FGF21作为肿瘤免疫治疗靶点在制备筛选抗肿瘤药物中的应用

：本发明属于生物医药领域，涉及肿瘤免疫治疗靶点，具体来说是fgf21作为肿瘤免疫治疗靶点在制备筛选抗肿瘤的药物中的应用。

背景技术

0、
背景技术：

1、恶性肿瘤是威胁人类生命健康的主要疾病，临床治愈率低下，随着诊疗技术的不断提高，目前除了手术切除、化疗、放疗、分子靶向治疗之外，肿瘤免疫治疗已成为肿瘤治疗的新途径，以免疫检查点抑制剂(immune checkpoint blockade,icb)为主的肿瘤免疫治疗在许多癌症类型中显示出临床疗效，然而icb在患者中的应答率不足20％，表明肿瘤免疫治疗仍然面临许多未知的障碍。

2、cd8+杀伤性t细胞被认为是肿瘤微环境中最主要的抗肿瘤效应细胞，其细胞毒性强弱以及在肿瘤微环境中的浸润情况与肿瘤患者的预后呈显著正相关。肿瘤细胞与cd8+t细胞之间的相互作用是影响免疫治疗疗效的关键因素。肿瘤细胞高表达多种免疫抑制因子介导肿瘤免疫逃逸，如肿瘤细胞高表达pd-l1,与t细胞上pd-1受体结合抑制cd8+t细胞的杀伤功能。靶向pd-l1或pd-1的阻断抗体虽然可以有效改善肿瘤治疗，但实际上仅有少量患者从阻断治疗中获益，因此亟待开发新的靶点以显著提高肿瘤免疫治疗效果。

3、肿瘤分泌蛋白(tumor-secreted proteins,tsps)是癌细胞适应和修饰周围微环境的主要介质，包括细胞因子、生长因子、糖蛋白、代谢物和多糖结合蛋白，并负责建立导致肿瘤细胞躲避免疫监视实现免疫逃逸从而促进肿瘤发生发展的免疫抑制网络。成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,fgf21)是非经典的fgf蛋白，由于缺乏肝素结合结构域而能够分泌到细胞外，fgf21在调节机体葡萄糖、脂质和能量代谢中发挥重要作用。已有研究表明fgf21蛋白可用于治疗二型糖尿病、肥胖症以及酒精性肝炎等代谢疾病。但是现有技术尚未披露fgf21与肿瘤免疫治疗的关系。

技术实现思路

0、
技术实现要素：

1、针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了fgf21作为肿瘤免疫治疗靶点在制备筛选抗肿瘤的药物中的应用，所述的这种fgf21作为肿瘤免疫治疗靶点在制备筛选抗肿瘤的药物中的应用要解决现有技术中的免疫治疗靶点对于肿瘤免疫的治疗效果不佳的技术问题。

2、本发明提供了fgf21作为肿瘤免疫治疗靶点在制备筛选抗肿瘤的药物中的应用。

3、进一步的，所述肿瘤免疫治疗药物针对的肿瘤主要为实体瘤，包括但不限于：肠癌，乳腺癌或者黑色素瘤等。

4、本发明还提供了fgfg21的中和抗体在制备治疗肿瘤的药物中的用途。

5、本发明还提供了检测fgfg21的试剂在制备预测肿瘤预后效果的检测试剂盒中的用途。

6、本发明还提供了一种检测肿瘤预后效果的试剂盒，含有检测fgfg21的试剂。

7、本发明还提供了fgfg21的中和抗体联合使用anti-pd-1免疫检查点抑制剂在制备治疗肿瘤的药物中的用途。

8、本发明利用酶联免疫吸附试验(elisa)鉴定出fgf21在多种肿瘤细胞中分泌表达，并与肿瘤的不良预后呈现正相关，随后通过一系列体内体外实验证实fgf21抑制cd8+t细胞杀伤性功能，使用中和抗体阻断fgf21，可显著恢复cd8+t细胞功能，抑制肿瘤生长，联合使用anti-pd-1等免疫检查点抑制剂具有明显的协同效应。因此fgf21可作为一个新的肿瘤免疫治疗靶点用以制备药物增强抗肿瘤免疫应答，具有很好的应用潜力和价值。

9、进一步的，fgf21为分泌蛋白，蛋白结构域清晰，蛋白大小约为19kd，筛选靶向fgf21的特异性中和抗体在技术上比较容易实现。fgf21的作用受体主要为fgfr1和klb，除了开发有效的fgf21中和抗体之外，也可以开发靶向fgf21及其作用受体的小分子化合物，以达到抑制fgf21信号的目的。

10、进一步的，fgf21作为一种非典型的成纤维细胞生长因子主要有肝脏合成并向全身不同的靶标发出信号。fgf21发挥生物作用时，需要先与靶细胞的β-klotho(klb)受体形成复合物再与fgfr受体蛋白结合，才能传递细胞信号，主要参与葡萄糖，脂肪等能量代谢的生物活动。

11、进一步的，fgfg21的中和抗体是指对fgf21蛋白能抑制其活性的蛋白抗体，对于fgf21的阻断作用包括但不局限于部分中和或完全中和fgf21蛋白的生物学活性。具体可以购买自(r&d,cat#af3057)。识别的具体抗原序列如下：

12、aypipdsspllqfggqvrqrylytdddqdteahleiredgtvvgaahrspesllelkalkpgviqilgvkasrflc qqpdgalygsphfdpeacsfrellledgynvyqseahglplrlpqkdspnqdatswgpvrflpmpgllhepqdqagflpp eppdvgssdplsmveplqgrspsyas(seq id no.1)。

13、中和fgf21蛋白的活性是指使fgf21蛋白的活力下降，相比阻断前，fgf21的活力至少下降10％，较佳的降低至少30％，再佳的降低至少50％，更佳的降低至少70％，最佳的降低至少90％。

14、本发明和已有技术相比，其技术效果是积极和明显的。本发明发现，fgf21在调控cd8+t细胞免疫应答反应上起着关键作用，中和fgf21的活性可以增强cd8+t细胞对靶细胞的杀伤能力以及在肿瘤组织中的浸润。在此基础上认为，fgf21适合作为药物作用靶点应用于肿瘤免疫治疗药物的筛选。

技术特征：

1.fgf21作为肿瘤免疫治疗靶点在制备筛选抗肿瘤的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤包括但不限于：肠癌，乳腺癌或者黑色素瘤。

3.fgfg21的中和抗体在制备治疗肿瘤的药物中的用途。

4.检测fgfg21的试剂在制备预测肿瘤预后效果的检测试剂盒中的用途。

5.一种检测肿瘤预后效果的试剂盒，其特征在于，含有检测fgfg21的试剂。

6.fgfg21的中和抗体联合使用anti-pd-1免疫检查点抑制剂在制备治疗肿瘤的药物中的用途。

技术总结
本发明提供了FGF21作为肿瘤免疫治疗靶点在制备筛选抗肿瘤的药物中的应用。本发明还提供了FGFG21的中和抗体在制备治疗肿瘤的药物中的用途。本发明利用酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定出FGF21在多种肿瘤细胞中分泌表达，并与肿瘤的不良预后呈现正相关，随后通过一系列体内体外实验证实肿瘤细胞来源的FGF21能显著抑制CD8<supgt;+</supgt;T细胞杀伤性功能，如使用中和抗体阻断FGF21，可显著恢复CD8<supgt;+</supgt;T细胞功能，抑制肿瘤生长，联合使用anti‑PD‑1等免疫检查点抑制剂具有明显的协同效应。因此FGF21可作为一个新的肿瘤免疫治疗靶点用以制备药物增强抗肿瘤免疫应答，具有很好的应用潜力和价值。

技术研发人员：桂俊,胡策桂,乔文
受保护的技术使用者：上海交通大学医学院附属仁济医院
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11