盐酸丁螺环酮中间体杂质的检测方法与流程

本发明属于分析化学领域，具体涉及盐酸丁螺环酮的合成中间体3，3-四亚甲基戊二酰亚胺中杂质iv-1、杂质iv-3和杂质iv-6的检测方法。

背景技术：

1、盐酸丁螺环酮用于治疗各种焦虑症和抑郁状态，适应不良行为以及强迫症的辅助治疗。该药物最早是在美国上市的新一代非二氮杂卓类抗焦虑药。与传统药物相比，盐酸丁螺环酮具有选择性高、疗效确切、无依赖性、不产生镇静作用和不良反应少等优点，因此是迄今为止较为理想的抗焦虑药物之一。

2、3,3-四亚甲基戊二酰亚胺为合成盐酸丁螺环酮的中间体，其质量控制关系到盐酸丁螺环酮的质量，应进行严格的控制。

3、根据3,3-四亚甲基戊二酰亚胺的合成工艺，其杂质谱如表1所示。

4、表1 3,3-四亚甲基戊二酰亚胺杂质谱列表

5、

6、杂质来源：

7、杂质iv和杂质iv-1制备3,3-四亚甲基戊二酰亚胺反应不完全的起始物料。

8、杂质iv-3为生产3,3-四亚甲基戊二酰亚胺过程中产生的工艺副产物，在后续制备丁螺环酮的工艺中可能与起始物料嘧啶并哌嗪季铵盐反应生成丁螺环酮中的杂质h。反应式如下：

9、

10、杂质iv-6为制备3,3-四亚甲基戊二酰亚胺过程中可能产生的工艺副产物，由杂质iv-3在硫酸作用下生成的杂质iv-5(在反应液中不能稳定存在)发生氨解反应而来，反应式如下：

11、

12、杂质iv-2为生产3,3-四亚甲基戊二酰亚胺过程中产生的工艺副产物。

13、以上杂质均可能残留到3,3-四亚甲基戊二酰亚胺中，需要对其残留情况进行研究，提高中间体的质量要求，保证盐酸丁螺环酮成品质量。

14、上述杂质对紫外的响应差异较大。杂质iv几乎无紫外吸收，沸点约为130℃，适宜采用气相色谱法进行检测。杂质iv-2和其他未知杂质在液相色谱仪上的紫外响应值较大，采用较小的供试品浓度(0.3mg/ml)进行高效液相色谱法研究即可，但是相同浓度下，杂质iv-1、杂质iv-3和杂质iv-6紫外响应较小，方法的检测灵敏度达不到准确定量的要求，需采用较高的供试品浓度(10mg/ml)。这导致采用适宜杂质iv-1、杂质iv-3和杂质iv-6高效液相色谱法研究的供试品浓度时，存在iv-2和其他未知杂质的干扰。

15、此外，杂质iv-1具有极性较小，保留弱的特点；杂质iv-3、杂质iv-6具有结构相似，极性相近较难分离的特点。现有技术下缺少杂质iv-3和杂质iv-6的检测方法。

技术实现思路

1、本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种盐酸丁螺环酮的合成中间体3,3-四亚甲基戊二酰亚胺中杂质的检测方法，有效排除杂质iv-2和其他未知杂质干扰杂质iv-1、杂质iv-3、杂质iv-6检测的快速、灵敏和准确的高效液相分析方法。

2、本发明具体技术方案如下：

3、一种盐酸丁螺环酮中间体3,3-四亚甲基戊二酰亚胺中杂质的检测方法，采用高效液相色谱法，色谱柱采用十八烷基键合硅胶柱为填充剂，流动相为磷酸二氢铵溶液-乙腈，二者体积比为25:(9～10)，等度洗脱，检测波长为210nm，所述杂质结构如下：

4、

5、本发明所述的检测方法：

6、供试品溶液取3,3-四亚甲基戊二酰亚胺约100mg，精密称定，置10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

7、对照品溶液取杂质iv-1对照品、杂质iv-3对照品和杂质iv-6对照品各适量，加流动相溶解并定量稀释成每1ml中分别约含杂质iv-1、杂质iv-3和杂质iv-6各约20μg的溶液。

8、精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量。杂质iv-1、杂质iv-3和杂质iv-6含量均不超过0.2％视为合格。

9、优选色谱柱shim-pack vp-ods(4.6mm×250mm，5μm)或waters c18，(4.6mm×250mm，5μm)或者效能相当的色谱柱。

10、本发明所述的检测方法，优选进样体积20μl，流速为每分钟0.9～1.1ml；等度洗脱时间不低于30分钟。

11、本发明所述的检测方法，优选磷酸二氢铵溶液的浓度为0.025mol/l。

12、本发明所述的检测方法，优选磷酸二氢铵溶液的ph值为2.4～2.5，更优选ph值为2.5。

13、本发明所述的检测方法，优选磷酸二氢铵溶液与乙腈的体积比为25:10。

14、优选柱温为50～60℃，更优选柱温为55℃。

15、本发明所述的检测方法，优选进样体积20μl，流速为每分钟0.9～1.1ml(更优选每分钟1.0ml)；等度洗脱时间不低于30分钟。

16、本发明所述的检测方法，优选供试品溶液浓度为10mg/ml。

17、本发明有益效果：本发明通过对色谱柱、柱温、流动相种类、缓冲盐的ph和浓度的筛选，提高了杂质iv-1、杂质iv-3和杂质iv-6在色谱柱的保留，同时避免了未知杂质、杂质iv和杂质iv-2对杂质iv-1、杂质iv-3和杂质iv-6检测的干扰，建立了杂质iv-1、杂质iv-3和杂质iv-6的检测方法。本方法采用等度条件，分析速度快，灵敏度和准确度高，能够很好的检测3,3-四亚甲基戊二酰亚胺中iv-1、杂质iv-3和杂质iv-6的含量。

技术特征：

1.一种盐酸丁螺环酮中间体3，3-四亚甲基戊二酰亚胺中杂质的检测方法，其特征在于采用高效液相色谱法，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为磷酸二氢铵溶液-乙腈，体积比为25:(9～10)，等度洗脱，检测波长为210nm，所述杂质结构如下：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述色谱柱为shim-pack vp-ods，4.6mm×250mm，5μm或waters c18，4.6mm×250mm，5μm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于进样体积20μl，流速为每分钟0.9～1.1ml；等度洗脱时间不低于30分钟。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于磷酸二氢铵溶液的浓度为0.025mol/l。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于磷酸二氢铵溶液的ph值为2.4～2.5。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于柱温为50～60℃。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于检测波长210nm。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于精密量取供试品溶液与杂质对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算各杂质含量。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于供试品溶液浓度为10mg/ml。

技术总结
本发明公开了盐酸丁螺环酮的中间体3，3‑四亚甲基戊二酰亚胺中杂质的检测方法，在对杂质iv‑1、杂质iv‑3、杂质iv‑6进行检测的同时，排除杂质iv‑2、杂质iv和其他未知杂质对检测的干扰。能够有助于3,3‑四亚甲基戊二酰亚胺以及盐酸丁螺环酮的质量控制。

技术研发人员：孙孝丽,姜明明,谭云,郭秀梅,孙利民,付衍琛,孙迎基,李铁军
受保护的技术使用者：山东泰合医药科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/4