试剂盒、制备方法及其在检测动物旋毛虫病中的应用

文档序号:30584205发布日期:2022-06-29 16:12阅读:来源:国知局

技术特征:
1.试剂盒,其特征在于,包括:金纳米颗粒探针;所述金纳米颗粒探针包括:单克隆抗体ts-wn10-1h9和寡核苷酸链i1偶联的金纳米颗粒;所述单克隆抗体ts-wn10-1h9由杂交瘤细胞株wn10-1h9分泌;所述杂交瘤细胞的保藏编号为:cgmcc no.18316。2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,还包括,兔抗ts-wn10多克隆抗体偶联的磁珠探针。3.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,还包括:杂交链式反应试剂和/或竞争反应试剂中的一种或多种;所述杂交链式反应试剂包括:寡核苷酸h1、寡核苷酸h2和hoechst 33342染料;所述竞争反应试剂包括:旋毛虫ts-wn10重组抗原和探针洗涤液。4.如权利要求1所述试剂盒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:s1:取sh-i1
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dna冻干粉与tcep溶液混合,避光静置,获得所述寡核苷酸链i1后,与金纳米颗粒混合,得到所述寡核苷酸链i1偶联的金纳米颗粒;s2:取所述单克隆抗体ts-wn10-1h9吸附于所述寡核苷酸链i1偶联的金纳米颗粒,得到所述金纳米颗粒探针。5.如权利要求2所述的试剂盒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:s1:取sh-i1
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dna冻干粉与tcep溶液混合,避光静置,获得所述寡核苷酸链i1后,与金纳米颗粒混合,得到所述寡核苷酸链i1偶联的金纳米颗粒;s2:取所述单克隆抗体ts-wn10-1h9吸附于所述寡核苷酸链i1偶联的金纳米颗粒,得到所述金纳米颗粒探针;s3:取bl21(de3)-pet28a-ts-wn10表达,纯化,获得所述旋毛虫ts-wn10重组抗原;s4:取所述旋毛虫ts-wn10重组抗原免疫兔,收获血清经protein g纯化,获得所述兔抗ts-wn10多克隆抗体;s5:取所述兔抗ts-wn10多克隆抗体与磁珠探针混合,获得兔抗ts-wn10多克隆抗体偶联的磁珠探针。6.如权利要求4或5所述的制备方法,其特征在于,s1中所述sh-i1
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dna冻干粉的浓度为2od,所述tcep溶液的浓度为10mm。7.如权利要求4至6任一项所述的制备方法,其特征在于,s3中所述旋毛虫ts-wn10重组抗原的质量为0.1μg,s5中所述磁珠探针的质量为25μg。8.如权利要求1至3任一项所述试剂盒和/或如权利要求4至7任一项所述制备方法制得的试剂盒在制备检测动物旋毛虫病产品中的应用。9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,检测样品与所述试剂盒中金纳米颗粒探针的体积比为3:1。

技术总结
本发明涉及生物检测领域,尤其涉及试剂盒、制备方法及其在检测动物旋毛虫病中的应用。本发明提供了试剂盒,包括:金纳米颗粒探针,该金纳米颗粒探针包括:单克隆抗体Ts-WN10-1H9和寡核苷酸链I1偶联的金纳米颗粒;上述单克隆抗体Ts-WN10-1H9由杂交瘤细胞株WN10-1H9分泌;上述杂交瘤细胞的保藏编号为:CGMCC No.18316。本发明制备的试剂盒具有操作简单、灵敏度高等ELISA不具备的优点,可同时检测猪和人血清样本,不受宿主物种限制。同时在检测时不与其他寄生虫阳性血清发生交叉反应,特异性及灵敏度高,具有市场开发价值。具有市场开发价值。


技术研发人员:刘晓雷 刘明远 徐凝 杨勇 白雪 丁静 唐斌 李辰 刘琰
受保护的技术使用者:吉林大学
技术研发日:2022.01.17
技术公布日:2022/6/28
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