一种长链脂肪酸顺反异构体的HPLC检测方法与流程

本发明涉及到一种长链脂肪酸顺反异构体的hplc检测方法。

背景技术：

1、长链脂肪酸包括亚麻酸（c18：3）、油酸（18：1）、亚油酸（c18：2）等，可分为两种结构：顺式结构和反式结构，分别称为顺式脂肪酸和反式脂肪酸。其中反式脂肪酸由于对人体健康存在风险而备受关注。

2、长链脂肪酸顺反异构体的传统分析方法采用气相色谱法，由于长链脂肪酸的极性不易挥发，首先要进行复杂的样品处理，用衍生试剂如乙酰氯、五氟基苄(pfb)等将长链脂肪酸衍生成易挥发的非极性衍生物，衍生试剂带有一定的危险性和毒性，操作过程复杂，重现性差；要采用专用毛细管色谱柱，柱子柱效下降快，使用寿命短，成本高；检测器有的要采用电化学检测器（nic）甚至nci-ms，配置高，普适性低。

3、为此，提供一种长链脂肪酸顺反异构体检测可靠、经济的解决方案是亟待解决的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种长链脂肪酸顺反异构体hplc检测方法，主要解决现有气相色谱检测方法存在的样品需要前处理，环节复杂、重现性差等技术问题。

2、本发明技术方案为：长链脂肪酸顺反异构体的hplc检测方法；包括以下步骤：

3、步骤一，准备测量的试剂：测量的试剂包括色谱纯乙腈、甲醇，超纯水，分析纯试剂：磷酸、乙酸和三氟乙酸；

4、步骤二、样品溶液的配制，称取试样置于容量瓶中，加入乙腈，摇匀，用乙腈定容，用0.45μm聚丙烯有机滤膜过滤；

5、步骤三，进行高效液相色谱测定： 色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（柱长 250mm，内径 4.6mm，粒径 5μm）；以质量百分浓度0.1%磷酸水溶液:乙腈=95:5为流动相；流速为每分钟 1.0ml；柱温为 25℃；检测波长为 205nm。理论塔板数应不低于 3000。

6、本发明的有益效果是：采用了一种长链脂肪酸顺反异构体的hplc检测方法。该方法样品处理不需要用有毒的衍生试剂衍生，操作简便、快速、准确，稳定性好；采用简单的紫外检测器，普适性广。

技术特征：

1.一种长链脂肪酸顺反异构体的hplc检测方法；其特征是：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种长链脂肪酸顺反异构体的hplc检测方法，其特征是：所述高效液相色谱仪理论塔板数不低于 3000。

3.根据权利要求1所述的一种长链脂肪酸顺反异构体的hplc检测方法，其特征是：所述色谱柱规格为柱长 250mm，内径 4.6mm，粒径 5μm。

技术总结
本发明公开了一种长链脂肪酸顺反异构体HPLC检测方法，主要解决现有长链脂肪酸顺反异构体检测中操作难度大、重复性差的技术问题。本发明测定方法包括以下步骤：一、准备测量的试剂；二、样品的前处理；三、进行高效液相色谱测定，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以质量百分浓度0.1%磷酸水溶液:乙腈=95:5为流动相；流速为每分钟1.0ml；柱温为25℃；检测波长为205nm。通过本发明为长链脂肪酸系列顺反异构体的检测领域提供了可靠便捷的检测手段。

技术研发人员：徐红岩,马敬祥,夏伟冬,于程伟
受保护的技术使用者：上海吉奉生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14