一种化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法与流程

本发明属于化妆品检验，特别涉及一种化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法。

背景技术：

1、近年来，由于自然环境的变化、饮食习惯的改变、生活节奏的加快等因素的综合影响，面临脱发困扰的人数日益增加，发病年龄也日趋年轻化。引起脱发的因素众多(如遗传性、内分泌失调、皮肤病和精神因素等)。雄激素性脱发(androgeneticalopecia，aga)是脱发的最主要类型，又称为脂溢性脱发，流行病学研究显示，影响到全世界50％的男性和10％的女性。我国男性aga总发病率约为20％，青年男性(18～30岁)患病率约为3％，50岁以上男性患病率超过35％。因该病直接影响毛发美观，所以患者迫切需要进行治疗。目前临床和研究报道能有效治疗和抑制脱发的药物主要有米诺地尔、螺内酯、斑蝥素、美拉酮宁、酮康唑、比马前列素、拉坦前列素、炔雌醇、氟罗地尔、非那雄胺、度他雄胺、环丙孕酮、塞替匹仑、比卡鲁胺、氟他胺、伊诺特隆、丙戊酸、香草酸甲酯、塞西咪替丁、尼鲁米特等等。中医方面，在长期临床实践中积累了诸多经验方法，但中药作用迟缓、目前应用不广。西药治疗虽然效果好、见效快，但长期使用存在影响性功能、过敏等诸多副作用，仅仅作为迫切需要治疗的患者使用，不得在日常化妆品中使用。《化妆品安全卫生规范》(2015年版)中已经明确禁用的有米诺地尔、螺内酯、斑蝥素和酮康唑等，其他药物也未被列为准用和限用组分。

2、文献检索显示，研究报告的化妆品中脱发类治疗药物检测研究的对象主要有米诺地尔、螺内酯、非那雄胺和醋酸环丙孕酮等针对性治疗用药，以及辅助用雌激素、糖皮质激素等，检测的药物种类较少，未能覆盖大多数的防脱发治疗用药。而若在化妆品非法使用，很有可能采用低剂量、多种药物复配使用的手段，这样既能达到既定的使用效果，同时也能有效逃避监测。

3、因此，目前急需建立一种覆盖面较全、灵敏度高的检测方法以达到多种类、低含量样品的检测需求。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的问题，本发明提出了一种化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法。所述的方法灵敏、可靠，可用于实际样品的检测，能够发现样品存在的问题，可实现多种类、低含量样品的检测需求。

2、本发明的目的是这样实现的：

3、一种化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，包括以下步骤：

4、步骤1，提取：

5、取待测化妆品样品于离心管中并加入适量水，涡旋振荡混合使待测化妆品样品充分溶解，加入乙腈后进行超声提取，向超声提取后的溶液中加入氯化钠，再次涡旋振荡，离心后取上清液；

6、步骤2，净化：

7、s21，取步骤1提取获得的上清液于玻璃试管中，水浴氮气吹干获得第一固体残渣，利用有机溶剂溶解所述第一固体残渣，得到试样溶液；

8、s22，利用与步骤s21相同的有机溶剂溶活化nh2固相萃取柱；

9、s23，将步骤s21获得的试样溶液上样于s22活化处理后的nh2固相萃取柱，利用步骤s21相同的有机溶剂溶进行洗脱，收集洗脱液于玻璃试管中，水浴氮气吹干获得第二固体残渣，利用乙腈溶液溶解所述第二固体残渣，过滤后获得净化后样品；

10、步骤3，液相色谱-质谱/质谱仪测定：

11、利用液相色谱-质谱/质谱仪对步骤2获得的净化后样品进行检测，其中液相色谱条件为：

12、a)色谱柱：waters accquity c18，2.1mm×100mm，1.7μm；

13、b)流动相：流动相a为乙腈；

14、流动相b为2mmol/l乙酸铵甲酸溶液，其中含0.1％甲酸，梯度洗脱；

15、c)流速：0.3ml/min；

16、d)柱温：40℃；

17、e)进样量：10μl；

18、质谱条件为：

19、a)离子化模式：电喷雾电离(esi)模式，正负离子模式；

20、b)质谱扫描方式：多反应监测(mrm)；

21、c)电喷雾电压(is)：正离子模式5500v，负离子模式-4500；

22、d)雾化气压力(gs1)：60psi；

23、e)辅助气压力(gs2)：50psi；

24、f)气帘气压力(cur)：35psi；

25、g)离子源温度(tem)：550℃；

26、h)碰撞室入口电压(ep)：正离子模式10v，负离子模式-10v；

27、i)碰撞室出口电压(cxp)：正离子模式13v，负离子模式-13v；

28、j)驻留时间：25ms。

29、所述防脱发类化学药物包括螺内酯、度他雄胺、香草酸甲酯、非那雄胺、司替匹仑、米诺地尔、拉坦前列素、西咪替丁、美拉酮宁、比马前列素、酮康唑、氟他胺、氟罗地尔和尼鲁米特。

30、进一步的，步骤1中所述待测化妆品样品包括水剂试样和乳液试样。

31、进一步的，步骤1中所述超声提取的提取时间为10～20min。

32、进一步的，步骤2中所述有机溶剂溶由二氯甲烷、甲醇和乙酸组成的混合溶液，三者体积比为90～97∶3～6∶0.1：优选的，混合溶液中二氯甲烷、甲醇、乙酸的体积比为95∶5∶0.1。

33、本发明相比现有技术的优点和有益效果是：

34、本发明所述化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，同时适用于包括水剂试样和乳液试样在内多种基质条件的检测，可同时检测多达14种防脱发类化学药物，并且验证结果表明，两种基质的待测物在1.0μg/l～50μg/l的范围内线性良好，r2均大于0.995，可实现多种类、低含量样品的检测需求。

技术特征：

1.一种化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，其特征在于，所述鉴定方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，其特征在于，所述防脱发类化学药物包括螺内酯、度他雄胺、香草酸甲酯、非那雄胺、司替匹仑、米诺地尔、拉坦前列素、西咪替丁、美拉酮宁、比马前列素、酮康唑、氟他胺、氟罗地尔和尼鲁米特。

3.根据权利要求1所述的化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，其特征在于，步骤1中所述待测化妆品样品包括水剂试样和乳液试样。

4.根据权利要求1所述的化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，其特征在于，步骤1中所述超声提取的提取时间为10～20min。

5.根据权利要求1所述的化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，其特征在于，步骤2中所述有机溶剂溶由二氯甲烷、甲醇和乙酸组成的混合溶液，三者体积比为90～97：3～6：0.1。

6.根据权利要求5所述的化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，其特征在于，步骤2所述有机溶剂溶中二氯甲烷、甲醇、乙酸的体积比为95：5：0.1。

7.根据权利要求2或3所述的化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，其特征在于，各防脱发类化学药物在乳液试样基质条件下对应的曲线方程、检出限和定量限分别为：

8.根据权利要求2或3所述的化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，其特征在于，各防脱发类化学药物在水剂试样基质条件下对应的曲线方程、检出限和定量限分别为：

技术总结
本发明涉及一种化妆品中多种防脱发类化学药物的鉴定方法，所述方法包括：提取、净化，以及液相色谱‑质谱/质谱仪测定三个步骤，适用于包括螺内酯、度他雄胺、香草酸甲酯、非那雄胺、司替匹仑、米诺地尔、拉坦前列素、西咪替丁、美拉酮宁、比马前列素、酮康唑、氟他胺、氟罗地尔和尼鲁米特在内的多种防脱发类化学药物的同时检测。通过实际样品的检测，证明本发明建立的鉴定方法能够确认化妆品中是否存在脱发治疗用药非法添加或残留的情况，不仅灵敏度高、可靠性强，回收率、精密度和检出限均满足检测要求，可用于实际样品的检测，能够发挥重要的社会效益。

技术研发人员：郑小玲,唐柏彬,莫敏,郗存显,郭思言,郑文,李贤良
受保护的技术使用者：重庆海关技术中心
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15