一种测定S-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体的方法与流程

本发明涉及一种柱前衍生化hplc法分析s-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体的方法，属于药品分析检测。

背景技术：

1、(s)-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐在常温常压下为白色固体，熔点大于131℃，属于氨基醇类衍生物，可作为医药化学和有机合成中间体，是药物分子利奈唑胺的合成中间体。

2、目前暂无(s)-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体分离的文献报道，且目标化合物属于一对手性异构体，常规的反相分离较困难，通过正相手性柱分离可能性较大，但目标化合物又无紫外吸收，所以通过常规的分离手段难于对目标化合物进行分离，故通过柱前衍生化，在色谱分离之前将样品与一定的化学试剂发生化学反应，将样品中的目标化合物制备成适当的衍生物，通过后者的分析检测可以对目标化合物进行定性和定量分析。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本发明提供了一种柱前衍生化hplc法分析s-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体的方法。该方法采用苯基键合硅胶为填充剂(agilentzorbax sb-phenyl，4.6mm×250mm，5μm)进行分析检测。该方法能够简单、准确、高效的分析检测s-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体，有效控制其质量。

2、本发明所述一种柱前衍生化hplc法分析s-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐(标记为sm2)及其对映异构体的方法，包括如下步骤：采用苯基键合硅胶为填充剂(agilent zorbaxsb-phenyl，4.6mm×250mm，5μm或效能相当的色谱柱)并使用水-甲醇混合溶剂为流动相进行分析检测。

3、进一步地，在上述技术方案中，具体包括以下步骤：a、衍生化溶液制备；b、hplc分析；c、按面积归一化法计算对映异构体含量。

4、a、衍生化溶液制备方法：

5、(1)取nα-(2,4-二硝基-5-氟苯基)-l-丙氨酰胺适量，精密称定，用丙酮溶解并稀释制成每1ml约含10mg溶液，摇匀，作为衍生化试剂；

6、(2)精密量取1mol/l碳酸氢钠溶液1ml，置10ml量瓶中，加衍生化试剂3ml，于40℃水浴锅中加热120min，再加2mol/l盐酸溶液1ml，用稀释剂[甲醇/水＝50/50(v/v)]稀释至刻度，摇匀，作为空白溶剂；

7、(3)取本品适量，精密称定，加水溶解并用稀释剂稀释制成每1ml约含4mg的溶液，作为供试品贮备液；精密量取该贮备液1ml，置10ml量瓶中，加1mol/l碳酸氢钠溶液1ml，衍生化试剂(nα-(2,4-二硝基-5-氟苯基)-l-丙氨酰胺)3ml，于40℃水浴锅中加热120min，再加2mol/l盐酸溶液1ml，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

8、b、hplc分析方法

9、(1)选用色谱柱，以水为流动相a；以甲醇为流动相b；按下表进行线性梯度洗脱；

10、 时间(分钟) 流动相a(％) 流动相b(％) 0 95 5 45 68 32 115 68 32 116 20 80 121 20 80 123 95 5 130 95 5

11、(2)设置流动相流速为1.0ml/min；

12、(3)设置液相色谱柱温箱温度为30℃；检测波长340nm；进样量为10μl。

13、c、获得结果：按照上述hplc检测的色谱条件进样分析，按面积归一化法计算对映异构体含量。

14、说明书附图

15、图1为实施例1中空白溶剂色谱图；

16、图2为实施例1中供试品溶液色谱图。

技术特征：

1.一种测定s-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体的方法，其特征在于，包括如下步骤：采用苯基键合硅胶为填充剂并使用水-甲醇混合溶剂为流动相进行分析检测。

2.根据权利要求1所述s-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体的方法，其特征在于：色谱柱选自agilent zorbax sb-phenyl，4.6mm×250mm，5μm或效能相当的色谱柱。

3.根据权利要求1所述s-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：a、衍生化溶液制备；b、hplc分析；c、按面积归一化法计算对映异构体含量。

4.根据权利要求3所述s-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体的方法，其特征在于，衍生化溶液制备过程为：

5.根据权利要求3所述s-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐及其对映异构体的方法，其特征在于，hplc分析过程为：

技术总结
本发明公开了一种柱前衍生化HPLC法分析S‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐及其对映异构体的方法，属于药品分析检测技术领域。该方法采用苯基键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX SB‑Phenyl，4.6mm×250mm，5μm)进行分析检测。该方法能够简单、准确、高效的分析检测S‑1‑氨基‑3‑氯‑2‑丙醇盐酸盐及其对映异构体，有效控制其质量。

技术研发人员：黄波,吕思言
受保护的技术使用者：重庆天地药业有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/2/19