同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法与流程

本发明涉及药物分析检测，具体涉及一种同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法。

背景技术：

1、6-氧代-8-氯辛酸乙酯作为一种医药中间体，在合成6-氧代-8-氯辛酸乙酯的过程中以及利用6-氧代-8-氯辛酸乙酯合成药物(例如硫辛酸)的过程中，可能会在最终药物中引入6-氧代-8-氯辛酸、6-氧代-8-氯辛酸乙酯、乙基-6-氧代-7-辛烯酸酯等基因毒性杂质，从而对用药安全性造成影响。

2、例如，专利cn116332761a、cn102731307a中均公开了6-氧代-8-氯辛酸乙酯的制备方法，用来制备合成硫辛酸的药物中间体6-氧代-8-氯辛酸乙酯，而现有的合成方法得到的6-氧代-8-氯辛酸乙酯均含有一定的杂质，继续用于合成硫辛酸，有可能会引入新的杂质，因此，需要对最终药物中可能存在的基因毒性杂质进行检测。

3、而6-氧代-8-氯辛酸、6-氧代-8-氯辛酸乙酯、乙基-6-氧代-7-辛烯酸酯三种杂质，结构相似、性质与供试品相近，为其分离和测定带来了困难。

技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题是：提供一种同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，克服了6-氧代-8-氯辛酸、6-氧代-8-氯辛酸乙酯、乙基-6-氧代-7-辛烯酸酯三种杂质性质相近、分离困难的难点，且节约了检测时间，检测方法高效、准确。

2、本发明所述的同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，利用三重四级-液质联用仪，其色谱条件包括：色谱柱为aq-c18，流动相a为纯化水，流动相b为甲醇，流速为0.4～0.6ml/min，柱温为25～40℃；质谱为电喷雾电离源，采用mrm模式；以标准曲线法分析6-氧代-8-氯辛酸、6-氧代-8-氯辛酸乙酯、乙基-6-氧代-7-辛烯酸酯三种杂质的含量。

3、具体的，所述同时测定三种杂质含量的分析方法，包括以下步骤：

4、(1)设置三重四级-液质联用仪的液相色谱及质谱的参数条件；

5、(2)将配制好的对照品和供试品溶液置于液相小瓶中，采用直接进样，采集数据，然后进行分析测试；

6、(3)分析结束之后，利用标准曲线，根据供试品溶液中测得峰面积计算溶液中三种同分异构体的浓度，进行定量分析。

7、所述液相色谱的参数条件为：

8、色谱柱为aq-c18，4.6mm×250mm，2.7μm；

9、流动相a为纯化水，流动相b为甲醇；

10、流速为0.3ml/min；

11、柱温为40℃；

12、进样量为5μl。

13、所述质谱的参数条件为：

14、采用mrm模式，离子对分别为193.2>93；221.1＞93；185.9＞140。

15、离子源温度为500℃；

16、离子喷雾电压为5500ev；

17、去簇电压为64ev；

18、碰撞能量为9～25ev。

19、所述标准曲线是通过配制线性标准溶液，依次注入液质联用仪，以各线性溶液浓度对峰面积作回归标准曲线。

20、作为一种优选方案，标准曲线可以采用以下方法制作：

21、(1)以1％甲酸甲醇为溶剂，配制三种杂质的混标贮备液，浓度为200ng/ml；

22、(2)分别精密量取200ng/ml的混标贮备液适量，用0.1％甲酸甲醇稀释制得6ng/ml、10ng/ml、29ng/ml、30ng/ml、40ng/ml的线性溶液；

23、(3)设置液相色谱及质谱的参数条件，然后依次分析线性溶液，以各线性溶液浓度对峰面积分别作回归标准曲线。

24、三种同分异构体的回归标准曲线方程如下：

25、6-氧代-8-氯辛酸：y＝8.11e4 x+3.49e4，r＝0.9996；

26、6-氧代-8-氯辛酸乙酯：y＝4.19e5 x+7.45e4，r＝0.9997；

27、乙基-6-氧代-7-辛烯酸酯：y＝4.57e4 x+3.78e4，r＝0.9993。

28、所述供试品溶液的制备方法为：取供试品约10mg，置离心管中，加甲酸浓度1％的甲醇溶液1ml，涡旋溶解，即得。

29、将配制好的供试品溶液置于液相小瓶中，采集数据，然后根据峰面积计算溶液中三种杂质的浓度，以标准曲线法分析三种杂质的含量。

30、与现有技术相比，本发明具有以下优点：

31、(1)本发明的检测分析方法无需提取、浓缩、净化、衍生等前处理工作，供试品前处理工作较简单，仅一步即可；

32、(2)本发明的检测分析方法采用aq-c18色谱柱，结合合适的测试条件，具有较好的保留作用，可同时测定三种杂质，方便快捷，效率高，灵敏度高，有效解决了分离困难、多方法检测的问题；

33、(3)本发明的检测分析方法质谱检测器离子源污染程度减轻，维护工作相对简单。

技术特征：

1.一种同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，其特征在于：利用三重四级-液质联用仪，其色谱条件包括：色谱柱为aq-c18，流动相a为纯化水，流动相b为甲醇，流速为0.4～0.6ml/min，柱温为25～40℃；质谱为电喷雾电离源，采用mrm模式；以标准曲线法分析6-氧代-8-氯辛酸、6-氧代-8-氯辛酸乙酯、乙基-6-氧代-7-辛烯酸酯三种杂质的含量。

2.根据权利要求1所述的同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，其特征在于：包括以下步骤：

3.根据权利要求1或2所述的同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，其特征在于：所述液相色谱的参数条件为：

4.根据权利要求1或2所述的同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，其特征在于：所述质谱的参数条件为：

5.根据权利要求2所述的同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，其特征在于：所述标准曲线是配制线性标准溶液，依次注入液质联用仪，以各线性溶液浓度对峰面积作回归曲线。

6.根据权利要求5所述的同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，其特征在于标准曲线采用以下方法制作：

7.根据权利要求2或5或6所述的同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，其特征在于：三种杂质的回归标准曲线方程如下：

8.根据权利要求2所述的同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，其特征在于：所述供试品溶液的制备方法为：取供试品约10mg，置离心管中，加1％甲酸甲醇1ml，涡旋溶解，即得。

9.根据权利要求2或8所述的同时测定药品中6-氧代-8-氯辛酸及相关杂质的方法，其特征在于：将配制好的供试品溶液置于液相小瓶中，采集数据，然后根据峰面积计算溶液中三种杂质的浓度，以标准曲线法分析三种杂质的含量。

技术总结
本发明涉及药物分析检测技术领域，具体涉及一种同时测定药品中6‑氧代‑8‑氯辛酸及相关杂质的方法。所述分析方法，利用三重四级‑液质联用仪，其色谱条件包括：色谱柱为AQ‑C18，流动相A为纯化水，流动相B为甲醇，流速为0.4～0.6ml/min，柱温为25～40℃；质谱为电喷雾电离源，采用MRM模式；以标准曲线法分析三种杂质的含量。本发明的分析方法克服了6‑氧代‑8‑氯辛酸、6‑氧代‑8‑氯辛酸乙酯、乙基‑6‑氧代‑7‑辛烯酸酯三种杂质性质相近、分离困难的难点，且节约了检测时间，检测方法高效、准确。

技术研发人员：徐东,李伟,张文玲,王福芳
受保护的技术使用者：淄博高新技术产业开发区生物医药研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/2/1