用于血细胞分析仪的藏酋猴源全血质控品及其制备方法

本发明涉及生物制品试剂，具体而言，涉及用于血细胞分析仪的藏酋猴源全血质控品及其制备方法。

背景技术：

1、血细胞分析仪作为医疗卫生机构和检验机构等不可缺少的诊断仪器，其血常规检测数据对临床疾病的诊断、治疗及预后判断起到重要作用。因此做好血细胞分析仪室内质量控制保证检测结果准确性十分重要。良好的室内质控离不开与待测标本性质近似且质量稳定的质控品。

2、目前，国内各医疗机构、第三方检验机构等细胞分析仪质控品主要依赖进口，但由于全血质控品需要冷藏运输、血液制品进口需要受到管制等各方面的因素，国内购买血细胞分析仪质控品并不方便，并且其价格也较为昂贵。国内以猪血、禽血、蹄科动物血、颗粒模拟物等部分或全部代替人血成分制备的血细胞分析仪质控品，但临床效果差强人意。其原因在于：以上述动物血液为来源制备的全血质控品与临床人血样本种属差异较大，存在基质效应，且细胞形态、结构等与人血细胞存在差异，在稳定性、均匀性等方面还存在欠缺，很难达到理想的质控效果，不能完全满足临床质控要求。因此研制用于血细胞分析仪质控使用的室内质控品替代进口产品已成为检验医学刻不容缓的任务。

3、鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种用于血细胞分析仪的藏酋猴源全血质控品及其制备方法以解决上述技术问题。

2、本发明是这样实现的：

3、第一方面，本发明提供了一种用于血细胞分析仪的藏酋猴源全血质控品，其包括：白细胞：(4-6)×109/l；红细胞：(1.5-2.5)×1012/l；血小板：(1.5-2.5)×1012/l；平衡液：ph7.2-7.4，渗透压280-320mosm；平衡液占全血质控品体积的50-70％；

4、其中，平衡液包括：ph为7.2-7.4的2×hepes、0.12-0.14mol/l的柠檬酸钠、0.4-0.6mol/l的甘露醇、0.1-0.3％的甘油、0.4-0.6mol/l的葡萄糖、0.05-0.15％的生物防腐剂和水。

5、在本发明应用较佳的实施方式中，全血质控品包括：白细胞：5×109/l；红细胞：2×1012/l；血小板：2×1012/l。

6、在本发明应用较佳的实施方式中，平衡液占全血质控品体积的60％。

7、在本发明应用较佳的实施方式中，平衡液的ph为7.26-7.3；

8、在一种可选的实施方式中，平衡液的渗透压为304-320mosm。

9、在本发明应用较佳的实施方式中，平衡液包括：ph为7.2-7.4的2×hepes、0.129-0.14mol/l的柠檬酸钠、0.5-0.6mol/l的甘露醇、0.2-0.3％的甘油、0.5-0.6mol/l的葡萄糖、0.1-0.15％的生物防腐剂和水；

10、在一种可选的实施方式中，平衡液包括：ph为7.2-7.4的2×hepes、0.129mol/l的柠檬酸钠、0.5mol/l的甘露醇、0.2％的甘油、0.5mol/l的葡萄糖、0.1％的生物防腐剂和水。

11、在本发明应用较佳的实施方式中，生物防腐剂选自proclin150、proclin200和proclin300中的任意一种。

12、在本发明应用较佳的实施方式中，固定液与血细胞的体积比为1：(4-6)。

13、第二方面，本发明还提供了一种藏酋猴源全血质控品的制备方法，其包括如下步骤：

14、将分离出的正常藏酋猴源的白细胞、红细胞和血小板分别与固定液按照1:(4-6)的体积比混合，固定后，调整浓度，使得白细胞浓度为5×1010/l，血小板浓度为2×1013/l，红细胞浓度为1×1013/l；

15、然后将白细胞、血小板、红细胞和平衡液按照1:1:2:6的体积比混合。

16、固定液包括：2-3％(v/v)的甲醛和0.4-0.6％(v/v)的戊二醛。

17、在本发明应用较佳的实施方式中，将分离出的正常藏酋猴源的白细胞、红细胞和血小板分别与固定液按照1:5的体积比混合；

18、在一种可选的实施方式中，固定是低温固定；

19、在一种可选的实施方式中，在0-8℃下固定。

20、在本发明应用较佳的实施方式中，固定过程中，每隔8-10min混悬一次。

21、在本发明应用较佳的实施方式中，固定时间为20-60min；在一种可选的实施方式中，固定时间为40min；

22、在一种可选的实施方式中，固定后，还包括离心，弃上清；

23、在一种可选的实施方式中，离心的转速为1800-2200rpm，2-8℃离心20min，弃上清后加pbs重悬，2800-3200rpm，离心5min，弃上清。

24、第三方面，本发明还提供了一种试剂盒，其包括上述的藏酋猴源全血质控品或由上述制备方法制备的藏酋猴源全血质控品。

25、本发明具有以下有益效果：

26、本发明以藏酋猴外周血为原料，制备了一种稳定性好、均匀性好且符合临床质控品要求，并与人血样本类似的全血质控品。质控品中的柠檬酸钠作用为调节溶液ph值在稳定范围，维持渗透压平衡，防止细胞各组分聚集和红细胞裂解；甘露醇和甘油起到维持细胞膜完整性，防止溶血的作用；葡萄糖提供了红细胞代谢所需能量；生物防腐剂起到防止病原菌污染的作用。

27、与现有的人源全血质控品相比，本发明通过的藏酋猴源全血质控品具有原材料来源方便可行，成本低廉，质控品制备方法简单易行，可满足对血细胞分析仪质量控制的要求，具有较大的市场推广应用价值。

28、本发明提供的全血质控品稳定性非常好，保存90天后，各指标长期稳定，十分适宜血细胞分析仪应用。

29、此外，本发明还提供了藏酋猴源全血质控品在试剂盒中的应用。

技术特征：

1.一种用于血细胞分析仪的藏酋猴源全血质控品，其特征在于，其包括：白细胞：(4-6)×109/l；红细胞：(1.5-2.5)×1012/l；血小板：(1.5-2.5)×1012/l；平衡液：ph7.2-7.4，渗透压280-320mosm；且所述平衡液占所述全血质控品体积的50-70％；

2.根据权利要求1所述的藏酋猴源全血质控品，其特征在于，所述全血质控品包括：白细胞：5×109/l；红细胞：2×1012/l；血小板：2×1012/l；

3.根据权利要求2所述的藏酋猴源全血质控品，其特征在于，所述平衡液包括：ph为7.2-7.4的2×hepes、0.129-0.14mol/l的柠檬酸钠、0.5-0.6mol/l的甘露醇、0.2-0.3％的甘油、0.5-0.6mol/l的葡萄糖、0.1-0.15％的生物防腐剂和水；

4.根据权利要求3所述的藏酋猴源全血质控品，其特征在于，所述生物防腐剂选自proclin150、proclin200和proclin300中的任意一种。

5.根据权利要求4所述的藏酋猴源全血质控品，其特征在于，所述生物防腐剂选自proclin300。

6.如权利要求1-5任一项所述的藏酋猴源全血质控品的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，将分离出的正常藏酋猴源的白细胞、红细胞和血小板分别与所述固定液按照1:5的体积比混合；

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述固定过程中，每隔8-10min混悬一次。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述固定时间为20-60min；优选地，固定时间为40min；

10.一种试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1-5任一项所述的藏酋猴源全血质控品或权利要求6-9任一项所述的制备方法制备的藏酋猴源全血质控品。

技术总结
本发明公开了用于血细胞分析仪的藏酋猴源全血质控品及其制备方法，涉及生物制品试剂技术领域。其包括：白细胞：(4‑6)×109/L；红细胞：(1.5‑2.5)×1012/L；血小板：(1.5‑2.5)×1012/L；平衡液：pH7.2‑7.4，渗透压280‑320mOsm。本发明以藏酋猴外周血为原料，制备了一种稳定性好、均匀性好且符合临床质控品要求，并与人血样本类似的全血质控品。此外，本发明提供的质控品制备方法简单易行，可满足对血细胞分析仪质量控制的要求，具有较大的市场推广应用价值。

技术研发人员：张新尚,雷毅,王果,杨帆,辜玉刚
受保护的技术使用者：四川省医学科学院·四川省人民医院实验动物研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/3/24