一种H-FABP试纸的制作方法

文档序号:36177914发布日期:2023-11-29 07:03阅读:63来源:国知局
一种的制作方法

本发明涉及生物,具体为一种h-fabp试纸。


背景技术:

1、心脏型脂肪酸结合蛋白(h-fabp)分子量约为15kda,心肌中含量丰富,h-fabp心脏含量高于其他器官和组织20倍以上,是急性心肌梗死或急性心肌损伤标志物之一,相较于已应用的标志物肌红蛋白具有更高的心脏特异性。急性冠状动脉综合征(acs)是以冠状动脉粥样硬化斑块破裂或侵袭,继发完全或不完全闭塞性血栓形成为病理基础的一组临床综合征,包括急性st段抬高性心肌梗死、急性非st段抬高性心肌梗死和不稳定型心绞痛。在急性心肌梗死(ami)或急性心肌损伤(ahi)发生30分钟后,h-fabp迅速释放进入血液,循环血中h-fabp经肾脏肾小球滤出,进入尿液,可以在尿液中检测到,h-fabp在尿液中4-8小时内达到峰值,12-24小时后回复到正常水平。检测尿液中的h-fabp对早期急性冠脉综合征(acs)和其它原因引起的急性心肌损伤,具有临床辅助诊断价值。

2、目前用于h-fabp检测的检测方法多针对血液样本,如血清、血浆、全血,收集这类样本会对人类造成创伤。


技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种h-fabp试纸,以解决上述背景技术中提出的目前用于h-fabp检测的检测方法多针对血液样本,如血清、血浆、全血,收集这类样本会对人类造成创伤的问题。

2、为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种h-fabp试纸,包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水纸,所述金标垫和所述吸水纸设置在所述硝酸纤维素膜的顶部,所述样品垫设置在所述金标垫的顶部,所述硝酸纤维素膜上设有检测线抗体和质控线抗体。

3、优选的,所述金标垫上设有金标抗体。

4、优选的,所述金标垫为聚酯纤维膜制成的垫。

5、优选的,所述样品垫为玻璃纤维膜。

6、优选的,所述金标抗体为显色抗体。

7、优选的,所述测线抗体为捕捉抗体。

8、优选的,所述金标抗体用40nm纳米金星标记。

9、优选的,该h-fabp试纸的制备方法包括如下步骤:

10、s1:采用“种子”生长法,以柠檬酸三钠为稳定剂和还原剂,制备出单分散的金纳米颗粒作为金种子,通过生长反应获得胶体级、高分散的40nm金纳米星;具体步骤如下:以柠檬酸三钠为稳定剂和还原剂,制备单分散的金纳米颗粒作为“种子”:在300℃的水浴下将97ml0.01%haucl4加热至沸腾,加入3ml重量百分比为1%的柠檬酸三钠溶液,剧烈搅拌1h,室温冷却后定容至100ml;金纳米颗粒的“种子”生长:向96ml去离子水中加入1ml1%haucl4溶液并加热到沸腾状态,然后加入一定体积的金种子溶液,在剧烈搅拌过程中,加入100-500ul1%的柠檬酸三钠溶液、5-20ml30mm对苯二酚,搅拌和加热30min,反应液颜色逐渐转变为蓝色,室温冷却后定容到100ml;

11、s2:调节纳米金星溶液ph8.0~8.5,加入显色抗体与纳米金星溶液反应,离心得沉淀,重悬沉淀,得金标抗体溶液;

12、s3:将聚酯纤维膜预处理后,烘干,用金标抗体溶液喷印;

13、s4:用捕捉抗体在已活化硝酸纤维膜上喷划检测线,真空干燥;然后用羊抗鼠igg在已活化硝酸纤维膜上喷划质控线,真空干燥;

14、s5:按样品垫、金标垫、硝酸纤维膜、吸水纸顺序粘贴在单面压敏胶的塑料板上,切割,装入塑料卡,包装。

15、与现有技术相比,本发明的有益效果是:该种h-fabp试纸,通过使用金纳米星代替目前胶体金试纸条常用的球形纳米颗粒,应用于人h-fabp检测,特异性高,结果易观察,灵敏度达到7ng/ml,5-30min内就能判读结果,具有良好的稳定性和重复性,操作简便,直接淋尿便可检测,无需特殊仪器设备,可应用于急性心肌梗死和急性心肌损伤的早期诊断。



技术特征:

1.一种h-fabp试纸,其特征在于:包括样品垫(1)、金标垫(2)、硝酸纤维素膜(3)和吸水纸(4),所述金标垫(2)和所述吸水纸(4)设置在所述硝酸纤维素膜(3)的顶部,所述样品垫(1)设置在所述金标垫(2)的顶部,所述硝酸纤维素膜(3)上设有检测线抗体(5)和质控线抗体(6)。

2.根据权利要求1所述的一种h-fabp试纸,其特征在于:所述金标垫(2)上设有金标抗体。

3.根据权利要求2所述的一种h-fabp试纸,其特征在于:所述金标垫(2)为聚酯纤维膜制成的垫。

4.根据权利要求3所述的一种h-fabp试纸,其特征在于:所述样品垫(1)为玻璃纤维膜。

5.根据权利要求4所述的一种h-fabp试纸,其特征在于:所述金标抗体为显色抗体。

6.根据权利要求5所述的一种h-fabp试纸,其特征在于:所述测线抗体(5)为捕捉抗体。

7.根据权利要求6所述的一种h-fabp试纸,其特征在于:所述金标抗体用40nm纳米金星标记。

8.根据权利要求7所述的一种h-fabp试纸,其特征在于:该h-fabp试纸的制备方法包括如下步骤:


技术总结
本发明公开了生物技术领域的一种H‑FABP试纸,包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水纸,所述金标垫和所述吸水纸设置在所述硝酸纤维素膜的顶部,所述样品垫设置在所述金标垫的顶部,所述硝酸纤维素膜上设有检测线抗体和质控线抗体,所述金标垫上设有金标抗体,所述金标垫为聚酯纤维膜制成的垫,该种H‑FABP试纸,通过使用金纳米星代替目前胶体金试纸条常用的球形纳米颗粒,应用于人H‑FABP检测,特异性高,结果易观察,灵敏度达到7ng/mL,5‑30min内就能判读结果,具有良好的稳定性和重复性,操作简便,直接淋尿便可检测,无需特殊仪器设备,可应用于急性心肌梗死和急性心肌损伤的早期诊断。

技术研发人员:张雷,张寄南
受保护的技术使用者:南京博天科智生物技术有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/16
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