用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂及其制备方法与流程

本申请涉及化学发光免疫分析领域，更具体地说，它涉及一种用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂及其制备方法。

背景技术：

1、随着生命科学的发展，体外诊断试剂的种类和用途也越来越多。化学发光免疫分析是继放射免疫分析技术、酶联免疫分析技术、荧光免疫分析和时间分辨免疫分析之后发展起来的一项高灵敏度和高特异性的免疫诊断方法。磁微粒化学发光技术是将化学发光免疫分析技术和磁纳米颗粒结合，所制备的包被抗体兼具选择特异性和高顺磁性。在外加磁场的作用下，可以快速分离基质中的目标物。

2、在磁微粒化学发光诊断试剂相关项目开展过程中，经常存在两个难题：

3、一是磁珠分散性差，易出现团聚现象，导致诊断试剂出现重复性差、灵敏度低的问题。且磁珠为铁磁性材料，具有自发磁化强度，因此其磁性行为对磁珠尺寸的大小有很强的依赖性，这就导致尺寸较大的磁珠在自然状态下更易沉降、板结。

4、二是血液样本中的化合物成分复杂，经前处理后，残留的组分往往对分析过程有干扰，表现出较高的背景值和较差的信噪比，进而影响检测结果的准确性。

5、鉴于此，本申请提供一种能够同时解决磁珠分散性差、检测灵敏度低的两大难题的磁珠保护剂，具有重要的实用价值。

技术实现思路

1、为了解决上述磁珠分散性差、检测灵敏度低，本申请提供一种用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂及其制备方法。

2、本申请提供的技术方案如下：

3、第一方面，本申请提供一种用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂，按质量百分数计，磁珠保护剂包括：

4、多羟基酮及衍生物0.1％～10％，碱性盐0.5％～2％，蛋白保护剂0.5％～2％，防腐剂0.05％～10％，余量为20-80mm的tris缓冲液；

5、多羟基酮及衍生物与碱性盐的质量比为2～20:1；

6、磁珠保护剂的粘稠度为2～6cp。

7、进一步地，上述多羟基酮及衍生物选自葡甘露聚糖、瓜尔豆胶、裂裥菌素、刺槐豆胶和阿拉伯半乳聚糖中的至少一种。

8、进一步地，上述碱性盐选自硅酸镁铝、磷酸钾、硫酸钠、碳酸氢钠和氯化钾中的至少一种。

9、进一步地，上述多羟基酮及衍生物为质量比为1:3～5的葡甘露聚糖和瓜尔豆胶；碱性盐为质量比3:1～3的硅酸镁铝和氯化钾。

10、进一步地，上述tris缓冲液的ph为7～8，tris缓冲液中含有吐温-20。

11、进一步地，上述tris缓冲液中含有0.2wt％～0.4wt％的三羟甲基氨基甲烷、0.5wt％～1.5wt％的氯化钠和0.4wt％～0.8wt％的吐温-20。

12、进一步地，上述蛋白保护剂为牛血清白蛋白、甘露醇和赖氨酸中的至少一种。

13、进一步地，上述防腐剂选自青霉素、g霉素和硫柳汞钠中的至少一种。

14、第二方面，本申请还提供一种上述用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂的制备方法，包括：

15、按照质量百分比，将防腐剂、蛋白保护剂、多羟基酮及衍生物以及碱性盐加入到20-80mm的tris缓冲液，混合后过滤。

16、进一步地，tris缓冲液中含有0.4wt％～0.8wt％吐温-20；该制备方法包括：

17、将三羟甲基氨基甲烷和氯化钠与水混合后，加入吐温-20和防腐剂，再用浓盐酸调节ph至7～8，得到含有防腐剂的tris缓冲液；

18、再将蛋白保护剂、多羟基酮及衍生物、碱性盐添加到含有防腐剂tris缓冲液中，过滤。

19、综上所述，本申请具有以下有益效果：

20、本申请提供的磁珠保护剂中，通过多羟基酮及衍生物与碱性盐离子之间的协同作用，可改善包被磁珠的分散性，减少磁珠的板结程度。同时，通过多羟基酮及衍生物中的羟基与杂蛋白间的弱相互作用，增强了磁珠分散性，降低杂蛋白与目标抗体结合的可能性，减少化学发光免疫分析中的非特异性结合。多羟基酮及衍生物还能够封闭磁珠表面的未结合位点，提高磁珠的分散性，进一步降低裸露磁珠带来的背景值，从而提高化学发光诊断试剂的灵敏度和特异性。再通过蛋白保护剂和防腐剂共同作用，可以抑制磁珠保护剂中的细菌滋生，显著提高诊断试剂的稳定性和储存周期。

21、此外，该磁珠保护剂的粘稠度为2～6cp，其中的碱性盐和多羟基酮及衍生物的协同作用，即盐离子与蛋白质表面的带电氨基酸侧链相互作用，改变蛋白质-多羟基酮及衍生物相互作用，从而影响溶液粘度。使得该保护剂呈现可流动的胶水状，有效解决了现有磁微粒化学发光诊断试剂中包被磁珠的易沉降、分散性差等问题，可提高包被磁珠的储存稳定性，起到直接性保护作用。

技术特征：

1.一种用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂，其特征在于，按质量百分数计，所述磁珠保护剂包括：

2.根据权利要求1所述的用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂，其特征在于，所述多羟基酮及衍生物选自葡甘露聚糖、瓜尔豆胶、裂裥菌素、刺槐豆胶和阿拉伯半乳聚糖中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂，其特征在于，所述碱性盐选自硅酸镁铝、醋酸钠、醋酸钾、碳酸氢钠和磷酸钠中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂，其特征在于，所述多羟基酮及衍生物为质量比为1:3~5的葡甘露聚糖和瓜尔豆胶；所述碱性盐为质量比3:1~3的硅酸镁铝和氯化钾。

5.根据权利要求1所述的用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂，其特征在于，所述tris缓冲液的ph为7~8，所述tris缓冲液中含有吐温-20。

6.根据权利要求5所述的用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂，其特征在于，所述tris缓冲液中含有0.2 wt%~0.4 wt%的三羟甲基氨基甲烷、0.5 wt%~1.5 wt%的氯化钠和0.4wt%~0.8wt%的吐温-20 。

7.根据权利要求1所述的用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂，其特征在于，所述蛋白保护剂为牛血清白蛋白、甘露醇和赖氨酸中的至少一种。

8.根据权利要求1所述的用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂，其特征在于，所述防腐剂选自青霉素、g霉素和硫柳汞钠中的至少一种。

9.一种如权1~8任一项所述的用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂的制备方法，其特征在于，包括：

10.根据权利要求9所述的用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂的制备方法，其特征在于，所述tris缓冲液中含有0.4wt%~0.8wt%吐温-20；

技术总结
本申请涉及化学发光免疫分析领域，具体公开了一种用于磁微粒化学发光法的磁珠保护剂及其制备方法，该磁珠保护剂按质量百分数计包括：多羟基酮及衍生物0.1%~10%，碱性盐0.5%~2%，蛋白保护剂0.5%~2%，防腐剂0.05%~10%，余量为20‑80mM的Tris缓冲液；多羟基酮及衍生物与碱性盐的质量比为2~20:1；磁珠保护剂的粘稠度为2~6 cP。其制备方法是将上述组分混合起来。该磁珠保护剂，通过多羟基酮及衍生物与碱性盐离子之间的协同作用，可改善包被磁珠的分散性，减少磁珠的板结程度。同时，能够提高化学发光诊断试剂的灵敏度和特异性。

技术研发人员：张迪,张伟,雷光强
受保护的技术使用者：北京华大吉比爱生物技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12