一种观察和/或统计植物叶片腺毛的方法

本发明属于显微观察，具体涉及一种观察和/或统计植物叶片腺毛的方法。

背景技术：

1、芳香药用植物的香气的主要来源器官是叶，且叶片表面覆盖有大量非腺毛和腺毛，其中，腺毛是植物重要分泌结构，与植物香气释放、生物抗性和芳香物质积累具有密切关联，因此观察植物叶腺毛的形态和分布密度具有重要的生产实践和研究意义。但是，有些芳香药用植物叶片表面覆盖的非腺毛又长又密，且叶片呈波浪起伏，以上两方面的干扰导致长期以来无法准确、充分地观察植物的腺毛形态和密度。

2、关于艾纳香表皮毛的观察，为了排除非腺毛的干扰，现有技术在阴凉处通风一段时间，使非腺毛干枯收缩。该方法中，非腺毛虽然收缩，但依然存在，不论是采用普通光学体式显微镜、荧光显微镜还是扫描电镜观察，非腺毛的遮挡仍然对腺毛观察和统计造成严重干扰。在非腺毛的密度很大、完全覆盖的情况下，即使非腺毛收缩了，仍然遮挡视野，无法看见腺毛；且艾纳香叶片波浪起伏，普通透镜的景深小于叶片起伏范围，造成部分视野不清晰，无法完整统计视野内腺毛密度的问题；阴干叶片后现有技术还利用压环对叶片进行压平，不仅干燥过程会加剧皱缩，增加了压平的难度，而且造成叶片脆化，使叶片在强行压平的过程中破碎，无法得到完全清晰的视野。另有采用场发射扫描电镜观测方法来获取清晰的视野的技术，然而扫描电镜价格昂贵，样品前处理步骤繁琐，存在一定技术门槛，且需使用各种试剂和喷金，在时间、人力、物力成本都很高的情况下，虽可得到清晰视野，但无法解决非腺毛遮挡的问题，也存在根本性缺陷。

3、因此，目前仍缺乏一种高效的观察植物叶腺毛的形态和分布密度的方法。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种观察和/或统计植物叶片腺毛的方法。本发明所述方法能够很好地解决叶片不平整的问题，且还能较好地解决非腺毛遮挡干扰视野的问题，实现植物叶片形态和密度的高效观察。

2、本发明提供了一种观察和/或统计植物叶片腺毛的方法，包括以下步骤：

3、将植物的叶片贴平，干燥，使用光学体式显微镜进行观察和/或统计。

4、优选的是，所述植物的叶片上存在腺毛和非腺毛，所述植物包括艾纳香、鼠尾草、烟草或裸花紫珠。

5、优选的是，叶片选取自叶片中部叶脉附近区域。

6、优选的是，所述贴平包括使用双面胶将植物的叶片粘贴于平面上。

7、优选的是，所述平面包括载玻片的平面。

8、优选的是，所述干燥包括阴干。

9、优选的是，所述阴干的时间为2～48h。

10、优选的是，所述干燥后还包括粘除非腺毛。

11、优选的是，所述粘除非腺毛包括使用胶带粘除非腺毛。

12、优选的是，使用光学体式显微镜进行观察，包括：

13、使用光学体式显微镜进行图片的拍摄后，结合景深扩展功能进行合成后观察；或直接使用超景深光学体式显微镜进行拍摄后观察。

14、本发明提供了一种观察和/或统计植物叶片腺毛的方法。本发明采用先贴平，再干燥，然后进行光学体式显微镜观察，能够实现叶片腺毛的高效观察和统计。在观察时，腺毛密度中等或低的时候，不需要用胶带粘除非腺毛，即可直接统计。在观察时，若发现表皮毛密度大，非腺毛严重遮挡视野的时候，本发明可以使用胶带粘除非腺毛，暴露出腺毛，即可统计腺毛密度；若观察时发现即使经过贴平和阴干，叶片还是有起伏，导致视野部分模糊的时候，可以结合景深扩展，或直接利用超景深体式显微镜拍摄，即可获得完全清晰的照片。本发明所述方法能够很好地解决叶片不平整的问题，且还能较好地解决非腺毛遮挡干扰视野的问题，试验操作过程使用到的材料简单易得，且本发明方法对仪器设备要求低，只需要一台光学体式显微镜即可实现。

技术特征：

1.一种观察和/或统计植物叶片腺毛的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物的叶片上存在腺毛和非腺毛，所述植物包括艾纳香、鼠尾草、烟草或裸花紫珠。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，叶片选取自叶片中部叶脉附近区域。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述贴平包括使用双面胶将植物的叶片粘贴于平面上。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述平面包括载玻片的平面。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干燥包括阴干。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述阴干的时间为2～48h。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干燥后还包括粘除非腺毛。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述粘除非腺毛包括使用胶带粘除非腺毛。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，使用光学体式显微镜进行观察，包括：

技术总结
本发明属于显微观察技术领域，涉及一种观察和/或统计植物叶片腺毛的方法。本发明所述方法包括以下步骤：将植物叶片贴平，干燥，使用光学体式显微镜进行观察和/或统计。本发明所述方法能够很好地解决叶片不平整的问题，且还能较好地解决非腺毛遮挡干扰视野的问题，实现植物叶片形态和密度的高效观察。

技术研发人员：陈晓鹭,罗雪婷,陈振夏,罗海燕,谌婉赟,黎行飞,王丹,黄梅,胡璇,元超,于福来
受保护的技术使用者：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15