质化的全血或非均质生物样本的化验领域。


背景技术：

5.处理用于分析的全血或非均质生物样本的主要问题是其具有沉淀倾向。在含有血浆和形成的元素(例如红细胞、白细胞和血小板)的全血的沉淀过程中，在收集管的底部存在红细胞的倾析，并且白细胞上升到血浆和红细胞之间的界限处。因此，当我们想要对全血进行采样时，均质化是强制性的，因为如果没有均质化，则风险是根据采样摄取的深度并且特别是如果主管等待很长时间并且如果沉降开始，在若干血液摄取之间抽吸不同体积的白细胞。对应于元素的再悬浮的均质化是特别重要的，因为血液的沉淀可以非常快或非常缓慢，这取决于患者血液的特性，例如血细胞比容。此外，全血处理通常是指从主管获得血浆，但是对于一些化验，例如对于测试干扰素γ，需要保持细胞(主要是白细胞)不受损伤，因此，必须仔细地进行均质化并且为了保持白细胞的量，该均质化必须是可重复的。最后，必须考虑全血和其它非均质生物样本属于难以处理的液体类别(由于其非均质性)，并且体积小到几百微升左右，并且以前从未使用特别是以自动方式的制备/预处理。
6.根据本发明，我们使用的术语“末端”，其应理解为与样本接触并用于抽吸/分配样本以及定位在移液管上的任何装置，末端可以是针或管或具有相同功能的任何类似元件，其可以是可拆卸的或不可拆卸的。


技术实现要素：

7.本发明的目的是提供能够处理用于化验的全血的方法，该全血直接取自患者，没有任何预先处理，并且被放入收集管或其它容器中，准备用于进一步的分析。该方法的目标是能够以可重复和可自动的方式对全血简单地处理，避免任何凝块或聚集体，并且不会损伤白细胞。此外，本发明的目的是使得能够自动和可重复地将待测全血细胞移液到若干凹槽内。
8.因此，本发明涉及一种自动采样方法，其用于包含在容器(例如收集管)中的非均质生物样本，所述自动采样方法包括以下步骤：
[0009]-提供装置，所述装置包括至少一个移液单元和控制单元，所述移液单元配备有至少一个具有末端的移液管，所述控制单元与所述移液单元协作并控制所述移液单元，
[0010]-将包含所述非均质生物样本的容器装载到所述装置内，
[0011]-在装置内开始所述非均质生物样本的自动均质化，所述均质化包括以下子步骤：
[0012]
·
将移液管的末端在所述非均质生物样本的表面下方以第一预定深度浸入所述容器中，
[0013]
·
所述移液管操作抽吸所述非均质生物样本并将所述非均质生物样本分配到所述容器中的多个循环，其中在每个循环中，所述移液管在所述第一预定深度处抽吸所述非均质生物样本，优选地抽吸所述末端的整个容积容量，然后将所述非均质生物样本分配回所述容器内，所述移液管的末端端部在多个循环期间以第一预定深度保持在所述非均质生物样本的所述表面下方，
[0014]-一旦所述多个循环结束，通过以下步骤采样预定体积的非均质生物样本：
[0015]
·
第一阶段，从所述容器抽吸所述预定体积的非均质生物样本，其中所述末端以第一预定深度浸没，以及
[0016]
·
第二阶段，将之前抽吸的预定体积分配到与容纳所述非均质生物样本的所述容器不同的凹槽中。
[0017]
根据本发明的一个特征，所述非均质生物是全血。
[0018]
根据本发明的方法在以下许多方面是非常有利的：
[0019]-得益于在容器内以第一预定深度和在非均质生物样本的表面下方抽吸/分配的循环，缓解或甚至避免了凝块、聚集体、泡沫、倾析的影响，
[0020]-将移液管的末端端部保持在表面下，使得能够仅抽吸均质样本，
[0021]-得益于在均质化步骤中的多个循环，在容器内产生湍流区域，允许存在于非均质化生物样本中的细胞重新悬浮并且使旁边的聚集体运动，
[0022]-在采样步骤期间以第一预定深度的抽吸确保仅吸入均质样本而没有空气并将均质样本分配在凹槽中以用于进一步分析，
[0023]-得益于均质化步骤，末端端部是湿的，这使滑动摩擦最小化并提高了分配体积的精度，
[0024]-得益于在容器内以最佳的数量并以最佳的速度以及在抽吸和分配之间的最佳延迟进行的均质化步骤，可以在不损坏所述细胞的情况下可重复地摄取血细胞。
[0025]
有利的是，在白细胞数量方面的分配重复性的论证凭借几个凹槽之间的红细胞的比较性血细胞比容测量来执行。比较性血细胞比容测量还用于优化抽吸/分配循环的数量和速度以及在均质化步骤中抽吸和分配之间的延迟。
[0026]
根据本发明的一个特征，对于均质化步骤和采样步骤，移液管的末端是相同的。
[0027]
根据本发明的一个特征，对于4ml的容器和300μl的末端容积，移液单元优选地在均质化步骤期间执行3个至12个抽吸/分配循环，并且更优选在均质化步骤期间执行6个至20个抽吸/分配循环。
[0028]
根据本发明的一个特征，均质化步骤包括为移液单元的移液管配备末端的子步
骤，该末端位于非均质生物样本的容器的前面。
[0029]
根据本发明的一个特征，在均质化步骤期间，以第一预定速度执行抽吸，这使得能够保持血细胞不受损伤。根据本发明的一个特征，在均质化期间，以第二预定速度执行分配，这使得能够保持血细胞不受损伤。优选地，第一预定速度不同于第二预定速度。有利地，第一预定速度独立于第二预定速度。
[0030]
根据本发明的一个特征，在每个采样步骤之后更换或清洁移液管的末端，这允许精确地控制采样的条件，并确保对于不同凹槽中的多次采样，外部条件是相同的，从而保证了可重复的和精确的方法。此外，更换或清洁末端允许避免末端污染。
[0031]
可替代地，移液管的末端对于几个采样步骤是相同的，然后仅当要填充的不同凹槽是空的时才更换或清洁，以避免末端污染。
[0032]
根据本发明的一个特征，该方法包括在装载到装置中之前手动倒置容器的步骤。手动倒置是可选的并且可以改善均质化步骤。
[0033]
根据本发明的一个特征，在均质化步骤之后立即执行采样步骤，以便利用由均质化步骤产生的湍流区并且以避免抽吸将向末端端部会聚的聚集体。
[0034]
根据本发明的一个特征，为了在凹槽中分配以用于进一步分析，待抽吸的非均质生物样本的体积可以根据待执行的分析的类型而变化，并且可以根据装配移液管的末端的容积而变化。例如，其可以包含在200μl和400μl之间，并且更具体地约300μl。必须注意，如果末端的容积和/或待采样的体积小于300μl，则可能必须相应地优化(可能增加)和调整循环次数、速度和延迟。
[0035]
根据本发明的一个特征，采样步骤期间的抽吸可以一次或几次完成，这取决于所需的确定体积以及取决于移液管末端的容积。例如，由于全血的倾析可以是非常快的，相比为了得到400μl的两次摄入200μl相比，一次移液300μl能够在分析开始之前缩短不同移液摄入的持续时间。
[0036]
根据本发明的一个特征，所述自动采样方法还包括至少一个液位跟踪步骤，该液位跟踪步骤包括：
[0037]-通过传感器检测容器内的样本的液体高度，以及
[0038]-基于液体高度和/或基于待抽吸/待分配的非均质生物样本的体积和/或基于容器的容积和尺寸，理论上确定第一预定深度，所述确定是通过所述控制单元执行的，
[0039]-监控末端端部在均质化步骤和/或采样步骤期间在容器内部的移动以及跟随管内部的液体高度变化的移动。
[0040]
根据本发明的一个特征，术语容器的“尺寸”必须理解为直径和长度，但主要是直径。
[0041]
根据本发明的一个特征，所述至少一个液位跟踪步骤可以在均质化步骤的抽吸和/或分配期间执行。根据本发明的一个特征，所述非均质生物样本是液体。
[0042]
根据这种构造，在均质化步骤期间，末端端部总是浸没在容器中并在液体非均质生物样本的表面下方，利用产生的湍流区来抽吸和分配均质化液体并避免抽吸空气。此外，在均质化步骤期间，当移液管抽吸非均质生物样本的一部分时，末端端部跟随所述样本的液面下降和所述样本的液面上升，以便保持在表面之下。换句话说，在非均质生物样本中，当移液管抽吸样本时，容器中的样本液面降低，并且末端端部在容器内部进一步深入；并且
当移液管在容器内部分配非均质生物样本时，容器中的非均质生物样本液面增加，并且末端端部向上回退。
[0043]
根据本发明的一个特征，可以在采样步骤的抽吸阶段执行至少一个液位跟踪步骤。
[0044]
根据本发明的一个特征，所述自动采样方法还包括至少一个监控步骤，监控步骤包括以下子步骤：
[0045]-检测子步骤，其中至少一个传感器被配置成检测在均质化步骤或采样步骤期间在移液管的末端端部内部产生的压力或真空，并且向控制单元发送与检测到的压力或真空对应的至少一个压力值，并且优选地若干压力值，
[0046]-比较子步骤，其中，所述控制单元将发送的至少一个压力值与压力阈值进行比较，压力阈值对应于表示特征采样缺陷的至少一个区别性压力指示符，所述压力阈值嵌入在控制单元中并且由控制单元预先确定，
[0047]-确定子步骤，其中控制单元基于比较子步骤来确定是否存在均质化步骤或采样步骤的故障。
[0048]
根据本发明的一个特征，在均质化步骤的抽吸期间和/或在均质化步骤的分配期间和/或在采样步骤的抽吸阶段和/或在采样步骤的分配阶段执行监控步骤。
[0049]
根据本发明的一个特征，在执行自动采样方法之前，并且优选地在可行性测试期间，已经确定了压力阈值并将其嵌入控制单元中。
[0050]
根据本发明的一个特征，所述压力阈值对应于从多个可能的压力指示符中选择的至少一个区别性压力指示符，所述选择基于所述指示符对采样缺陷的敏感度。换句话说，所选择的区别性压力指示符是最能代表采样缺陷的指示符，其是影响在采样步骤期间或在均质化步骤期间发生的液体处理的潜在故障。例如，采样缺陷可以是凝块、漏气、聚集体、液膜、泡沫、气泡等。
[0051]
有利地，每个区别性压力指示符对应至少一个压力阈值。
[0052]
根据本发明的一个特征，用于在均质化步骤期间测量压力的传感器与在采样步骤期间相同。更具体地，用于在抽吸期间测量压力的传感器与分配期间相同。
[0053]
根据本发明的一个特征，在检测子步骤期间，控制单元运行监控所选择的区别性压力指示符的算法。优选地，该算法仅监控所选择的一些区别性压力指示符。
[0054]
优选地，一些所选择的区别性压力指示符被认为是在抽吸过程中发生的采样缺陷的特征，一些其它所选择的区别性压力指示符被认为是在分配过程中发生的采样缺陷的特征，一些其它所选择的区别性压力指示符被认为是在所述抽吸和在所述分配两者期间发生的采样缺陷的特征。有利的是，根据在执行监控步骤期间的抽吸或分配步骤，控制单元选择最适合被监控的区别性压力指示符。
[0055]
根据本发明的一个特征，区别性压力指示符可以是压力值或由嵌入控制单元的算法计算的压力值的计算值。例如，区别性压力指示符可以是在抽吸过程中达到的最大压力，这可以是抽吸过程中阻塞的特征；或由压力值计算的记分检查可以是泄漏、进气、泡沫和/或气泡的特征。
[0056]
根据本发明，如果控制单元确定在均质化步骤期间由传感器测量的至少一个压力值超过与至少一个压力指示符对应的至少一个确定的压力阈值，则控制单元触发警报并且
自动停止均质化步骤。相应地，如果控制单元确定在均质化步骤期间由传感器测量的至少一个压力值等于或低于对应于至少一个压力指示符的至少一个确定的压力阈值，则控制单元均质化步骤继续，直到在循环结束时由控制单元触发采样步骤。
[0057]
根据本发明，如果控制单元确定在采样步骤期间由传感器测量的至少一个压力值超过与所选择的区别性压力指示符中的至少一个相对应的至少一个所确定的压力阈值，则控制单元触发警报并且自动停止采样步骤。相应地，如果控制单元确定在采样步骤期间由传感器测量的至少一个压力值等于或低于对应于至少一个压力指示符的至少一个确定的压力阈值，则采样步骤继续进行，直到控制单元认为自动采样方法完成并被认为已实现。
[0058]
根据本发明的一个特征，控制单元被配置成命令重试模式，该重试模式包括重试自动采样方法的所标识的步骤，如果所述步骤由控制单元确定为由于测量的压力值与至少一个确定的压力阈值相对应而发生故障，则由控制单元标识所述步骤。有利地，重试模式允许避免从一开始就执行所有方法时浪费时间，重试模式在自动化系统生产率和节省样本量方面也是有利的：在重试模式的情况下，在执行重试模式之前，样本被分配回来。
[0059]
在本发明中，指定的“标识的步骤”可以是均质化步骤(抽吸和/或分配)或采样步骤的抽吸阶段。
[0060]
根据本发明的一个特征，在重试模式中，如果要重试抽吸步骤，则移液管的末端以第二确定深度处浸入生物样本中，第二预定深度比第一预定深度更深，所述末端对于均质化步骤的抽吸或采样步骤的抽吸阶段以第一预定深度浸入。这种构造允许避免在与发现影响先前样本处理的缺陷的区域不同的样本容器的区域中移动末端，以便确保体积的均匀摄入，并且允许避免抽吸先前可能摄入的凝块/聚集体。
[0061]
有利地，第二预定深度是由控制单元基于第一预定深度来确定的。
[0062]
根据本发明的一个特征，在重试模式中，在重试故障的步骤之前更换或清洁移液管的末端。
[0063]
根据本发明的一个特征，重试模式包括至少一个监控步骤，该监控步骤包括与在均质化步骤和/或采样步骤期间使用的监控步骤相同的子步骤。
[0064]
根据本发明的一个特征，在重试模式中，如果采样步骤故障，则重复均质化步骤，这使得能够润湿末端端部并提高吸入的精度。可替代地，在重试模式中，为了避免针对细胞的额外应力，如果采样步骤故障，则不重复均质化步骤。
[0065]
本发明的另一目的是一种被配置成执行根据本发明的自动采样方法的装置，所述装置至少包括：
[0066]-第一工作站，其中装载有容器，例如收集管，所述容器包含非均质生物样本，例如全血样本，
[0067]-第二工作站，其中装载有与所述容器不同的至少一个凹槽，所述凹槽被配置成接收预定体积的所述非均质生物样本，
[0068]-至少一个移液单元，其包括配备有末端的移液管，所述移液管被配置成在装置内在至少两个工作站之间移动，
[0069]-所述装置的至少一个控制单元，其被配置成与所述移液单元协作并控制所述移液单元。
[0070]
根据本发明的一个特征，末端是可移除的，这使得能够容易地更换末端并避免污
染。
[0071]
根据本发明的一个特征，末端可以是一次性的，这能够避免自动采样方法的步骤之间的污染。
[0072]
根据本发明的一个特征，所述移液单元包括至少一个传感器，所述传感器优选地设置在所述移液管的主体上，并且配置成感测和监控所述移液管的末端内的压力或真空。
[0073]
根据本发明的一个特征，所述至少一个传感器可以是压力传感器。
[0074]
根据本发明的一个特征，所述至少一个传感器设置在所述移液管的主体上。
[0075]
有利地，传感器被配置成检测移液管上的末端的夹持、检测容器内的液体存在和液位。更具体地，所述至少一个传感器还被配置成根据凝块、泡沫、气泡、膜、空气吸入等来控制抽吸。
[0076]
具体地，该至少一个传感器可以检测在刺穿步骤中对箔的正确刺穿。
[0077]
根据本发明的一个特征，所述装置被配置成执行包括根据本发明的自动采样方法的检测和/或定量方法。
[0078]
根据本发明的一个特征，样本容器的内壁涂覆有肝素锂。有利地，肝素是常用的抗凝剂，特别是在临床生物化学和化学测量测试中的抗凝剂。由于其螯合性能最小，对水的干扰最小和阳离子浓度相对较低，它是用于血液或血浆测试中的化学测量的推荐抗凝剂。实际上，也用作抗凝血剂的edta不能用于特定化验，因为edta抑制刺激。
[0079]
本发明的另一目的是一种用于检测和/或定量非均质生物样本(例如全血样本)中的分析物的方法，其中实施根据本发明的自动采样方法，所述检测和/或定量方法由配置成实施根据本发明的自动采样方法的装置实施，所述装置根据本发明并且至少包括：
[0080]-第一工作站，其中装载有容器，例如收集管，所述容器包含非均质生物样本，例如全血样本，
[0081]-第二工作站，其中装载有不同于所述容器的至少一个凹槽，所述凹槽被配置成接收预定体积的非均质生物样本，
[0082]-至少一个移液单元，其包括装配有末端的移液管，所述移液管被配置成在所述装置内的至少两个工作站之间在所述装置内移动。
[0083]
根据本发明的一个特征，检测和/或定量方法包括装载至少一个支撑物的至少一个步骤，支撑物包括至少一个凹槽，所述凹槽被配置成在装置内部接收从容器抽吸的预定体积的非均质生物样本。
[0084]
根据本发明的一个特征，检测和/或定量方法包括至少一个为移液管配备第一末端的步骤。有利地，如果所述至少一个凹槽被保护箔保护，则所述第一末端被配置成刺穿设置在所述至少一个支撑件的凹槽上的保护箔。在这种情况下，如果第一末端是可拆卸的，则在均质化步骤之前用第二末端替换第一末端。如果第一末端是不可拆卸的，则可以清洁所述第一末端。
[0085]
根据本发明的一个特征，支撑件是条带，并且包括至少一个凹槽，并且优选地包括彼此相邻的多个凹槽。
[0086]
根据本发明的一个特征，该方法包括用移液管的第一末端刺穿设置在装置的至少一个凹槽上的至少一个保护箔的至少一个步骤。
[0087]
根据本发明的一个特征，所述检测和/或定量方法还包括移除所述第一末端并将第二末端定位在所述移液管上的步骤，所述第二末端被配置成在所述均质化步骤期间和所述采样步骤期间用于所述自动采样方法。在刺穿保护箔和自动采样方法之间更换第一末端是有利的。实际上，在穿刺过程中，末端可能已经被损坏或变形，并且可能损害在自动采样方法中在样本抽吸或分配过程中所吸入的血液体积的准确性。可替代的，所述检测和/或定量方法还包括清洁所述第一末端的步骤，所述第一末端被配置成在所述均质化步骤和所述采样步骤期间用在所述自动采样方法中。
[0088]
根据本发明的一个特征，在支撑件的空的专用凹槽中执行采样步骤的分配子步骤，而不更换第一末端或第二末端。
[0089]
根据本发明的一个特征，所述检测和/或定量方法还包括以下步骤：
[0090]-移除第二末端并为移液管装配第三末端或清洁第一末端，以及
[0091]-抽吸包含在特定瓶体中的刺激物试剂并将其分配到含有采样的非均质生物样本的凹槽中。
[0092]
在对刺激物试剂移液之前进行非均质生物样本的采样。由于专用于全血样本的凹槽已经被第一末端打开并且是空的并因此不会发生过度装载，因此这具有在分配到支撑件的不同凹槽中的不同生物样本之间对末端使用相同条件的优点。
[0093]
所述检测和/或定量方法可用于在tb-igra试验(tuberculosis interferon gamma release assay，结核γ干扰素释放试验)中定量干扰素(ifn-γ)。在本技术中，至少三个不同的装配有凹槽的支撑件被装载在装置中。每个支撑件可以是条带的形式，优选由塑料制成，并且包括多个相邻的凹槽，一个凹槽专用于全血样本。
[0094]
本发明的另一目的是根据本发明的自动采样方法的用途，以允许在根据本发明的方法中在结核γ干扰素释放试验中来定量干扰素(ifn-γ)。
附图说明
[0095]
图1是示出了根据本发明的自动采样方法的第一实施例的示意图；
[0096]
图2是示出了根据本发明的自动采样方法的第二实施例的示意图；
[0097]
图3是示出了根据本发明的用于检测和/或定量全血样本中的分析物的方法的示意图；
[0098]
图4示意性地示出了根据本发明的装置。
具体实施方式
[0099]
本发明总体上涉及非均质生物样本的自动采样方法，其旨在在检测和/或定量非均质生物样本中的分析物的方法中实施。对于这些方法，可以使用由申请人以商标商业化的装置。
[0100]
该自动采样方法可以在采血后立即执行或者也可以推迟，该方法步骤中有略微差异并且将在具体描述中标识。
[0101]
现在将参考图1和图2来详细描述自动采样方法。
[0102]
根据本发明的自动采样方法被设想用于直接处理非均质生物样本，而无需任何预先处理，例如离心或过滤。
[0103]
在本说明书中，非均质生物样本是全血样本。
[0104]
自动采样方法100至少包括步骤101：提供图4中示意性示出的装置1。所述装置1至少包括第一工作站11和第二工作站12。在第一工作站11中装载有容器2(例如收集管)，容器2包含生物样本3，优选地为全血样本。在第二工作站12中装载有至少一个与容器2不同的凹槽5，该凹槽5被配置成接收预定体积的样本3。根据本发明的装置1还包括至少一个移液单元6，该移液单元6包括装配有末端62的移液管61，该移液管6被配置成在装置1内在至少两个工作站11、12之间移动。根据本发明并如图4所示，装置1还包括被配置成控制移液单元6的控制单元7。装置1还包括至少一个传感器8(优选地为压力传感器)，该传感器8布置在移液管61的主体上并且被配置成感测并监控移液管61的末端62内的压力或真空。
[0105]
自动采样方法100至少包括步骤103：将容器2装载到装置1内。在装载步骤103之前，推荐执行手动倒置步骤102，以便至少确保可施加在容器2内的涂覆的肝素锂(lithium heparin)以有效的方式与全血样本3接触。在图1和图2中用虚线示出了手动倒置步骤102，因为在其它实施例中可以不执行手动倒置。
[0106]
在装载容器2之后(步骤103)，自动开始均质化步骤104。该均质化步骤104至少包括第一子步骤104.1，该第一子步骤104.1包括将容器2内的末端62以第一预定深度(其在液位监控步骤105期间确定，如下所述)伸入生物样本3中。例如，在第一确定深度下对于300μl的末端最大容积，第一预定深度包括在1.6mm至15mm之间。与均质化步骤104并行，执行液位跟踪步骤105，以确保在均质化步骤104期间末端62端部总是浸没在生物样本3中。
[0107]
在均质化步骤104的第一子步骤104.1期间，执行液位跟踪步骤105的子步骤105.1，并且子步骤105.1包括通过传感器8检测容器2内的生物样本3的液体高度。
[0108]
当末端62达到第一预定深度时，控制单元7命令移液单元6开始对容器2内的生物样本3的进行抽吸和分配(均质化步骤104的子步骤104.2)的若干循环。在抽吸和分配104.2循环期间，执行液位跟踪步骤105的子步骤105.2和子步骤105.3，子步骤105.2包括至少基于液体高度通过控制单元7理论上确定第一预定深度，子步骤105.3包括通过控制单元7监控容器2内的末端62端部的移动，从而确保末端62跟随生物样本3的液位移动并保持浸没。
[0109]
如图1和图2所示，在均质化步骤104的抽吸和/或分配104.2期间执行至少一个液位跟踪的步骤105。可选地，可以在采样步骤106的抽吸阶段106.1期间执行(在附图的虚线上示出)至少一个液位跟踪的步骤105。
[0110]
当循环结束时，控制单元7自动且直接地向移液单元6命令采样步骤106。采样步骤106包括第一阶段106.1和第二阶段106.2。在第一阶段106.1期间，移液单元6从容器2抽吸预定体积的生物样本3，在第二阶段106.2，将之前抽吸的预定体积分配到与容器2不同的凹槽5中，对于均质化步骤104和采样步骤106，移液管61的末端62是相同的。在tb-igra化验的框架中，生物样本是全血样本，并且对于每个凹槽5，待抽吸的所述全血样本的体积为大约300μl，例如在该化验中，在三个不同的支持物(例如条带)中存在三个凹槽，所述凹槽旨在包含300μl的全血样本。
[0111]
如图1和图2所示，自动采样方法100还包括至少一个监控步骤107，该监控步骤包括以下子步骤：
[0112]-检测子步骤107.1，其中至少一个传感器8被配置成检测在均质化步骤104(见虚线)或采样步骤106期间在移液管61的末端62端部内产生的压力或真空，以及向控制单元7
发送与检测到的压力或真空对应的至少一个压力值(优选地若干压力值)。
[0113]-比较子步骤107.2，其中控制单元7将所发送的至少一个压力值与压力阈值进行比较，其中所述压力阈值与表示特征采样缺陷的至少一个区别性压力指示符对应，所述压力阈值嵌入在控制单元7中并且在自动采样方法之前由控制单元7预先确定，
[0114]-确定子步骤107.3，其中控制单元基于比较子步骤107.2来确定是否存在均质化步骤104或采样步骤106的故障。
[0115]
在图1和图2中，将仅针对采样步骤106示出监控步骤，但是也可以将监控步骤应用于均质化步骤104，特别是用于监控末端62是否发生完全堵塞。
[0116]
在检测子步骤107.1期间，控制单元7运行用于监控所选择的区别性压力指示符的算法。如果控制单元确定在采样步骤106期间由传感器8测量的至少一个压力值超过(是)与至少一个压力指示符对应的至少一个所确定的压力阈值，则控制单元7触发警报，并且采样步骤106自动地停止108。相应地，如果控制单元7确定在采样步骤106期间由传感器8测量的至少一个压力值等于或低于(否)与至少一个压力指示符对应的至少一个所确定的压力阈值，则采样步骤106继续，直到控制单元7认为自动采样方法100完成并认为实现了109。在采样步骤的抽吸阶段106.1期间以及在采样步骤106的分配阶段106.2期间执行监控步骤，如可以图1和图2看到的。
[0117]
在图2中示出了具有重试模式200的自动采样方法100。相应地，控制单元7被配置成命令重试模式200，该重试模式200包括：如果控制单元7已经确定步骤(104，106)由于所测量的压力值与至少一个区别性压力指示符的对应而发生故障，则重试自动采样方法100的所述步骤(104，106)。
[0118]
如图2所示，在重试模式200中，在重试(202)故障步骤之前，更换或清洁移液管61的末端62(步骤201)。在重试模式200期间，也执行液位跟踪105和监控107的步骤，如图2所示。此外，在重试模式200期间，在重试采样步骤106的抽吸阶段106.1的情况下，移液管61的末端62以第二确定深度浸入生物样本中，所述第二预定深度比第一预定深度更深，对于故障的均质化步骤104的抽吸104.2或采样步骤106的抽吸阶段106.1末端62以第一预定深度浸入。
[0119]
此外，如果在重试步骤202的监控步骤107期间，控制单元7认为(步骤107.3)仍存在故障(是)，则自动采样方法100被明确地停止并且被认为是故障(步骤110)，如果需要，则自动采样方法100在手动倒置步骤102(可选的)开始处或者在图2所示的均质化步骤104开始处被重新启动。如果在重试步骤202的监控步骤107期间，控制单元7认为(步骤107.3)不再有故障(否)，则自动采样方法100继续到下一步骤(图2中的虚线)。
[0120]
现在将参考图3并根据本发明的详细的自动采样方法100来描述根据本发明的检测/定量方法。本发明的方法300是用于在细胞刺激后检测和/或定量全血样本中的分析物的方法，其中实现了根据本发明的自动采样方法100。
[0121]
根据本发明，检测和/或定量方法300包括：至少一个装载至少一个支撑件4的步骤301，该支撑件4包括至少一个凹槽5，该至少一个凹槽5被配置成接收从装置1内的容器2抽吸的预定体积的全血样本3。
[0122]
在装载步骤301之后，执行为移液管61配备第一末端62的步骤302，该第一末端62被配置成刺穿(步骤303)覆盖支撑件4的至少一个凹槽5的至少一个密封保护箔41。应当注
意，刺穿保护箔的步骤303是可选的，因为在一些化验中，凹槽并未配备这种保护箔并且是完全敞开的。因此，步骤303被认为是可选的，并且在图3中以虚线表示。此外，检测和/或定量方法300还包括：移除所述第一末端62的步骤304以及将第二末端62定位在移液管61上的步骤305，第二末端62被配置成在均质化步骤104和采样步骤106期间在自动采样方法100中使用。在自动采样方法100之后，执行以下步骤：移除306第二末端62，为移液管61装配307第三末端，抽吸308包含在特定瓶体中的刺激物试剂，将刺激物试剂分配309到包含所采样的全血样本3的凹槽5中，以及排出310第三末端62。
[0123]
可替代地，在末端62是不可拆卸的另一实施例(未示出)中，例如末端是针：在装载步骤301之后，执行为移液管61装配第一末端62的步骤302，第一末端62被配置成刺穿(步骤303)覆盖支撑件4的至少一个凹槽5的至少一个保护箔41。此外，检测和/或定量方法300还包括清洁(未示出)所述第一末端62的步骤，以便确保在均质化步骤104和采样步骤106期间第一末端62可用于自动采样方法100。
[0124]
在自动采样方法100之后，执行以下步骤：清洁第一末端62，抽吸308包含在特定瓶体中的刺激物试剂，以及将刺激物试剂分配309到包含所采样的全血样本3的凹槽5中。
[0125]
可替代地，在其中一个或多个凹槽未被保护箔保护的另一实施例(未示出)中：在装载步骤301之后，执行为移液管61装配第一末端62的步骤302，所述第一末端62被配置成在均质化步骤104期间和针对采样步骤106在自动采样方法100中使用。在自动采样方法100之后，执行以下步骤：移除306第一末端62并为移液管61装配307第二末端或清洁第一末端62，然后抽吸308包含在特定瓶体中的刺激物试剂，以及将该刺激物试剂分配309到包含所采样的全血样本3的凹槽5中，排出310第二末端62或保持第一末端62。
[0126]
当然，本发明不限于所描述的以及在附图中示出的实施例。在不脱离由权利要求限定的本发明的保护范围的情况下，从各种元素构成或技术等同物替代的观点来看，可以进行各种修改。