干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的检测方法与流程

本申请涉及微生物检测领域，尤其涉及一种干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的检测方法。

背景技术：

1、奶酪作为一种发酵的牛奶制品，因其营养价值丰富而深受消费者喜爱。在奶酪生产和加工过程中，受限于奶酪原料来源不同、设备杀菌不彻底、生产环境和人员操作污染等原因，易出现微生物污染影响奶酪及相关产品品质的问题。因此，为确保奶酪及相关产品的质量需要对其微生物进行检测。

2、目前，通常采用国家标准检测法进行微生物的检测，使用一系列非选择性或选择性富集方法培养微生物，然后进行生化确认。但是，国家标准检测法需要在检测过程中配置一定数量的具有专业技能的检测人员，并且检测使用的培养基数量较多，由此产生较多废弃物，不利于节能环保。

技术实现思路

1、有鉴于此，本申请提出了一种干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的检测方法，以解决上述问题。

2、根据本申请的一方面，提供了一种干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的检测方法，包括如下步骤：

3、获取奶酪相关产品的样品，并在预设的预处理条件下处理，得到样品匀液；其中，所述奶酪相关产品包括干酪、再制干酪和干酪制品；

4、获取所述奶酪相关产品的样品匀液，过滤后得到过滤清液，与预设荧光染色液混合，得到待测液；

5、利用流式细胞仪对所述待测液进行荧光分析，输出流式细胞技术检测结果；

6、将所述流式细胞技术检测结果输入检测分析模型，得到检测结果。

7、作为本申请的一可选实施方案，可选地，获取奶酪相关产品的样品，并在预设的预处理条件下处理，得到样品匀液，包括：

8、获取奶酪相关产品的样品；

9、预设孵育条件，将所述奶酪相关产品的样品带包装在所述孵育条件下培养；

10、预设均质条件，将孵育后的所述样品按照所述均质条件均质，得到奶酪相关产品的样品匀液。

11、作为本申请的一可选实施方案，可选地，预设孵育条件，将所述奶酪相关产品的样品带包装在所述孵育条件下培养，包括：

12、预设培养箱的温度为36±1℃；

13、将带包装的所述奶酪及相关产品的样品置于所述培养箱中保温培养24h。

14、作为本申请的一可选实施方案，可选地，预设均质条件，将孵育后的所述奶酪及相关产品的样品按照所述均质条件均质，得到样品匀液，包括：

15、按照预设比例获取孵育后的所述奶酪及相关产品的样品置于均质袋中；其中，所述均质袋内装有无菌生理盐水；

16、利用均质器对所述样品和所述无菌生理盐水均质1-2min，得到样品匀液。

17、作为本申请的一可选实施方案，可选地，获取所述奶酪相关产品的样品匀液过滤后的过滤清液，并与预设荧光染色液混合，得到待测液，包括：

18、获取所述均质袋中滤网一侧的过滤清液；

19、将所述过滤清液和sybr green i荧光染色液以及碘化丙啶pi荧光染色液混合孵育20min，得到待测液。

20、作为本申请的一可选实施方案，可选地，在所述待测液中，所述过滤清液、所述sybr green i荧光染色液和所述碘化丙啶pi荧光染色液的用量依次为400ul、2ul和20ul。

21、作为本申请的一可选实施方案，可选地，利用流式细胞仪对所述待测液进行荧光分析，输出流式细胞技术检测结果之前，还包括：

22、对所述流式细胞仪进行性能核查，得到核查结果，并在所述核查结果合格时对所述待测液检测。

23、作为本申请的一可选实施方案，可选地，利用流式细胞仪对所述待测液进行荧光分析，输出流式细胞仪检测结果，包括：

24、获取所述待测液；

25、设置所述流式细胞仪的激光波长为488nm后，对所述待测液进行荧光分析；

26、扣除荧光分析时的基质荧光干扰，输出流式细胞仪检测结果。

27、作为本申请的一可选实施方案，可选地，将所述流式细胞技术检测结果输入检测分析模型，得到检测结果，包括：

28、构建检测分析模型；

29、将所述流式细胞仪检测结果输入所述检测分析模型，得到检测结果。

30、作为本申请的一可选实施方案，可选地，还包括：

31、在所述奶酪相关产品的样品变更时，确定相应的背景干扰并消除。

32、本申请的有益效果：

33、本申请采用流式细胞检测方法对奶酪相关产品的产品进行微生物检测，通过荧光分析后输出的流式细胞技术检测结果实现对细胞定性或定量的快速分析。无需投入过多的专业检测人员及检测设备，即可实现样品检测的目的。具体的，包括：获取奶酪相关产品的样品，并在预设的预处理条件下处理，得到样品匀液；其中，奶酪相关产品包括干酪、再制干酪和干酪制品；获取样品匀液过滤后的过滤清液，并与预设荧光染色液混合，得到待测液；利用流式细胞仪对待测液进行荧光分析，输出流式细胞技术检测结果；将流式细胞仪检测结果输入检测分析模型，得到检测结果。本申请的奶酪相关产品的微生物检测方法，能够有效缩短检测周期，通常22-26小时即可实现奶酪样品的批量检测，同时能够一次性检测出国家标准要求的全部微生物项目，降低生产企业检测成本。

34、根据下面参考附图对示例性实施例的详细说明，本申请的其它特征及方面将变得清楚。

技术特征：

1.一种干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的检测方法，其特征在于，获取奶酪相关产品的样品，并在预设的预处理条件下处理，得到样品匀液，包括：

3.根据权利要求2所述的干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的快速检测方法，其特征在于，预设孵育条件，将所述奶酪相关产品的样品带包装在所述孵育条件下培养，包括：

4.根据权利要求2所述的干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的快速检测方法，其特征在于，预设均质条件，将孵育后的所述样品按照所述均质条件均质，得到样品匀液，包括：

5.根据权利要求4所述的干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的快速检测方法，其特征在于，获取所述奶酪相关产品的样品匀液过滤后的过滤清液，并与预设荧光染色液混合，得到待测液，包括：

6.根据权利要求5所述的干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的快速检测方法，其特征在于，在所述待测液中，所述过滤清液、所述sybr green i荧光染色液和所述碘化丙啶pi荧光染色液的用量依次为400ul、2ul和20ul。

7.根据权利要求1所述的干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的快速检测方法，其特征在于，利用流式细胞仪对所述待测液进行荧光分析，输出流式细胞技术检测结果之前，还包括：

8.根据权利要求1所述的干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的快速检测方法，其特征在于，利用流式细胞仪对所述待测液进行荧光分析，输出流式细胞技术检测结果，包括：

9.根据权利要求1所述的干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的快速检测方法，其特征在于，将所述流式细胞技术检测结果输入检测分析模型，得到检测结果，包括：

10.根据权利要求1所述的干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的快速检测方法，其特征在于，还包括：

技术总结
本申请涉及一种干酪、再制干酪及干酪制品中多种微生物含量的检测方法，该方法包括：获取奶酪相关样品，并在预设的预处理条件下处理，得到奶酪样品匀液；获取奶酪样品匀液过滤后的过滤清液，并与预设荧光染色液混合，得到待测液；利用流式细胞仪对待测液进行荧光分析，输出流式细胞技术检测结果；将流式细胞技术检测结果输入检测分析模型，得到检测结果。本申请采用流式细胞检测方法对奶酪相关产品进行微生物检测，通过荧光分析后输出的流式细胞技术检测结果实现对微生物定性或定量的快速检测计数。无需投入过多的专业检测人员及检测设备，即可实现样品检测的目的。

技术研发人员：李梅,智丽慧,鲁润林,金珠
受保护的技术使用者：上海妙可蓝多生物技术研发有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/2/29