本发明属于荧光染色液，具体地，涉及一种妇科荧光染色液及其制备方法和应用。
背景技术：
1、阴道炎症是较常见的临床病症，可引起阴道分泌物增多和瘙痒，影响女性身心健康；同时阴道菌群的失调会使得宫腔微生态改变，可导致子宫内膜的损伤进而引起多种妇科疾病，严重时可导致女性不孕、流产等的发生。通过阴道分泌物对炎症疾病作出快速准确的诊断，是临床治疗的重要前提。阴道分泌物常规检查是目前临床最常用的一种检验项目，在门诊检测中，通常采用浸于0.9%氯化钠溶液涂湿片直接镜检，较为快速便捷。但是，该湿片镜检法是检验师借助显微镜观察，存在一定的主观因素，且观察后标本直接扔掉，不利于日后溯源。也有医院采用全自动机器分析分泌物常规项目，但机器多根据细胞或细菌的大小来分析霉菌和滴虫，使得其漏检率和误诊率较高。干化学酶法在阴道病原体的检查中也有一定应用，但其时效性不及传统湿片，且干扰因素也较多。而目前较公认的革兰染色法相对准确，但比较耗时，且与每个检验工作者的操作手法有一定关系，不适宜在门诊检测推广。因此，快速且准确的阴道分泌物检测方法也得到越来越多的关注，尤其是门诊检验。荧光染色法是新近开始的一种借助荧光染色液和荧光显微镜可直接镜检经荧光标记的染色方法，且可保存图片与报告一同发出以供临床直接查看，该方法除了在病理科得到一定使用，目前在抗核抗体的检验和真菌的检测方面也得到了一定的应用。
2、但目前，关于该项技术在阴道分泌物常规检测中的应用和效果的报道极少，且市面上现有的荧光染色液其成分中的荧光剂显色不明显、稳定性弱，不能很好满足行业现实需求，因此，提供一种能解决该技术问题的荧光染色液显得尤为必要。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种妇科荧光染色液及其制备方法和应用，本发明制备的妇科荧光染色液主要利用诱导剂、荧光剂、稳定剂和抗荧光衰减剂相辅相成，实现对细胞和微生物的诱导标记与标记，且标记有效、染色明显，能在荧光显微镜下清晰观察到上皮细胞、白细胞、线索细胞、真菌、细菌以及滴虫的具体形态。其中，本发明在诱导剂的选择中采用了二硫苏糖醇和羟基苯胺，二者协同作用，有效诱导了上皮细胞、线索细胞、真菌、细菌、霉菌和毛滴虫等与荧光剂进行准确、明显、高效的结合标记；在稳定剂的选择中加入了乙二胺四乙酸二钠和三乙烯二胺作为荧光染色液中的稳定剂，提高了荧光剂在荧光染色液中的稳定性。解决了妇科荧光染色液现有技术中存在的荧光剂显色不明显、稳定性弱的问题。
2、本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
3、一种妇科荧光染色液，每升所述妇科荧光染色液包括如下成分及含量：
4、诱导剂 1-3g/l
5、荧光剂 0.1-1.2g/l
6、稳定剂 0.1-0.6g/l
7、抗荧光衰减剂 5-55g/l
8、抑菌剂 1-10g/l
9、缓冲溶液 0.2-250g/l
10、纯化水 余量。
11、进一步地，所述诱导剂包括二硫苏糖醇和羟基苯胺；
12、所述荧光剂包括异硫氰酸荧光素、3，6-二（二甲基胺）吖啶、四甲基异硫氰酸罗丹明-链霉亲和素、4'，6-二脒基-2-苯基吲哚、溴化乙锭中的一种；
13、所述稳定剂包括乙二胺四乙酸二钠和三乙烯二胺；
14、所述抗荧光衰减剂包括成分a和成分b，所述成分a为甘油，成分b为对苯二胺、1，4-二偶氮双环[2，2，2]-辛烷、对羟基苯甲酸甲酯、n-丙基没食子酸盐中的一种；
15、所述抑菌剂包括硫柳汞、叠氮钠、proclin 300液体生物防腐剂、庆大霉素中的一种；
16、所述缓冲溶液包括磷酸盐缓冲液和乙酸-乙酸钠缓冲溶液中的一种。
17、进一步地，所述二硫苏糖醇和羟基苯胺的质量比为1-1.5:1。
18、进一步地，所述乙二胺四乙酸二钠和三乙烯二胺的质量比为2-3:1-1.5。
19、进一步地，所述成分a和成分b的质量比为1:1-1.2。
20、进一步地，所述磷酸盐缓冲液由磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成，所述磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的质量浓度分别为0.1-50g/l和0.1-200g/l。
21、进一步地，所述乙酸-乙酸钠缓冲溶液由乙酸和乙酸钠组成，所述乙酸和乙酸钠的质量浓度分别为0.01-100g/l和0.1-100g/l。
22、进一步地，所述妇科荧光染色液的制备方法，包括如下步骤：
23、取300-500ml纯化水，然后加入诱导剂、荧光剂、稳定剂、抗荧光衰减剂、抑菌剂和缓冲溶液搅拌溶解，接着用纯化水定容至1l，即得妇科荧光染色液。
24、进一步地，所述妇科荧光染色液的应用，包括在妇科阴道分泌物、宫颈脱落细胞样本中的应用。
25、本发明的有益效果：
26、（1）本发明制备的妇科荧光染色液主要利用诱导剂、荧光剂、稳定剂和抗荧光衰减剂相辅相成，实现对细胞和微生物的诱导标记与标记，且标记有效、染色明显，能在荧光显微镜下清晰观察到上皮细胞、白细胞、线索细胞、真菌、细菌以及滴虫的具体形态。
27、（2）本发明采用了二硫苏糖醇和羟基苯胺充当诱导剂，二者协同作用，有效诱导了上皮细胞、线索细胞、真菌、细菌、霉菌和毛滴虫等与荧光剂进行准确、明显、高效的结合标记。具体来说，羟基苯胺可以将细胞和微生物中物质还原为更亲水的形式，使化学反应更可控，而二硫苏糖醇能够与细胞和微生物组成体系中的硫醇基形成配合物的分子，进一步增加了物质的还原性，同时为荧光剂的标记提供更多结合位点，当二者共同使用时，产生协同作用，增加了与荧光剂的准确、快速结合能力。
28、（3）本发明加入了乙二胺四乙酸二钠和三乙烯二胺作为荧光染色液中的稳定剂，提高了荧光剂在荧光染色液中的稳定性，更有效协助了荧光剂与上皮细胞、线索细胞、真菌、细菌、霉菌和毛滴虫等的准确标记。这是因为，乙二胺四乙酸二钠可以作为荧光染色液体系中的螯合剂，通过与荧光剂形成配位键来稳定体系中结合的荧光物质，在具有一定稳定性的基础上，辅以三乙烯二胺，以其还原性减少荧光剂受氧化而引起的衰减和损失，进一步加强了荧光剂在荧光染色液中的稳定性。
29、（4）本发明选用异硫氰酸荧光素、3，6-二（二甲基胺）吖啶、四甲基异硫氰酸罗丹明-链霉亲和素、4'，6-二脒基-2-苯基吲哚、溴化乙锭中的一种作为荧光剂，配合抗荧光衰减剂，使荧光染色液具有极好的光强度。这是因为选用的荧光剂均具有较高的强度和良好的光稳定性，能够实现亲和染色，在此基础上搭配抗荧光衰减剂，能有效增强和稳定荧光信号。
1.一种妇科荧光染色液，其特征在于，每升所述妇科荧光染色液包括如下成分及含量：
2.根据权利要求1所述的一种妇科荧光染色液，其特征在于，所述诱导剂包括二硫苏糖醇和羟基苯胺；
3.根据权利要求2所述的一种妇科荧光染色液，其特征在于，所述二硫苏糖醇和羟基苯胺的质量比为1-1.5:1。
4.根据权利要求2所述的一种妇科荧光染色液，其特征在于，所述乙二胺四乙酸二钠和三乙烯二胺的质量比为2-3:1-1.5。
5.根据权利要求2所述的一种妇科荧光染色液，其特征在于，所述成分a和成分b的质量比为1:1-1.2。
6.根据权利要求2所述的一种妇科荧光染色液，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液由磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成，所述磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的质量浓度分别为0.1-50g/l和0.1-200g/l。
7.根据权利要求2所述的一种妇科荧光染色液，其特征在于，所述乙酸-乙酸钠缓冲溶液由乙酸和乙酸钠组成，所述乙酸和乙酸钠的质量浓度分别为0.01-100g/l和0.1-100g/l。
8.一种如权利要求1-7任一项所述的妇科荧光染色液的制备方法，其特征在于，所述制备方法，包括如下步骤：
9.一种如权利要求1-7任一项所述的妇科荧光染色液的应用，其特征在于，所述应用，包括在妇科阴道分泌物、宫颈脱落细胞样本中的应用。