一种百合韧皮部汁液样品的制备方法

本申请涉及植物汁液收集领域，特别是涉及一种百合韧皮部汁液样品的制备方法。

背景技术：

1、韧皮部是一种具有运输同化产物、贮藏和支持功能的复合组织，同化物的运输和分配对植物的生长和发育、作物的产量和品质具有重大意义。因此，韧皮部的汁液对于植物的生理生化、营养和病理有重要的研究价值。一般而言，蔗糖是韧皮部运输的主要形式，此外还有棉子糖、水苏糖等其他形式。

2、提取韧皮部汁液的方法有很多，比如蚜虫吻针法、伤流法、切口法、edta法，每种收集方法均存在自身局限性，这些方法大多应用在一些经济作物如木薯、水稻、小麦、桑树，果蔬如番茄、黄瓜等，但在园林植物(如百合)方面几乎未见报道。

3、百合是赏食药兼用型多功能花卉，具极高产业价值。百合鳞茎的发生发育问题是百合生产中最为关键的问题，与非结构性碳水化合物的合成与分解密切相关，韧皮部则是连接百合地上叶片与地下鳞茎的重要桥梁，要深入研究百合鳞茎的发生发育问题，明确韧皮部汁液的运输成分十分必要。

4、目前大部分研究均默认百合韧皮部运输的主要物质为蔗糖，但现有技术中并未有关于从百合韧皮部提取汁液的方法并确定汁液相关成分的研究，基于百合韧皮部汁液快速、多量且高纯度提取较为困难，因而百合韧皮部汁液样品的制备方法仍需进一步完善。

技术实现思路

1、为了解决上述的技术问题，本申请提供一种百合韧皮部汁液样品的制备方法，采用本方法能快速提取高纯度的百合韧皮部汁液中的蔗糖。

2、本申请提供一种百合韧皮部汁液样品的制备方法，包括如下步骤：

3、将百合叶片从茎杆处切下，并将所述百合叶片的切口部位浸入螯合剂溶液；

4、取出后，用湿纸巾将所述百合叶片包裹，并露出切口部位；

5、将所述百合叶片竖直悬挂，并将所述切口部位完全浸泡在超纯水中；

6、放置在黑暗的环境中，收集百合叶渗出的汁液；

7、通过离心分离得到上清液，过滤，得到汁液样品。

8、以下还提供了若干可选方式，但并不作为对上述总体方案的额外限定，仅仅是进一步的增补或优选，在没有技术或逻辑矛盾的前提下，各可选方式可单独针对上述总体方案进行组合，还可以是多个可选方式之间进行组合。

9、可选的，所述百合叶片选取部位为百合茎杆中上部位。

10、可选的，所述百合叶片的取样天气为光照充足的晴天。

11、可选的，所述百合叶片在所述汁液样品收集完成前通过所述湿纸巾保持湿润。

12、可选的，所述超纯水盛装在96孔板内。

13、可选的，所述96孔板中每个孔内注入150～250μl的所述超纯水。

14、可选的，所述上清液经有机系过滤器进行过滤，所述有机系过滤器的过滤孔径为0.22μm～0.45μm。

15、可选的，所述螯合剂溶液为浓度20mmol/l的edta溶液。

16、可选的，所述汁液样品放入液氮速冻20min～30min，再置于超低温环境-80℃～-100℃保存。

17、可选的，所述百合叶片通过收集架保持竖直悬挂状态，所述收集架包括：

18、横杆，所述横杆的外周环套有用于竖直夹持所述百合叶片的悬挂件；

19、支撑架，用于水平固定所述横杆；

20、容器，用于盛装所述超纯水；

21、调节件，用于调节所述容器与所述横杆之间的间距。

22、本申请通过百合叶片竖直悬挂，让韧皮部汁液在重力条件下流出并收集的方法，从而能够快速直接提取和收集韧皮部汁液，解决了现有的韧皮部渗出汁液量少，渗出速度慢，提取和收集都费时费力的问题。且本申请的制备方法操作简单，成本低，中间污染少，提取的汁液纯度较高。

技术特征：

1.一种百合韧皮部汁液样品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述百合叶片选取部位为百合茎杆中上部位。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述百合叶片的取样天气为光照充足的晴天。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述百合叶片在所述汁液样品收集完成前通过所述湿纸巾保持湿润。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述超纯水盛装在96孔板内。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述96孔板中每个孔内注入150～250μl的所述超纯水。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述上清液经有机系过滤器进行过滤，所述有机系过滤器的过滤孔径为0.22μm～0.45μm。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述螯合剂溶液为浓度20mmol/l的edta溶液。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述汁液样品放入液氮速冻20min～30min，再置于超低温环境-80℃～-100℃保存。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述百合叶片通过收集架保持竖直悬挂状态，所述收集架包括：

技术总结
本申请提供一种百合韧皮部汁液样品的制备方法，包括如下步骤：将百合叶片从茎杆处切下，并将所述百合叶片的切口部位浸入螯合剂溶液；取出后，用湿纸巾包裹将所述百合叶片包裹，并露出切口部位；将所述百合叶片竖直悬挂，并将所述切口部位完全浸泡在超纯水中；放置在黑暗的环境中，收集百合叶渗出的汁液；通过离心分离得到上清液，过滤，得到汁液样品。本申请通过百合叶片竖直悬挂，从而能够快速直接提取和收集韧皮部汁液，解决了现有的韧皮部渗出汁液量少，渗出速度慢，提取和收集都费时费力的问题。且本申请的制备方法操作简单，中间污染少，提取的汁液纯度较高。

技术研发人员：吴昀,刘洁,高聪,徐蕴晨,夏宜平,任梓铭,崔祺,黄子洋,康婕
受保护的技术使用者：浙江理工大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16