一种T淋巴细胞亚群的分析方法与流程

本发明属于生物，尤其涉及一种t淋巴细胞亚群的分析方法。

背景技术：

1、机体的免疫功能是由各类型的细胞群体共同完成的，其中淋巴细胞亚群尤为重要。淋巴细胞亚群的测定，主要用于了解恶习肿瘤、遗传性免疫缺陷、重症病毒感染、自身免疫病等患者机体的免疫功能是否处于平衡状态。t淋巴细胞参与机体细胞免疫反应，并在免疫应答中起重要调节作用的免疫细胞。正常情况下t细胞及其亚群的数目在周围组织中相对稳定，但机体免疫系统发生变化，各类免疫细胞尤其是t淋巴细胞的数量比例及其功能也随之发生相应的变化。

2、t淋巴细胞亚群传统的检测方法是流式细胞术，其为一种对处在流液中的细胞或者其他生物颗粒如细菌等逐个进行多参数的快速定量分析和分选的技术。随着市场需求增加，流式细胞仪的种类和功能在不断的丰富和发展，但是由于我国流式细胞仪研发起步较晚，国外企业研发能力较强，技术水平成熟，早期国内市场需求主要依赖进口。目前，医院临床检验和科研院所所使用的流式细胞仪多为进口，设备成本较为高昂。

3、细胞的形态特征和特异性参数的检测对于相关疾病的诊断有着重要的参考价值，而传统的流式细胞术是利用待测细胞的荧光强度和前向散射光强度等信息的散点图间接进行细胞分类和计数，该方法获得的细胞信息是有限的，缺乏细胞形态和细胞结构等相关信息，捕获的细胞特征较少，不利于识别、复查和回顾。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明的目的在于提供一种t淋巴细胞亚群的分析方法，以解决上述背景技术中所提到的流式细胞术获得的细胞信息有限，缺乏细胞形态和细胞结构等相关信息的问题。

2、为实现以上发明目的，采用的技术方案为：

3、本发明提供了一种t淋巴细胞亚群的分析方法，包括：

4、将待测t淋巴细胞样本进行荧光标记处理；

5、将经过荧光标记后的所述待测t淋巴细胞样本的溶液注入定制的计数板中进行富集处理；

6、对经过富集处理后的所述待测t淋巴细胞样本进行图像采集处理，以获得t淋巴细胞图像；

7、对所述t淋巴细胞图像进行智能处理，以输出亚群细胞数与细胞总数的比例结果。

8、本发明进一步设置为：所述对经过富集处理后的所述待测t淋巴细胞样本进行图像采集处理，以获得t淋巴细胞图像包括：

9、待悬浮的所述t淋巴细胞富集到所述计数板的底部后，由成像光路对所述t淋巴细胞自动采集图像，得到t淋巴细胞图像。

10、本发明进一步设置为：所述成像光路为荧光显微成像光路。

11、本发明进一步设置为：所述富集处理的方法包括自然沉降法和加速离心法。

12、本发明进一步设置为：所述对所述t淋巴细胞图像进行智能处理，以输出亚群细胞数与细胞总数的比例结果包括：

13、预设深度学习模型；

14、将所述t淋巴细胞图像置入所述深度学习模型中进行深度学习处理，以输出亚群细胞数与细胞总数的比例结果。

15、本发明进一步设置为：所述深度学习处理包括：

16、对所述t淋巴细胞图像进行细胞分类识别处理。

17、本发明进一步设置为：所述深度学习处理还包括：

18、对经过细胞分类识别处理的t淋巴细胞图像进行计数处理。

19、本发明进一步设置为：所述t淋巴细为h9人t淋巴细胞。

20、本发明进一步设置为：所述荧光标记处理所用的检测抗体与所述h9人t淋巴细胞的溶液配比为1:20。

21、本发明进一步设置为：所述t淋巴细为人血液样本中的t淋巴细胞。

22、综上所述，本发明公开了一种t淋巴细胞亚群的分析方法，相较于传统的流式细胞术检测方法，本方法具有准确性高，成本低等优点，并且具有对细胞形态特征及特异性参数可以同时进行观测分析的有益效果，为实际工作当中的临床疾病诊断提供了更多具有价值的细胞信息。

技术特征：

1.一种t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于,包括：

2.如权利要求1所述的t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于，所述对经过富集处理后的所述待测t淋巴细胞样本进行图像采集处理，以获得t淋巴细胞图像包括：

3.如权利要求2所述的t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于，所述成像光路为荧光显微成像光路。

4.如权利要求1所述的t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于，所述富集处理的方法包括自然沉降法和加速离心法。

5.如权利要求1所述的t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于，所述对所述t淋巴细胞图像进行智能处理，以输出亚群细胞数与细胞总数的比例结果包括：

6.如权利要求5所述的t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于，所述深度学习处理包括：

7.如权利要求6所述的t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于，所述深度学习处理还包括：

8.如权利要求1～7任一项所述的t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于，所述t淋巴细为h9人t淋巴细胞。

9.如权利要求8任一项所述的t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于，所述荧光标记处理所用的检测抗体与所述h9人t淋巴细胞的溶液配比为1:20。

10.如权利要求1～7任一项所述的t淋巴细胞亚群的分析方法，其特征在于，所述t淋巴细为人血液样本中的t淋巴细胞。

技术总结
本发明属于生物技术领域，公开了一种T淋巴细胞亚群的分析方法，通过对荧光标记后的待测T淋巴细胞进行富集处理，利用荧光显微成像光路自动采集富集后的T淋巴细胞图像，再结合人工智能算法对细胞图片中的细胞进行识别、分类和计数处理，最后输出亚群细胞数与细胞总数的比例结果；相较于传统的流式细胞术检测方法，本方法具有准确性高，成本低等优点，并且具有对细胞形态特征及特异性参数可以同时进行观测分析的有益效果。

技术研发人员：宋盟春,申志远,何永红
受保护的技术使用者：清华珠三角研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14