本发明涉及半纤维素酶活力的检测方法，具体说是一种提高木聚糖酶活力检测准确性的方法。
背景技术：
1、生物酶在造纸工业中的应用越来越广泛，在制浆、漂白、磨浆、脱墨、树脂控制等方面均有重要作用。生物酶预处理纸浆纤维可以获得其他方法难以达到的效果，以纤维素酶和半纤维素酶及其复合酶应用最为广泛。
2、酶活力是衡量酶生物活性的重要指标，半纤维素酶活力的测试标准有gb/t23874-2009《饲料添加剂木聚糖酶活力的测定分光光度法》。dns法测定以木聚糖为底物，测试结果受木聚糖纯度影响较大。木聚糖一般是由玉米芯、燕麦、桦木等植物原料降解制得，降解程度较难控制，难免会生成一些具有还原性的单糖或者低聚木糖，市售商品木聚糖纯度最高95％，最低只有85％；如果放置一段时间或存放条件不当，纯度还会进一步降低，产生更多的还原性单糖或低聚木糖。这些还原糖会与dns反应产生显色现象，使空白样和测试样的颜色加深，使测试结果不准确。如果木聚糖纯度较低或者半纤维素酶活性较小，甚至因为背景颜色太深、色差较小而测不出结果。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本发明提供了一种提高木聚糖素酶活力检测准确性的方法，其特征在于，在常规的木聚糖酶检测方法基础上，对木聚糖进行预处理。
2、其中，常规的半纤维素酶检测方法是指在本发明申请日以前基于还原糖与dns试剂反应显色原理的检测技术，例如可以参照gb/t 23874-2009。
3、一种提高半纤维素酶活力检测准确性的方法，其特征在于，预处理步骤为：将预处理试剂和木聚糖溶液a反应并过滤得木聚糖溶液b。
4、一种提高半纤维素酶活力检测准确性的方法，其特征在于，所述预处理试剂为斐林试剂或班氏试剂。
5、一种提高半纤维素酶活力检测准确性的方法，其特征在于，包括以下步骤：
6、(1)木聚糖预处理：将适量的斐林试剂或班氏试剂与木聚糖溶液a于80℃左右水浴反应15min，产生砖红色沉淀，趁热过滤，得木聚糖溶液b，然后用冰乙酸调整ph至4.6左右，得木聚糖溶液c；
7、(2)酶活测定。向稀释后的酶液中加入已预热的木聚糖溶液c进行酶解反应，反应结束后加入氢氧化钠和dns试剂，煮沸灭活酶，然后定容至25ml，在490nm测其吸光度，与标准曲线对照得单糖浓度，按照以下公式计算：
8、x＝(a×25×n)/(t×150.13×m)
9、式中：
10、x-木聚糖酶活力，μmol/ml；
11、a-根据吸光度在标准曲线上查得或计算出的还原糖量，mg/l；
12、25-反应后定容体积，ml；
13、n-酶液稀释倍数；
14、t-反应时间，min；
15、150.13-木糖分子量；
16、m-稀释酶液取样量，ml；
17、所述标准曲线由已知梯度浓度的葡萄糖与dns试剂反应后在490nm测定吸光度值，每个葡萄糖浓度值对应一个吸光度值，形成标准曲线。
18、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
19、本发明通过去除木聚糖中的还原糖，大大降低了检测背景值，从而提高检测准确性。同时，对于木聚糖的纯度要求大大降低，可以显著降低检测试剂成本。使用本发明的检测方法，可以准确检测出酶液中的真实木聚糖酶含量，检测误差远低于常规方法。
1.一种提高木聚糖酶活力检测准确性的方法，其特征在于，在常规的木聚糖酶检测方法基础上，对木聚糖进行预处理。
2.根据权利要求1所述的一种提高木聚糖酶活力检测准确性的方法，其特征在于，预处理步骤为：将预处理试剂和木聚糖溶液a反应并过滤得木聚糖溶液b。
3.根据权利要求2所述的一种提高木聚糖酶活力检测准确性的方法，其特征在于，所述预处理试剂为斐林试剂或班氏试剂。
4.一种提高木聚糖酶活力检测准确性的方法，其特征在于，包括以下步骤：