一种复方香薷水指纹图谱的构建方法及其应用与流程

本发明属于中药制剂质量控制，具体涉及一种复方香薷水指纹图谱的构建方法及其应用。

背景技术：

1、中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。它可以较全面地反映药材所含化学成分的种类和数量，有效地体现中药成分的整体性和综合作用，以其快速、准确等特点已被广泛运用于中药分析鉴定和质量控制等方面。气相指纹图谱是中药质量控制研究的热点，适用于中药制剂的挥发成分的质量监控。

2、复方香薷水是由皱叶香薷、歪叶蓝、广藿香、紫苏叶、厚朴、豆蔻、木香、生姜、甘草9味药材组成的中药制剂。具有解表化湿，醒脾和胃的功效，用于外感风寒，内伤暑湿，寒热头痛，脘腹痞满胀痛，恶心欲吐，肠鸣腹泻。复方香薷水收载于国家药品监督管理局药品标准ybz00542022，现行标准仅收载了理化鉴别、厚朴液相鉴别、木香薄层鉴别等，处方中的重点药味未得到有效监控；此外，处方中的皱叶香薷、广藿香、紫苏叶、豆蔻、木香、厚朴、生姜等7个药味均含挥发性成分，含挥发性成分的药味较多，占比总处方药材量90.7％，制备工艺中也对这些药味进行了挥发油提取并将挥发油加入制剂中，因此，为了更加科学全面地表征复方香薷水内在质量，严格控制其质量的稳定性，提升产品技术水平，有必要对复方香薷水中挥发性成分(如豆蔻中的桉油精、皱叶香薷中的β-去氢香薷酮、紫苏叶中的紫苏酮、广藿香中的百秋李醇、木香中的去氢木香烃内酯、厚朴中的厚朴酚和和厚朴酚)进行监测，并建立复方香薷水气相指纹图谱，对产品质量控制具有较大的意义，能够为复方香薷水提供一种全面的质量控制方法。

技术实现思路

1、针对目前复方香薷水质量评价系统不能全面反映和控制产品质量，本发明的目的在于提供一种复方香薷水指纹图谱的构建方法。该方法实现了对复方香薷水中多个指标成分同时测定的目的，弥补了现行标准无法全面反映复方香薷水质量状况的不足。本发明的目的通过以下技术方案实现：

2、本发明提供了一种复方香薷水指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：

3、1)供试品溶液的制备：取复方香薷水样品，采用有机溶剂进行提取，获得供试品溶液；

4、2)对照品溶液配制：取桉油精、紫苏酮、百秋李醇、去氢木香烃内酯、厚朴酚、和厚朴酚适量，各自加入有机溶剂溶解并定容，配制成对照品溶液；

5、3)将上述供试品溶液和对照品溶液注入气相色谱仪，测定，并记录色图谱，用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2012版对复方香薷水样品的图谱进行处理获得复方香薷水的指纹图谱，其中，所述气相色谱检测的条件为：

6、色谱柱为弹性石英毛细管柱，以交联5％苯基甲基聚硅氧烷或氰丙基聚硅氧烷为固定相；

7、柱温采用程序升温，进样口温度为200～250℃，检测器温度为260～290℃，气体流速为1.0～2.0ml/min，分流比为(5～15)：1，进样量为0.3～1μl；优选地，进样口温度为230℃，检测器温度为280℃；气体流速为1.0～2.0ml/min。优选为1.5ml/min；分流比为10：1；进样量为0.3～1μl，优选1μl。

8、在一些实施例中，采用的升温程序为：初始温度为80～120℃，保持3～8分钟，以每分钟3～10℃的速率升温至160～200℃，再以每分钟5～8℃的速率升温至220～260℃，保持5～15分钟。

9、优选地，采用的升温程序为：初始温度为80～120℃，保持3～8分钟，以每分钟3～10℃的速率升温至150～200℃，保持0～2分钟，再以每分钟4～8℃的速率升温至220～260℃，保持5～15分钟。

10、更为优选地，采用的升温程序为：初始温度为100℃，保持5分钟，以每分钟3℃的速率升温至160℃，再以每分钟8℃的速率升温至240℃，保持10分钟。

11、采用的程序升温还可以为：初始温度为100℃，保持8分钟，以每分钟4℃的速率升温至150℃，保持2分钟，再以每分钟4℃的速率升温至240℃，保持15分钟。

12、在一些实施例中，步骤1)和步骤2)中所述有机溶剂各自独立地选自乙醚和正己烷，优选正己烷。

13、在一些实施例中，所述提取方法为液液萃取法。

14、在一些实施例中，所述色谱柱选自agilent hp-5色谱柱(30m×0.32mm，0.25μm)、db-wax色谱柱(30m×0.32mm，0.25μm)、agilent db-1701色谱柱(30m×0.25mm，0.25μm)。

15、在一些实施例中，所述气相色谱条件中采用的检测器为火焰离子化检测器(fid)。

16、在一些实施例中，本发明利用gc-ms技术与对照品对比并结合对照品保留时间以及质谱的分子离子峰、裂解碎片等信息对色谱峰进行鉴定。

17、在一些实施例中，步骤2)所述对照品溶液(桉油精、紫苏酮、百秋李醇、去氢木香烃内酯、厚朴酚与和厚朴酚)的浓度为80～120μg/ml，优选100～120μg/ml，优选100μg/ml。

18、在一些实施例中，所述指纹图谱含有11个共有峰，其中，1号峰为桉油精、4号峰为紫苏酮、7号峰为百秋李醇、9号峰为去氢木香烃内酯、10号峰为厚朴酚、11号峰为和厚朴酚；以百秋李醇对照品色谱峰为参照峰，各个色谱峰的相对保留时间为：1号峰0.1628、2号峰0.3022、3号峰0.3132、4号峰0.3746、5号峰0.4531、6号峰0.6336、7号峰1.0、8号峰1.0429、9号峰1.3375、10号峰1.4646、11号峰1.5244，各共有峰相对保留时间的偏差范围为±10％。

19、本发明首次构建了复方香薷水的气相指纹图谱，针对复方香薷水所含有效成分的结构特点及理化性质，对供试品的处理方法、气相色谱条件、检测波长、柱温、流速等分析条件进行了筛选和优化，完成了系统的方法学验证。所得复方香薷水指纹图谱分离度高、峰形好，各特征色谱峰均实现了良好的基线分离，稳定性好、特征峰多，能全面、准确地评价复方香薷水挥发性成分的质量，适用于对复方香薷水产品质量的控制。

技术特征：

1.一种复方香薷水指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)和步骤2)中所述有机溶剂各自独立地选自乙醚和正己烷。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤1)所述提取方法为液液萃取法。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱选自agilent hp-5色谱柱、db-wax色谱柱、db-1701色谱柱。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，气相色谱使用的检测器为火焰离子化检测器(fid)。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液的浓度为80～120μg/ml。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采用的升温程序为：初始温度为100℃，保持5分钟，以每分钟3℃的速率升温至160℃，再以每分钟8℃的速率升温至240℃，保持10分钟。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采用的升温程序为：初始温度为100℃，保持8分钟，以每分钟4℃的速率升温至150℃，保持2分钟，再以每分钟4℃的速率升温至240℃，保持15分钟。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述指纹图谱含有11个共有峰，其中，1号峰为桉油精、4号峰为紫苏酮、7号峰为百秋李醇、9号峰为去氢木香烃内酯、10号峰为厚朴酚、11号峰为和厚朴酚；以百秋李醇对照品色谱峰为参照峰，各个色谱峰的相对保留时间为：1号峰0.1628、2号峰0.3022、3号峰0.3132、4号峰0.3746、5号峰0.4531、6号峰0.6336、7号峰1.0、8号峰1.0429、9号峰1.3375、10号峰1.4646、11号峰1.5244，各共有峰相对保留时间的偏差范围为±10％。

10.根据权利要求1-9中任一项所述方法得到的指纹图谱在复方香薷水质量控制中的用途。

技术总结
本发明具体公开了一种复方香薷水指纹图谱的构建方法及其应用。本发明所构建的复方香薷水指纹图谱，实现了同时检测复方香薷水中多个挥发性成分的目的，改变了单一指标成分进行质量控制的技术手段，能够能较全面地评价复方香薷水的挥发性成分质量，适用于对复方香薷水产品质量的控制。

技术研发人员：韩锋,周熙,马莉,李雪银,颜燕萍,莫毛燕,段福先,王娜,郭秋云,杨文谦,李捍雄
受保护的技术使用者：广州市联瑞制药有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14