一种EDC残留量的检测方法和其应用与流程

本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种edc残留量的检测方法和其应用。

背景技术：

1、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edc·hcl)作为缩合剂，主要用于活化羧基，促使酰胺或酯的合成，在众多化学药物的合成工艺中作为缩合剂发挥重要作用。edc盐酸盐作为缩合剂，具有反应条件温和、产率高、选择性好、对环境污染小等优点，在有机合成各方面均得到广泛应用。但是其碳二亚胺的结构是潜在基因毒性物质的一类警示结构，合成工艺中使用edc·hcl会存在不同程度的edc残留，而edc盐酸盐溶液遇水不稳定，所以开发一种简便、且能准确定量edc(hcl)的分析检测方法对于保障药品质量进而保障患者用药安全具有十分重要的意义。

2、cn104833753a公开了一种的hplc-elsd检测edc残留的方法，采用反相c18柱，流动相分为水相和有机相，水相为甲酸水溶液或tfa水溶液，有机相为甲醇，雾化气温度为100℃～105℃，雾化器气体为氮气，气体流速：1.6-1.8l/min。该方法主要用于胶原蛋白膜样品中edc残留的检测且需对供试品进行预处理。

3、文献1(刘春玲等，uplc-ms/ms法检测雷迪帕韦原料药中潜在基因毒性杂质残留量)公开了uplc-ms/ms法直接测定雷迪帕韦原料药中微量edc的方法，该方法采用的色谱柱为agilent zorbax sb-c18柱(75mm×4.6mm，3.5μm)，流动相为甲醇-0.1％甲酸溶液(50:50)，质谱电喷雾离子源(esi)，供试品溶液的溶解溶剂为甲醇。

技术实现思路

1、本发明的目的之一在于提供一种高效液相色谱-质谱法分离检测edc残留的方法，所述高效液相色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为低分子量有机溶剂，质谱离子源为esi源。

2、本发明的优选技术方案中，所述待测物质、供试品、对照品的任一种用溶剂溶解或稀释，所述溶剂和/或稀释剂选自二甲基亚砜。

3、本发明的优选技术方案中，所述edc为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺或其盐酸盐。

4、本发明的优选技术方案中，所述低分子量有机溶剂包括低级醇或小分子醚中的任一种或其组合。

5、本发明的优选技术方案中，所述低级醇选自甲醇、乙醇中的任一种或其组合。

6、本发明的优选技术方案中，所述小分子醚为四氢呋喃。

7、本发明的优选技术方案中，所述低分子量有机溶剂还包括乙腈。

8、本发明的优选技术方案中，流动相中加入氨水调节ph值。

9、本发明的优选技术方案中，流动相中氨水含量为0.05-0.15％。

10、本发明的优选技术方案中，流动相中氨水含量为0.08-0.12％。

11、本发明的优选技术方案中，所述色谱柱规格为50*2.1mm、100*2.1mm、100*4.6mm、150*3mm、150*4.6mm、250*3mm、250*4.6mm中的任一种。

12、本发明的优选技术方案中，所述色谱柱填料粒径为1.7μm、1.8μm、2μm、2.μm、3μm、3.5μm或5μm中的任一种。

13、本发明的优选技术方案中，所述高效液相色谱的流速为0.1-0.8ml/min。

14、本发明的优选技术方案中，所述高效液相色谱的流速为0.1-0.5ml/min。

15、本发明的优选技术方案中，所述高效液相色谱的进样体积为1-20μl。

16、本发明的优选技术方案中，所述高效液相色谱的进样体积为1-10μl。

17、本发明的优选技术方案中，所述高效液相色谱的进样器温度为15-25℃。

18、本发明的优选技术方案中，所述高效液相色谱的柱温为25-50℃。

19、本发明的优选技术方案中，所述质谱的雾气化温度为200-500℃。

20、本发明的优选技术方案中，所述质谱的雾化气温度为250-350℃。

21、本发明的优选技术方案中，所述质谱的雾化气体为氮气。

22、发明的优选技术方案中，所述质谱的气体流速为2-10l/min。

23、发明的优选技术方案中，所述质谱的气体流速4-8l/min。

24、本发明的优选技术方案中，所述质谱法为正离子模式(esi+)。

25、本发明的优选技术方案中，所述质谱检测离子对为(m/z)156.1/86.1、156.1/58.0。

26、本发明的另一目的在于提供本发明edc残留量的检测方法用于化学药物的质量控制中的应用。

27、本发明的优选技术方案中，所述化学药物选自结构中带有酰胺键或酯键的化学药物。

28、本发明的优选技术方案中，所述化学药物选自原料药或其制剂。

29、本发明的优选技术方案中，所述化学药物包括但不限于阿加曲班、雷迪帕韦、瑞卢戈利、米拉贝隆中的任一种或其制剂。

30、除非另有说明，本发明涉及液体与液体之间的百分比时，所述的百分比为体积/体积百分比；本发明涉及液体与固体之间的百分比时，所述百分比为体积/重量百分比；本发明涉及固体与液体之间的百分比时，所述百分比为重量/体积百分比；其余为重量/重量百分比。

31、与现有技术相比，本发明具有下述有益技术效果：

32、1、采用二甲基亚砜作为溶剂，使得edc溶液稳定性更强，更利于分析检测活动的开展。

33、2、采用低分子量有机溶剂作为流动相，可有效避免引入水相流动相后，edc在液相色谱洗脱过程中遇水分解，导致检测结果不准确。

34、3、加入氨水使流动相体系呈碱性，增大了edc在c18色谱柱上的保留及与供试品的有效分离，保证edc完全进入质谱检测器而不受供试品主成分及有关物质的干扰。

35、4、本发明方法检测精密度高，可用于edc痕量的检测，有利于保障药品的质量，进而保障临床用药的安全性。

技术特征：

1.一种高效液相色谱-质谱法分离检测edc残留的方法，所述高效液相色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为低分子量有机溶剂，质谱离子源为esi源。

2.根据权利要求1所述的方法，所述待测物质、供试品、对照品的任一种用溶剂溶解或稀释，所述溶剂和/或稀释剂选自二甲基亚砜。

3.根据权利要求1所述的方法，所述edc为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺或其盐酸盐。

4.根据权利要求1所述的方法，所述低分子量有机溶剂包括低级醇或小分子醚中的任一种或其组合。

5.根据权利要求4所述的方法，所述低级醇选自甲醇、乙醇中的任一种或其组合。

6.根据权利要求4所述的方法，所述小分子醚为四氢呋喃。

7.根据权利要求4所述的方法，所述低分子量有机溶剂还包括乙腈。

8.根据权利要求1所述的方法，流动相中加入氨水调节ph值，所述流动相中氨水含量为0.05-0.15％。

9.根据权利要求1所述的方法，所述质谱法为正离子模式，所述质谱检测离子对为156.1/86.1、156.1/58.0。

10.一种edc残留量的检测方法用于化学药物的质量控制中的应用。

技术总结
本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种EDC残留量的检测方法和其应用。所述方法采用高效液相色谱‑质谱法，所述高效液相色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为低分子量有机溶剂，质谱离子源为ESI源。本发明方法检测精密度高，可用于EDC痕量的检测，有利于保障药品的质量，进而保障临床用药的安全性。

技术研发人员：李春侠,冀秀双,张丕馥
受保护的技术使用者：北京海美源医药科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11