一种植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法与流程

本发明涉及农药残留检测，具体涉及一种植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法。

背景技术：

1、植物提取物是以植物为原料，经过物理化学提取分离过程，定向获取和浓集植物中的某一种或多种有效成分，不改变其有效成分结构而形成的产品。植物提取物中含有复杂且丰富的有机活性组分，往往具有抗菌、杀菌、增强免疫力和抗氧化的双向调节功能，故植物提取物作为原料中的功能成分可应用于医药、日化和食品行业。根据海关统计数据显示，2019年植物提取物出口额为23.72亿美元，同比增长0.19％；出口量为86900吨，同比增长5.68％。作为全球植物提取物主要出口国，我国植物提取物出口额的不断攀升拉动了经济的发展，同时也暴露了隐藏的风险因素。农药残留超标、重金属超标、非法辐照、微生物超标等问题在进出口贸易中屡见不鲜。目前我国发布的关于植物提取物方面的团体标准、地方标准主要以产品标准为主，其中涉及的检验方法多以参照食品国家安全标准为主，且未涉及农药残留的检测。故目前的标准适用性不强，植物提取物基质复杂程度高于食品，检测方法不适用；国际贸易中关注的农药残留检测尚未涉及，造成监管盲区。随着国际市场对产品质量安全重视程度的逐年提升及我国植物提取物出口市场占比的增加，完善、规范植物提取物行业质量标准，从而有效检测和控制产品质量安全，已经迫在眉睫。

2、现阶段测定农药残留大多使用气相色谱-串联质谱和液相色谱-串联质谱检测，其前处理方法多采用spe固相萃取的方式，这种方法在处理样品时存在步骤繁杂，耗时长，检测效率低，工作人员与试剂接触多等问题，且不适用于植物提取物的检测。现有技术气相色谱-三重四级杆串联质谱法测定蔓越橘提取物中88种农药残留，该方法采用的是1％乙酸的丙酮-正己烷(1:1，v/v)提取，psa与gcb净化，三重四级杆-串联质谱测定，外标法进行定量，然而外标法定量无法消除基质效应影响。针对上述技术问题，本发明提供一种植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法。

技术实现思路

1、本发明提供了一种植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，解决了现有外标法定量无法消除基质效应影响、spe固相萃取的方式在处理样品时存在步骤繁杂，耗时长，检测效率低，工作人员与试剂接触多的技术问题，提供了一种适用于植物提取物农药残留检测的方法。

2、本发明提供了一种植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

3、s1：样品预处理：向植物提取物中加入水，涡旋混匀，静置后加入乙腈混匀，震荡提取，离心后，取上清液备用；

4、s2：净化液制备：向s1所述的上清液中加入n-丙基乙二胺粉末、石墨化碳、c18粉末和无水硫酸镁，涡旋混匀后离心处理，得到净化液；

5、s3：待检液制备：将s2得到的净化液于40℃氮气流中吹干，加入内标溶液，并加入乙腈复溶，涡旋混匀过微孔滤膜，得到待检液；

6、s4：样品测定：将s3所述的待检液采用气相色谱-串联质谱仪进行测定。

7、优选的，所述气相色谱的分析条件为：

8、色谱柱：db-5ms，所述色谱柱配制为：30m×0.25mm×0.25μm；

9、进样口温度：250℃；程序升温：初始温度为50℃，保持1min后，以25℃/min的速率升温至125℃，然后以10℃/min的速率升温至300℃，保持8.5min；不分流进样；载气：氦气，纯度≥99.999％，流速1.0ml/min。

10、优选的，所述质谱分析条件为：

11、离子化方式：ei；电离能70ev；离子源温度：230℃，接口温度：280℃，溶剂延迟3min。

12、优选的，s2中，所述上清液与n-丙基乙二胺粉末、石墨化碳、c18粉末和无水硫酸镁的液料比为1ml:20mg:6mg:20mg:100mg。

13、优选的，所述n-丙基乙二胺粉末、石墨化碳、c18粉末的粒径分别为40μm～60μm、40μm～120μm、40μm～60μm。

14、优选的，s2中，所述离心参数为4000r/min离心5min。

15、优选的，s1中，所述植物提取物为马鞭草提取物、万寿菊提取物、小米草提取物、苹果提取物、大豆提取物、荷叶提取物及灵芝提取物中的一种。

16、优选的，s1中，所述植物提取物、水和乙腈的比例为1g:5ml:5ml。

17、优选的，s3中，所述内标溶液为5mg/l的环氧七氯。

18、优选的，s1中，所述振荡提取时间为15min，所述离心参数为4000r/min下离心5min。

19、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

20、本发明提供的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法可适用于多种类复杂基质，农药残留高通量检测，采用psa(n-丙基乙二胺粉末)、c18和gcb(石墨化碳)共同作用进行净化，利用气相色谱-串联质谱的多反应监测(mrm)技术可实现对植物提取物中90种农药及其代谢物的定量及定性检测，填补技术空白。本发明提供的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，保鲜方式简单，适合推广应用。

技术特征：

1.一种植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，所述气相色谱的分析条件为：

3.根据权利要求1所述的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，所述质谱分析条件为：

4.根据权利要求1所述的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，s2中，所述上清液与n-丙基乙二胺粉末、石墨化碳、c18粉末和无水硫酸镁的液料比为1ml:20mg:6mg:20mg:100mg。

5.根据权利要求1所述的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，所述n-丙基乙二胺粉末、石墨化碳、c18粉末的粒径分别为40μm～60μm、40μm～120μm、40μm～60μm。

6.根据权利要求1所述的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，s2中，所述离心参数为4000r/min离心5min。

7.根据权利要求1所述的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，s1中，所述植物提取物为马鞭草提取物、万寿菊提取物、小米草提取物、苹果提取物、大豆提取物、荷叶提取物及灵芝提取物中的一种。

8.根据权利要求7所述的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，s1中，所述植物提取物、水和乙腈的比例为1g:5ml:5ml。

9.根据权利要求1所述的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，s3中，所述内标溶液为5mg/l的环氧七氯。

10.根据权利要求1所述的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，其特征在于，s1中，所述振荡提取时间为15min，所述离心参数为4000r/min下离心5min。

技术总结
本发明公开了一种植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，属于农药残留检测技术领域，本发明提供的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法可适用于多种类复杂基质，农药残留高通量检测，采用PSA(N‑丙基乙二胺粉末)、C18和GCB(石墨化碳)共同作用进行净化，利用气相色谱‑串联质谱的多反应监测(MRM)技术可实现对植物提取物中90种农药及其代谢物的定量及定性检测，填补技术空白。本发明提供的植物提取物中农药残留的高通量筛查检测方法，保鲜方式简单，适合推广应用。

技术研发人员：张璐,靳萌,何强,施妍婧,师亮,李子豪
受保护的技术使用者：西安海关技术中心
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13